Marco teórico.Las enzimas

Marco teórico

(Según Robert Murray, 2010) Las enzimas son proteínas que catalizan reacciones químicas en los sistemas biológicos. Aceleran las reacciones multiplicando sus velocidad por un millón de ves o más; estas al igual que otros catalizadores influyen en la velocidad alcanzando rápidamente el equilibrio final de la reacción. Facilitan la reacción proporcionando una ruta con menor energía libre de activación para transformar el sustrato en producto, en comparación con las reacciones no catalizadas. Las enzimas son altamente especificas tanto en la reacción que catalizan como en la elección de las sustancias re accionantes denominadas sustratos y solo requieren pequeñas cantidades de enzimas para efectuar la transformación de un gran numero de moléculas de sustrato.

(Según Donald Voet, 2006) la variedad de enorme variedad de reacciones bioquímicas en la vida se deben a los catalizadores notables llamados enzimas; algunas de sus características son:

1. Mayor velocidad de reacción: las velocidades de las reacciones catalizadas por enzimas se multiplican on respecto a las mismas reacciones no catalizadas por ellas.

2. Condiciones moderadas de las reacciones: las reacciones catalizadas por enzimas tienen lugar bajo condiciones relativamente atemperadas y un pH casi neutro.

3. Mayor especificidad de reacción: las enzimas tiene un grado de especificidad mucho mas vasto comparado con las identidades tanto del sustrato como de sus productos , en comparación con los catalizadores

(Según Harper, 2008)La actividad enzimática se refiere a la capacidad de catálisis en condiciones óptimas, es decir, cuando una enzima actúa en su velocidad máxima, lo que se consigue estandarizando las condiciones del medio y utilizando concentración saturada del sustrato; en estas condiciones la velocidad de catálisis es máxima. Debido a que solo se necesitan muy bajas concentraciones de enzimas no pueden medirse directamente. Por consiguiente la actividad de una enzima se mide generalmente siguiendo la desapacin de sustrato, aparición de un producto o la modificación de cofactores de una reacción. Diversos factores modifican la actividad enzimática, tales como:- Influencia de temperatura- pH- Concentracion de la enzima- Concentracion del sustrato- Efecto de los inhibidores y activadores.

Actividad enzimática

Objetivo general

• Analizar las propiedades de las enzimas digestivas

• Estudiar los factores que pueden afectar la actividad enzimática

Objetivo específico

• Utilizar pruebas de laboratorios para analizar la función d las enzimas digestivas

• Crear ambientes artificiales in vitro que evidencien la forma en que se alteran la actividad de las enzimas.

Materiales

• Hígado de res (fuente de catalasa)

• Peróxido de hidrógeno

• Tubos de ensayo

• Bióxido de manganeso

• Solución buffer de pH 2

• Solución buffer de pH 7

• Solución buffer de pH 12

• Agua destilada

• Juego de disección

• Arena lavada y seca

• Hielo

• Fósforos

Procedimientos:

1. Catálisis enzimática: efectos de un catalizador; macerar una porción de hígado, colocar en tubos de ensayos las sustancias.

2. Reuso de una enzima: en un tubo de ensayo colocar 2cc de peróxido de hidrogeno y dos trocitos de hígado macerado, observar que ocurre, luego que la reacción ocurre sacar los trocitos de hígado de los que ya han reaccionado y colocarlos en otro tubo de ensayo. Decantar el líquido que quedo de la reacción anterior. Ahora agregue a cada tubo 2cc de peróxido.

3. Efectos del pH y temperatura: agregar en 6 tubos de ensayo 2cc de peróxido de hidrogeno con 2 trocitos de hígado y colocarlos a diversas temperaturas como los son a 0°C, temp. Ambiente, a 90°C; y a los tres restantes hay que colocarle los pH 2, pH 7 y pH 14.

4. Propiedades enzimáticas de la amilasa: obtener una muestra de saliva de los estudiantes en una vaso químico de 100 limpio. A una solución de almidón agregue un cc de la enzima, agitar el tubo, luego agregar una gota de lugol. Después en intervalos de 5 min realizar una prueba de benedit hasta alcanzar el punto acrómico donde la enzima hace su efecto.

Resultados.

1. Catálisis enzimática.

tubos Sustancia sustancia Resultado

Tubo #1 2 cc de agua oxigenada Arena lavada No hubo reacción

Tubo #2 2 cc de agua oxigenada Bióxido de manganeso La reacción fue moderada

Tubo #3 2 cc de agua oxigenada Hígado macerado La reacción fue rápida.

• De acuerdo a los resultados obtenidos anotados en la tabla 6.1 en que tubos existió catálisis: en el tubo #2 con bióxido de manganeso y el #3 con hígado macerado. Cuál es la función del bióxido de manganeso en la reacción del tubo #2: es un catalizador inorgánico.

2. Reúso de una enzima.

Al colocar 2 trocitos de hígado en un tubo de ensayo y agregarle agua oxigenada se produce una reacción. Después de separar los trocitos de hígado y agregarle a cada uno agua oxigenada hay reacción nuevamente porque las enzimas siguen produciéndose por los tejidos que tiene el hígado.

3. Efecto del pH y temperatura.

tubo peróxido Catalasa (hígado) Condición resultados

1 2 cc 2 trocitos Temp. 0° C No hay reacción

2 2 cc 2 trocitos Temperatura ambiente La reacción es normal

3 2 cc 2 trocitos Temp. 90 ° C La reacción se inhibe

4 2 cc 2 trocitos pH 4 Reacción es lenta

5 2 cc 2 trocitos pH 14 El tejido se endureció

Discusión: las enzimas son sensibles a ciertos pH y a ciertos límites de temperatura.

4. Propiedades enzimáticas

Tiempo Test del Lugol Test de benedict

5 min almidón Positivo

10 min

15 min

20 min

25 min

30 min Amilasa + almidón Positivo

35 min

• El color inicial era marrón claro

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