PRACTICA ESTERILIZACIÓN EN MICROBIOLOGIA

PRACTICA DE LABORATORIO N°2

ESTERILIZACIÓN

Presentado por:

Alexandra Duque Guerrero  1.115.917.479

Moisés León Garcés 1.092.647.088

Yesid Danilo Cuéllar Fonseca 1.094.370.421

Erika Fernanda Ortega Villamizar 1.092.647.088

Presentado a:

Lic. M. se Candelaria Madrid

UNIVERSIDAD DE PAMPLONA

MEDICINA VETERINARIA

MICROBIOLOGÍA

GRUPO D

2017

Objetivos

• Conocer y aplicar el procedimiento de esterilización por calor seco y húmedo, así como las ventajas y desventajas de cada uno.
• Preparar y empaquetar correctamente el material que se inducirá a esterilización.
• Colocar el material correspondido en las máquinas para su esterilización ya sea por medio de calor seco o húmedo.

Introducción

Al trabajar con microorganismos en los diferentes tipos de laboratorios se sabe que el número de variables y factores pueden afectar los resultados de los experimentos o practicas a realizar. Estos laboratorios requieren de ciertos protocolos de limpieza, esterilización y desinfección tanto en los materiales como en el área de trabajo para el control de poblaciones microbianas que se encuentre allí.

La esterilización es uno de los mecanismos más utilizados y las técnicas de esterilización dependen directamente de las características del material de trabajo o de los medios que se vayan a tratar. Un objeto esterilizado está totalmente libre de microorganismo incluyendo sus formas de resistencia. El método de esterilización no es un procedimiento aplicable en todos los casos puesto que esta seleccionado para cada caso teniendo en cuenta la naturaleza física del objeto y la naturaleza biológica del microorganismo contaminante. Para el aseguramiento de un proceso esterilizante con resultados exitosos es necesario tener en cuenta la esterilización previa, la limpieza previa y la preparación del material de vidrio.

Marco teórico

Según la OMS la esterilización se define como un proceso de eliminación  de cualquier microorganismo presente en un objeto, sea patógeno o no, incluido igualmente como formas esporuladas, hongos y virus. Se entiende por muerte de microorganismos a la perdida de la capacidad reproductiva del microorganismo (Vignoli, 2002).

La esterilización se encuentra métodos físicos y por métodos químicos. Encontramos en los métodos físicos comúnmente la aplicación de calor (húmedo o seco), filtraciones o radiaciones (rayos x, gamma y luz ultravioleta). Sin embargo la esterilización también se puede obtener mediante productos químicos, como el óxido de etileno, formaldehido o glutaraldehído (Pérez, Silóniz, Torralba y Vázquez, 2010).

El calor seco destruye a los microorganismos por oxidación, por ejemplo al exponerlos directamente a flameado llevando a rojo o también en un horno de aire caliente entre 120° y 180°C durante dos horas, estos métodos se pueden aplicar en las asa de inoculación y para todo tipo de material de vidrio. Para los procesos por calor húmedo afectan la estabilidad de las estructuras celulares utilizados para medios de cultivo y materiales de vidrio (Aquiahualt, Volke, Prado, Shirai, Ramírez y Salazar, 2012); el equipo usado comúnmente se conoce como autoclave desarrollado por CHAMBERLAND en 1884, constituido por una caldera que se cierra herméticamente con un tapa metálica permitiendo que se acumule el vapor saturado a presión y alcanza temperaturas superiores a los 100°C sin que produzca ebullición. (Pérez, Silóniz, Torralba y Vázquez, 2010).

Las radiaciones ionizantes poseen gran capacidad germicida, en la cual tiene una gran intensidad de penetración lo cual hacen posible la esterilización de materiales sólidos o líquidos envasados. Este efecto letal  se debe a la formación de radicales entre los componentes celulares; las radiaciones no ionizantes al incidir sobre la materia no producen su ionización. Pueden ser ultravioleta (UV) o infrarrojos (IR) (Mc Graw Hill).

La filtración es un método utilizado el campo de la microbiología para esterilizar líquidos termolábiles, con este método se esterilizan azucares, urea, sueros, antibiótico, etc. Su mecanismo de acción es detener toda partícula mayor a los poros pero no los destruyen (R. Vignoli).

Procedimiento

Se entrega el material de laboratorio a cada uno de los grupos como se muestra en la siguiente tabla

Tabla 1

Materiales de laboratorio

Fuente: Elaboración propia

Luego de una introducción por parte de la docente, presentado la correcta forma de empacado de los utensilios de trabajo; como se muestra en la Tabla 1 se procedió a cubrir este material con papel Kraft. Las 8 cajas de Petri se envolvieron en pedazos rectangulares de papel Kraft y cada paquete contiene 4 cajas de Petri, las pipetas se envolvieron en una tira de papel en forma de espiral, los Erlenmeyer se envolvieron haciendo un tapón con gasa algodón y papel Kraft, Las pipetas Pasteur se envolvieron en unas bolsas de papel Kraft al igual que los tubos de ensayo con tapa. Seguidamente se clasifico este material teniendo en cuenta el agente físico adecuado para esterilizar.

Nota: La parte de introducir el material a los respectivos instrumentos de esterilización no se realizó.

[pic 1]

Ilustración 1. Laboratorio de microbiología, Materiales de laboratorio, Agosto 2017. Archivo de autores

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Ilustración 2. Laboratorio de microbiología, Materiales de laboratorio, Agosto 2017. Archivo de autores

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Ilustración 3. Laboratorio de microbiología, Materiales de laboratorio, Agosto 2017. Archivo de autores

Resultados y análisis de resultados

Luego de tener todo el material envuelto se clasifico que iba en que equipo, teniendo en cuenta en el autoclavado se colocó los tubos de ensayo, Erlenmeyer, hisopos, Bajalenguas y las pipetas Pasteur llevándolos a 121°C por 15 libras de presión cuando la aguja ya estuvo a esa temperatura se empieza a cronometrar el tiempo de esterilización de 15 minutos.

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