POTENCIOMETRICA DE AMINOACIDOS

TITULACION POTENCIOMETRICA DE AMINOACIDOS.

Daniela Saavedra, Sayury Roqueme Sepulveda, Ana Ximena Restrepo

Universidad de Córdoba

Facultad de Ingenierías

Ingeniería de Alimentos

Berastegui

2014

Presentado a: Claudia D’paula

Docente Bioquímica. Universidad de Córdoba

RESUMEN

La titulación o valoración de soluciones tiene como principal objetivo determinar la concentración de una solución ácida o básica desconocida denominada solución analizada. Mediante una titulación podemos determinar el pH de una solución y el pH se suele determinar experimentalmente mediante el uso de aparatos llamados POTENCIÓMETROS (pH-metros) o empleando sustancias llamadas indicadores de pH. Que durante la práctica de laboratorio se utilizaron para así determinar la curva de titulación de un aminoácido y su punto isoeléctrico.

OBJETIVOS

Aprender hallar el punto isoeléctrico de un aminoácido

Realizar a través de datos experimentales la curva de titulación de aminoácidos

Interpretar la curva de titulación de los aminoácidos

Conocer a que hace referencia el punto isoelectrico

INTRODUCCIÓN

Los aminoácidos son compuestos que poseen un grupo amino (-NH2) y un grupo ácido (carboxílico -COOH) en su estructura. Los aminoácidos son los precursores de los péptidos y las proteínas, y en ellos el grupo amino y el grupo carboxilo, se encuentran unidos al mismo átomo de carbono, conocido como carbono-α (α-aminoácidos). La estructura general de los α- aminoácidos (a excepción de la prolina, que es cíclica) se muestra en la Figura 1.

Como se puede apreciar, el carbono-α excepción de la glicina) es un carbono quiral y como tal presenta dos enantiómeros (L- y D-). Los 20 α-aminoácido presentes en las proteínas son de la serie L- y en su representación de Fischer poseen el grupo amino hacia la izquierda. La diferencia entre los aminoácidos viene dada por el resto -R, o cadena lateral, unida al carbono-α. Atendiendo a la naturaleza del grupo -R los aas pueden clasificarse en:

• Neutros o apolares

. Polares sin carga

• Polares con carga negativa

• Polares con carga positiva.

Propiedades ácido-base de los aminoácidos y los péptidos El pH del medio en el que se encuentre el aminoácido es esencial para determinar sus propiedades ácido-base, aspecto importante pues de ello dependen las propiedades químicas y la funcionalidad biológica de los péptidos y proteínas que forman. Las propiedades ácido-base de un aminoácido vienen determinadas por los grupos protonables que posea. Un aminoácido puede actuar bien como ácido o como base (sustancias anfóteras), pudiendo tener hasta tres grupos con carácter ácido-base: el α-amino, el α-carboxilo y, en algunos casos, el resto -R. Lo importante es que estos grupos poseen un carácter ácido-base débil, lo que hace que, dependiendo del pH, el correspondiente equilibrio pueda desplazarse en un sentido o en otro.

REACTIVOS

L-ALANINA 0,1M

L-ACIDO ASPARTICO 0,1M

L-ARGININA 0,1M

L-GLICINA 0,1M

MATERIALES Y MÉTODOS.

Potenciómetro

2 vasos de precipitados.

Agitador magnético

1 bureta de 50 mL

Varilla de vidrio

METODOS.

CALIBRACION DEL POTENCIOMETRO

Se calibro el potenciómetro con dos soluciones estandarizadas

DETERMINAR EL PUNTO ISOLECTRICO DE UN AMINOACIDO

En un vaso de precipitados, se midio 50 mL de una solución de aminoácidos y se midio el pH inicial de los aminoácidos.

Se procedio a titular con HCl 0.1 M adicionando lentamente y tomando el pH después de cada adición, hasta que se haya consumido más de 10 ml de ácido.

Desechar el titulado, lavar el vaso y medir nuevamente 50 mL del mismo aminoácido y repetir el procedimiento con NaOH 0.1M.

Con los datos del pH frente al de los miliequivalentes (2ml=1mEq) de acido o base consumidos, hacer figuras en las que el pH se grafique en las ordenadas y en las abcisas, los miliequivalentes de acido (hacia la izquierda) y álcali (hacia la derecha) consumidos. A partir de la figura, determinar el pH en el punto isoeléctrico (pI) y los valores pK del aminoácido con acido y con base.

RESULTADOS Y ANALISIS

Alanina

pH inicial 5.47 HCl

NaOH

2ml pH =3.45 pH =7.18

4ml pH= 3.20 pH =8.14

6ml pH =2.94 pH =8.22

8ml pH =2.90 pH =8.43

10ml pH =2.81 pH =9.35

Por medio del procedimiento a seguir, se lograron obtener los diferentes pH de los aminoácidos a los cuales se le agregaron 50ml de cada uno y una cantidad de 2ml ya sea de solución alcalina o básica. A continuación se mostraran los resultados obtenidos que fueron utilizados para la determinación del punto isoeléctrico de los aminoácidos.

acido aspártico

pH inicial 2.89 HCl

NaOH

2ml pH =2.81 pH =2.80

4ml pH = 2.61 pH =3.30

6ml pH =2.19 pH =3.65

8ml pH =2.22 pH =3.80

10ml pH =2.21 pH =3.84

12ml - pH =4.12

14ml - pH =4.43

16ml - pH =5.15

18ml - pH =8.24

20ml

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