La esterilización

Introducción

La esterilización es uno de los mecanismos donde se eliminan o mueren los microorganismos vivos de algún medio, muestra o en el material de trabajo a utilizar. Dentro de los microrganismos vivos se encuentran las bacterias, protistas, hongos y virus. Cuando el objeto esta esterilizado es libre de microrganismos conteniendo sus formas de resistencia; la esterilización no es una desinfección  ya que en esta no se logran eliminar todos los microrganismos, sino aquellos que causan enfermedad o efectos deletéreos sobre los productos donde se encuentran alimentos o cosméticos, etc. Por lo tanto un material desinfectado no está estéril. (Leahy et al., 1999).

La esterilización se consigue por lo general por medios físicos y de manera excepcional por la práctica de compuestos químicos. Entre los métodos físicos más usados tenemos la aplicación de calor ya sea calor húmedo o calor seco, la filtraciones o radiaciones o por incineración. (Moldenhauer, J. 2009).

Los medios de cultivos son una mezcla de nutrientes que en condiciones y concentraciones adecuadas físicas optimas, dan paso al crecimiento de los microorganismos. Los constituyentes de los medios de cultivo son: agar, extractos peponas, fluidos corporales, sistemas amortiguadores, indicadores de pH, agentes reductores y agentes selectivos. En la actualidad la mayor parte de los medios de cultivo son comercializados comúnmente bajo la forma liofilizados a los que se los rehidrata. Antes de esterilizar en los medios líquidos se distribuye en tubos o matraces y si es un medio solido se reparte en los recipientes adecuados pero ates se funde el agar en baño María. (Cano, 2006; García 2009).

Al sembrar nos referimos a colocar de forma artificial una muestra en un medio adecuado para iniciar un cultivo microbiano, tanto para su desarrollo y multiplicación; ya sembrado se lo incuba a una temperatura favorable para su crecimiento (Ortega, 2009). La técnica de aislamiento dispone de la descendencia de un individuo inmóvil sobre la superficie de un medio sólido y apartada de los demás individuos presentes en el cultivo mixto (García, 2009).

Objetivos

Objetivo general

• Realizar la preparación de medios de cultivo conociendo las técnicas adecuadas de siembra y aislamiento de microorganismos y los procedimientos para la esterilización de materiales y medios de cultivo.

Objetivos específicos

MATERIALES Y MÉTODOS

1 Esterilización de materiales y medios de cultivo

• Medio de cultivo no estéril:

• Agar Métodos Estándar (PCA)
• Caldo glucosado

• Autoclave
• Esterilizador
• Incubadora a 30 - 35 °C
• Pipetas de 10 ml / 5 ml
• Placas de Petri
• Algodón
• Papel de aluminio
• Baño María a 50 °C

El procedimiento se realizó siguiendo la guía de laboratorio de alimentos, práctica 1. La muestra utilizada en la prueba de esterilidad de medios de cultivo fue una placa Petri de PCA

2 Preparación de medios de cultivo

• Medios de cultivo liofilizados:

• PCA
• TSI
• Caldo glucosado

• Agua destilada
• Espátula
• Vórtex
• Plato calentador con agitación
• Autoclave
• Baño María a 50 °C
• Balanza
• Matraz Erlenmeyer 500 ml
• Vasos de precipitado 500 ml
• Frascos de vidrio graduado de 500 ml
• Pipetas de 10 ml
• Tubos de ensayo con tapa rosca
• Placas de Petri
• Algodón
• Papel de aluminio

El procedimiento se realizó siguiendo la guía de laboratorio de alimentos, práctica 1. No se realizó la preparación de medios de cultivo solido e plano inclinado (slant) ni la preparación de sustancias termo-sensibles. La muestra utilizada en la preparación de medios fue PCA, TSI y caldo glucosado.

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