Practica De Espectrofotometria

tUniversidad Autónoma de Nuevo León

Facultad De Ciencias Biológicas de la Universidad Autónoma de Nuevo León

Materia: Química Inorgánica

Maestra: L.C.A Alma Elisa Mora Zúñiga

Espectrofotometría, Absorción molecular

Alumno: Jesús Eusebio Galván Marroquín

Grupo: 212 Matrícula: 1583929

Introducción

Para medir los valores de absorbancia y transmitancia de una disolución se utilizan espectrofotómetros UV-Visible. Cuando una molécula absorbe un fotón en un intervalo espectral (determinada longitud de onda ג), los electrones de baja energía o en estado fundamental se excitan y pasan a un orbital de energía superior.

E(M*)=E(M)+E fotón

Como la energía se conserva, la diferencia de energía entre el estado fundamental de la molécula (M) y su estado excitado (M*) debe ser exactamente igual a la energía del fotón. Como consecuencia, el espectro de absorción, es decir, la luz absorbida en función de la longitud de onda, constituye una verdadera señal de identidad de cada sustancia o molécula. Las moléculas tienen un estado energético que se puede alterar por la absorción de radiación electromagnética a determinada longitud de onda, lo que se puede medir para realizar un estudio cualitativo o cuantitativo. Para obtener la máxima sensibilidad en una determinación debe conocerse la longitud de onda de mayor absorción de la sustancia analizada. La absorbancia es una medida de la cantidad de Energía luminosa incidente absorbida por una sustancia en solución.

La Mecánica Cuántica nos dice que la luz está compuesta de fotones cada uno de los cuáles tiene una energía. La constante de Planck (h=6.63x10-34J.s) es una constante física que desempeña un papel central en la teoría de la mecánica cuántica. Fue inicialmente propuesta como la constante de proporcionalidad entre la energía E de un fotón y la frecuencia f de su onda electromagnética asociada. Esta relación entre la energía y la frecuencia se denomina “relación de Planck”:

E=h*f

Dado que la frecuencia f, la longitud de onda ג, y la velocidad de la luz c cumplen ג*f=c, la relación de Planck se puede expresar como:

E=(hc)/ג

En esta práctica estudiaremos la absorción de luz en el visible cercano (ג=400-700) en la adición de diferentes dosis de disolución de azul de metileno, comprobando la absorción de colorante y observando cómo cambia la absorbancia a diferentes concentraciones.

Objetivos de la práctica

Establecer que éste método analítico se basa en las interacciones entre la materia y una radiación electromagnética.

Comprobar que la longitud de onda máxima absorbancia es constante para la misma muestra a diferentes concentraciones de acuerdo a la observación de los datos de absorbancia que arrojo el espectrofotómetro.

Comprender el fundamento de la espectroscopia Uv-vis en el análisis cualitativo de una muestra.

Comprender la propiedad que tienen las moléculas de absorber energía lo cual hace que pasen de su estado en equilibrio a un estado excitado.

Materiales y Métodos

Instalaciones, Equipos y Materiales

Laboratorio de Química Inorgánica. Unidad A, FCB

Espectrofotómetro UV-Visible y 6 cubetas de plástico.

Vasos de precipitados de 100mL

Pipetas graduadas de 10mL y de 5mL

Azul de metileno

Agua destilada

Metodología

Preparación de la muestra:

Preparar disolución concentrada del colorante Azul de metileno:

Preparar una disolución concentrada de colorante Azul de metileno (2 mg/L). Calibrar el espectrofotómetro en cero con agua destilada antes de realizar cada lectura y leer consecutivamente las soluciones de azul de metileno.

Lectura del espectrofotómetro:

Hacer un barrido espectral entre 200-800 nm, y medir la absorbancia en el intervalo de longitudes de onda fijado tomando valores cada 50 nm.

Establecer el máximo de absorción: mediante los valores de absorbancia obtenido a través de las diferentes longitudes de onda, establecer la longitud de onda óptima de absorción (גmax) para la disolución concentrada de azul de metileno.

A partir de la solución patrón, realizar cinco disoluciones: 1:2;1:4;1:6;1:8;1:10. Medir la absorbancia a la longitud de onda óptima, determinada anteriormente.

Resultados

ג(nm) Absorbancia ג(nm) Absorbancia

200 0.332 A 550 0.034 A

250 0.251 A 600 0.012 A

300 3.370 A 650 0.013 A

350 3.200 A 700 0.005 A

400 0.622 A 750 0.010 A

450 0.186 A 800 0.010 A

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