Inmunologia

1. Describa de forma secuencial y muy completa, el proceso de maduración de un LT.

La característica que distingue el reconocimiento del antigeno por los linfocitos B y T es la restricción CMH. Tanto la maduración de las células progenitoras en el timo como la activación de los LT vírgenes en la periferia están condicionadas por la intervención de las moléculas CMH. La diversidad de reconocimiento antigénico de la población T se reduce durante la maduración tímica, mediante un proceso de selección que solo permite madurar a las células que reconocen al CMH y reaccionan frente a lo no propio. Los estados finales de la maduración discurren a lo largo de dos vías, que generan dos subpoblaciones (CD4+ y CD8+) funcionalmente distintas y que presentan restricción por moléculas CMH de Clase II y Clase I, respectivamente.

Los progenitores T empiezan pronto a emigrar al timo desde los sitios de hematopoyesis iniciales (11 días de gestación en el ratón y 8-9 semana en humanos). La maduración supone el reordenamiento de los genes para el TCR de la línea germinal y la expresión de una serie de marcadores de membrana. Las formas de desarrollo en el timo se llaman timocitos, que proliferan y se diferencian a lo largo de vías de desarrollo que producen distintas subpoblaciones T. El desarrollo T comienza cuando arriba al timo un pequeño número de Precursores linfoides desde la sangre. Hasta ahora se pensaba que la arquitectura tímica era necesaria para el desarrollo T, pero se ha comprobado por experiencias in vitro que lo necesario es que las células estromales de la médula ósea expresen el ligando para el receptor Notch; las células que portan este receptor se comprometen desde este momento con la línea de desarrollo T. Tras la llegadla timo las células precursoras, que todavía no han reordenado sus genes, penetran en el cortex y proliferan lentamente.

Durante unas tres semanas pasan por una serie de estados que se caracterizan por cambios fenotípicos en su superficie. Al comienzo del desarrollo carecen de CD4 y CD8, por lo que se denominan células doble negativas (DN). Estas DN pueden dividirse un cuatro subpoblaciones (DN1-4), caracterizadas por la presencia o ausencia de ciertas moléculas como c-Kit (el receptor para el factor de crecimiento de células madre o CSF), CD44 (una molécula de adhesión) y CD25 (cadena alfa del receptor para IL-2). Durante la fase DN2 empieza el reordenamiento génico de las cadenas, γ, δ y ε; el locus α no se reordena, posiblemente porque el DNA está muy compactado y no es accesible a la maquinaria de recombinación. Cuando las células progresan hacia DN3, prosigue el reordenamiento de TCRγ, TCRδ y TCRε. Las células destinadas a ser Tγδ suponen un pequeño porcentaje (< 5% de los timocitos maduros) divergen en la transición entre DN2 y DN3 y maduran con pocos cambios superficiales.

La mayor parte de las células están destinadas a ser Tαβ, adquieren el fenotipo DN3 (c-Kit-, CD44-, CD25+) y ya expresan la cadena β del receptor. Esta cadena β se combina con una glucoproteína de 33 kDa, conocida como cadena pre-T, y se asocia con CD3 para formar el complejo receptor pre-T (las proteínas Notch tienen un papel crítico en esta fase del desarrollo T; las que no expresan Notch no siguen la maduración). La formación del pre-TCR activa una vía de transducción de señales, con varias consecuencias: • Indica que una célula ha conseguido un reordenamiento productivo de la cadena β del TCR y la señala para la posterior proliferación y maduración • Suprime reordenamientos posteriores de gen de cadenas β (exclusión alélica) • Vuelve a la célula susceptible al reordenamiento de la cadena α del TCR • Induce la progresión del desarrollo hacia el estado doble positivo (CD4+CD8+) Tras el reordenamiento de la cadena β la célula progresa rápidamente por DN3 y DN4 y da lugar a la población doble positiva (DP) (se expresan los co-receptores CD4 y CD8), que es una fase de proliferación rápida. Sin embargo, en este punto todavía no se ha reordenado el locus α, que solo comienza cuando termina la proliferación de las DP y aumentan los niveles de RAG-2. Esta estrategia aumenta la diversidad del TCR, pues la multiplicación de una población con el gen β ya reordenado permite que esta cadena se asocie con una cadena α diferente en cada célula particular del clon. El desarrollo T es un proceso derrochador para el hospedador, pues el 98% de todos los timocitos no llegan a madurar. Los DP que expresan el complejo FCR-CD3 y sobreviven a la selección positiva tímica se desarrollan hasta células positiva simple (SP) CD4+ o CD8+. Estas células PS sufren una selección negativa adicional y migran desde el cortex hasta la médula para abandonar el timo con la circulación.

2. Que es la selección positiva y negativa.

La selección positiva elimina los timocitos que no reconocen las MHC propias, y la negativa elimina los que reconocen MHC-péptidos con alta intensidad. La función de la selección positiva es el reconocimiento de los propio, y la de la selección negativa es la tolerancia a lo propio. Tanto la selección positiva como negativa coinciden en el MECANISMO de selección, que se basa en la intensidad de las señales transducidas al timocito por la interacción TCR/MHCp. Visto en más detalle:

- Primero se eligen a los timocitos que reconocen a las MHC propias, porque no sirve gastar energía en hacer crecer células que no las reconozcan, ya que los linfocitos T sólo pueden reconocer péptidos presentados en MHC. El criterio de selección, entonces, es el reconocimiento de MHC propias por los timocitos, y se basa en la intensidad de la interacción timocito-MHC. Si la señal es de nula intensidad, significa que el timocito no ha reconocido el MHCp en absoluto, y muere (death by neglect, o muerte por abandono).

- Selección negativa: Una vez seleccionados estos timocitos, hay que eliminar a los que pueden llegar a reconocer MHC-péptido propios. Aquí el criterio de selección es la interacción timocito-MHCp con una intensidad adecuada. Si la señal es de alta intensidad, el timocito muere por ser considerado peligroso (recordar que la ontogenia T se da en un ambiente estéril, en el que todo antígeno que se presente a los timocitos se interpreta como propio, y por lo tanto no debe ser pasible de activar una reacción inmune). Si la señal es de intensidad intermedia, el timocito continúa su maduración pero no desarrolla suficientes moléculas coestimulatorias, y se vuelve anérgico. Si la señal es de intensidad baja, el timocito continúa su maduración, ya que se ha reconocido al MHCp propio de una forma en la que no se desarrollará una respuesta inmune contra él.

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