Microscopia

Introducción

La microscopía es el conjunto de técnicas y métodos destinados a hacer visible los objetos de estudio que por su pequeñez están fuera del rango de resolución del ojo normal.

Si bien el microscopio es el elemento central de la microscopía, el uso de este se requiere para producir las imágenes adecuadas, de todo un conjunto de métodos y técnicas afines pero extrínsecas al aparato. Algunas de ellas son, técnicas de preparación y manejo de los objetos de estudio, técnicas de salida, procesamiento, interpretación y registro de imágenes, etc.

El instrumento que fue empleado por los primeros biólogos para estudiar la célula y los tejidos es el microscopio. El nombre deriva etimológicamente de dos raíces griegas: mikrós, que significa pequeño y skopéoo, que significa observar. Es decir, el microscopio es un instrumento que sirve para observar objetos o estructuras pequeñas.

Antonie van Leeuwenhoek (Holanda, 1632-1723), un vendedor de telas, aficionado a pulir lentes, logró fabricar lentes lo suficientemente poderosas como para observar bacterias, hongos y protozoos, a los que llamó "animálculos".

El primer microscopio compuesto fue desarrollado por Zacharias Janssen. A partir de este, los avances tecnológicos permitieron llegar a los modernos microscopios de nuestro tiempo, los que existen de varios tipos y son usados con diferentes fines. Cincuenta años después de la creación del microscopio, el inglés Robert Hooke perfeccionó el microscopio; Hooke utiliza un microscopio compuesto para estudiar cortes de corcho y describe los pequeños poros en forma de caja, a los que él llamó "células".

 Normalmente hay varios trabajos que preceden la observación de un material bajo el microscopio (p.e. cortes, técnicas de color) que permiten una mejor observación, como puede ser la estructura de una célula.

Los microscopios convencionales, microscopía de luz, se consigue un gran aumento del objeto a investigar a través de un procedimiento de proyección en dos niveles. En este tipo de microscopía el microscopio produce primeramente una imagen invertida real aumentada del objeto iluminado mediante el objetivo.

En un segundo paso se aumenta nuevamente esta imagen mediante el ocular. Los aumentos parciales del objetivo y el ocular producen el aumento total. Cuando se requiere un gran aumento, o cuando se analizan objetos muy pequeños, se usa un objetivo de inmersión.

 Además, se suele aplicar una gota de aceite sobre el objeto a investigar para rellenar el espacio entre el objeto y el objetivo, lo que optimiza la capacidad de resolución. Con esta técnica se pueden hacer visibles objetos hasta 200 nm.

Objetivos

Identifica las partes del microscopio compuesto, aprender para qué sirve cada una de ellas, conociendo los pasos para un manejo adecuado, y su forma de mantenimiento. Identificar las diferencias entre el microscopio compuesto y el estereoscópico.

Materiales, equipos y reactivos

• Caja Petri
• Elodea sp
• Cebolla
• Caja de portaobjetos y cubreobjetos
• Frotis de Sangre (Wright)
• Preparaciones fijas de letras impresas
• Pinza de disección
• Microscopio compuesto
• Microscopio estereoscópico
• Aguja de disección
• Pipetas Pasteur

Procedimiento

1. Identificar en el microscopio compuesto las siguientes partes y anotar las funciones de cada una de ellas.

• Sistema óptico

1. Lente ocular  
2. Lente objetivo
3. Fuente de luz
4. Condensador
5. Espejos
6. Diafragma

• Sistema mecánico

1. Tubo del microscopio
2. Brazo
3. Tornillo micrométrico
4. Revólver
5. Platina
6. Tornillo macrometrico
7. Pinzas o carro
8. Base o pie

 2.Observación de preparaciones

A)

• Observar a simple vista la preparación fija de letras
• Enfocar cada una de las letras en el microscopio con el objetivo a seco débil
• Comparar su posición con la imagen a simple vista.
• Mover la preparación hacia adelante, hacia atrás, hacia la derecha y hacia la izquierda
• Sacar conclusiones respecto a la posición y movimiento de la imagen y hacer esquemas
• Anote en cada esquema el número de aumentos.

B)

• En un portaobjetos coloque dos cabellos uno claro y otro negro
• Cruce uno sobre el otro
• Añada una gota de agua y coloque el cubreobjetos
• Enfocar a seco débil y seco fuerte el cruce de los cabellos
• Hacer esquemas

C)

• Haga una preparación temporal utilizando un pedazo de cebolla
• Separe la epidermis y colóquela en un portaobjetos
• Añada una gota de agua Y después póngale el cubreobjetos
• Observe al microscopio a seco débil y a seco fuerte
• Dibuje unas células.

       3.

• Con el microscopio estereoscópico observe ejemplares de insectos, arañas, monedas etc.
• Realice esquemas con detalle

       4.

• Preparaciones fijas:
• Enfoque las preparaciones de bacterias y frotis de sangre con el objetivo de inmersión
• Haga los esquemas correspondientes de unas células

Diagrama de flujo

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[pic 3]

Resultados y discusión

Lente ocular: Lente situada cerca del ojo del observador. Capta y amplía la imagen formada en los objetivos.

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