LABORATORIO DE BIOQUÍMICA FOTOCOLORIMETRÍA Y CURVAS DE CALIBRACIÓN

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

FOTOCOLORIMETRÍA Y CURVAS DE CALIBRACIÓN

PRÁCTICA NÚMERO 1

Profesor

Cesar Ibargën

UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA

FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES

DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA

MEDELLÍN

RESUMEN

El experimento consistió en primera instancia en aprender el manejo adecuado y calibración del fotocolorímetro. Seguidamente se determinó el espectro de absorción para la albúmina tomando diferentes datos con el aumento de la longitud de onda del instrumento. Luego se realizó una curva de calibración para soluciones de albumina, con 9 tubos de ensayo previamente rotulados, uno de ellos como el blanco, se prosiguió a adicionarle a cada uno diferentes volúmenes de solución patrón, solución problema y solución salina.  Se determinó que la máxima absorción de la albúmina ocurre a una longitud de onda de 540 nm y a su vez que la concentración de la muestra problema era de 2.0mg/ml y 4.0mg/ml. Se concluyó que la intensidad de energía absorbida varía según la concentración de la sustancia, es decir entre mayor sea la concentración mayor va a ser la absorción.

1. Objetivos

1. Analizar los principios básicos de la fotocolorimetría.
2. Determinar el espectro de absorción de un compuesto coloreado.
3. Seleccionar la longitud de onda óptima o de máxima absorción.
4. Realizar la curva de calibración para una solución de albumina.
5. Calcular concentraciones desconocidas de muestras de proteínas.
6.  Aprender el manejo adecuado del fotocolorímetro.

1.  Resultados y Discusión

1. Determinación del espectro de absorción de un compuesto.

Tabla 1.  Datos obtenidos de la absorbancia de la solución de albumina:

                       Gráfico 1. Espectro de absorción de la albumina vs. La longitud de onda:

[pic 1]

1. Curva de calibración para soluciones de albumina.

Tabla 2. Datos obtenidos para la curva de calibración:

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