PRACTICA No. 1 “USO DE MICROPIPETAS”

UNIVERSIDAD DE SONORA [pic 1]

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS QUIMICO BIOLOGICAS

DIVISION DE CIENCIAS QUIMICO BIOLOGICAS Y DE LA SALUD

LABORATORIO DE BIOLOGIA CELULAR

REPORTE

PRACTICA No. 1 “USO DE MICROPIPETAS”

MAESTRA: MARTHA JUDITH VALDEZ

INTEGRANTES DEL EQUIPO:

BARRERAS ARMENTA GLADYS ABIGAIL

BASTIDA VALDEZ EDUARDO ALEJANDRO

HORARIO: MIERCOLES (17:00 – 19:00 Hrs.)

HERMOSILLO, SONORA                                                 29 DE AGOSTO DE 2017

Práctica No. 1

Uso de micropipetas

OBJETIVOS

1. El alumno conocerá el uso y manejo adecuado de las micropipetas.
2. Analizará posibles errores en la medición de líquidos.
3. Aplicará el método gravimétrico para verificar la calibración de las micropipetas.
4. El alumno conocerá los términos precisión y exactitud.

INTRODUCCIÓN

Las micropipetas son herramientas fundamentales en cualquier laboratorio de Biología Molecular. Cuando se trabaja con volúmenes pequeños de disoluciones y líquidos (microlitros), se deben extremar los cuidados y las precauciones de uso y conservación de las mismas.

Existen micropipetas manuales, en las que el volumen a aspirar se fija girando un botón en su parte superior que está conectado a un sistema analógico de confirmación de volumen, y automáticas, en las cuales dicho sistema es digital.

Hay micropipetas simples, que sólo acogen una punta cada vez, y multicanales, que permiten incorporar múltiples puntas (por ejemplo, ocho), absorbiendo el mismo volumen en todas ellas.

EQUIPO Y MATERIALES

• Micropipetas de volumen fijo de 10, 200 y 1000 μL
• Micropipetas de volumen variable: 0.5-10, 20-200 y 100-1000 μL
• Microtubos cónicos de 1.8 ML
• Viales de vidrio de 2 ML de capacidad
• Puntas adecuadas para las diferentes micropipetas
• Balanza analítica
• Centrífuga para microtubos
• Agua destilada
• Soluciones de color rojo y azul

PROCEDIMIENTO

Técnica de pipeteo

El maestro proporcionará 3 soluciones de trabajo: Azul (A), Roja (B) e Incolora (C)

1. Rotula 2 microtubos con los números 1 y 2 para cada una de las micropipetas a utilizar
2. Adiciona los volúmenes de las soluciones A, B y C especificados en la tabla 1 a cada uno de los tubos

Tabla 1. Esquema para preparación de las muestras

1. Una vez concluidos estos procedimientos, centrifuga los microtubos a 500xg por 3 min. a temperatura ambiente.
2. Mide el volumen de cada uno de los tubos y regístralo en la tabla 2 de resultados.

Reproducibilidad

Utilizando tres micropipetas de volumen fijo, realiza lo siguiente:

1. Adiciona 10, 200 y 1000 μL de agua destilada con las micropipetas correspondientes y viértelos en un contenedor previamente tarado, determina el peso de esos volúmenes y regístralo.
2. Repite el mismo procedimiento 10 veces.
3. Registra el peso en cada ocasión utilizando el siguiente cuadro:

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