Practica Titulación De Un Aminoácido

Propósito de la práctica: Comprobar el carácter anfotérico de los aminoácidos

Observaciones y resultados

Volumen solución titulante 30 mL de glicina titular con HCl

30 mL de glicina con NAOH 15 mL de glicina + 15 mL de formol neutro 30 mL de ácido acético con NaOH 30 mL de Acético acético + 15 mL formol neutro con NaOH

HCl NaOH

0.0 6.10 6.10 4.09 4.21 2.81 3.26

2.0 5.5 8.32 3.27 4.71 3.41 3.67

3.0 3.17 8.72 2.64 5.20 3.85 4.06

5.0 2.82 9.13 2.19 5.79 4.26 4.43

5.0 2.54 9.40 1.81 6.32 4.57 4.73

5.0 2.40 9.60 1.59 7.00 4.87 5.04

1.0 2.37 9.71 1.56 7.24 4.93 5.12

1.0 2.33 9.75 1.51 7.53 5.00 5.20

1.0 2.20 9.78 1.49 8.43 5.08 5.28

1.0 2.27 9.82 1.46 9.54 5.15 5.35

0.5 2.25 9.84 1.44 9.70 5.20 5.43

0.5 2.23 9.85 1.43 9.84 5.49

El cambio de viraje de incoloro a rosa en la titulación de glicina con NaOH comenzó a pH 8.74 haciéndose más intenso el color a pH 9.13.

El cambio de viraje en la misma titulación agregando formol el viraje se observa a pH de 8.43.

Cálculo del punto isoeléctrico

pK obtenidos

pKa1=2.82

pKa2=9.4

pI=(〖pKa〗_1+〖pKa〗_2)/2

pI=(2.82+9.4)/2

pI= 6.11

pK reportados

pK1=2.4

pK2=9.8

Discusión de resultados

La valoración potenciométrica del aminoácido nos permitió identificar las 3 formas en las que la glicina existe, así como conocer la concentración de cada una a pH determinado y calcular los valores de pka del mismo.

A pH ácido (2.4) existió en mayor concentración la molécula se encuentra como ión positivo; mientras el pH de la solución se hizo mayor, existían tanto la forma de ion como la forma dipolar, cuando llegamos al pH de 6.1 la molécula se encontró totalmente como dipolo, y era eléctricamente neutra es decir se encontraba en el punto isoeléctrico.

A pH por encima de punto isoeléctrico (9.8) existía la forma del aminoácido como ión negativo.

Conclusiones

Con esta práctica comprobamos el carácter anfotérico del aminoácido glicina, determinando las especies existentes en pH específicos. Con ello concluimos que la carga que tenga un péptido o una proteína dependerá del número de cagas negativas o positivas de los aminoácidos ionizables que lo conformen en un pH determinado.

Otro factor que nos permite determinar el carácter anfotérico de un aminoácido es el punto de fusión de la sustancia presente, de igual manera dependiente del pH que se tenga, ésta propiedad se explica por la presencia de dipolos.

Cuestionario

Escriba las fórmulas del Ácido Acético, Formol y Glicina.

Ácido acético: CH₃-COOH

Formol: H₂C=O

Glicina: C2H5NO2

Esquematice la disociación en medio ácido y básico de un aminoácido

3. Explique que es el pK

Es la función p de la constante de equilibrio (K), donde K se define como la relación de concentración de productos entre reactivos en el equilibrio.

4. ¿Qué función tiene el formol en la práctica?

Cuando se adiciona formol a una solución que contiene aminoácidos el grupo –NH2 reacciona para formar el grupo metioleinomino –N=CH2, por lo tanto el grupo amino pasa de ser una amina secundaria a una terciaria, aumentando su carácter acido por lo que es posible liberar un protón, permitiendo su titulación.

5. ¿Cuál es el objetivo de titular el ácido acético?

Comparar el comportamiento de la curva de valoración un ácido débil, que en este caso es el ácido acético, con la especie protonada de la glicina que es +H3N-CH2-COOH la cual tiene un pH bajo, por lo que las curvas de valoración son muy similares.

6. Gráficamente ¿cómo se representa la propiedad anfotérica de los aminoácidos?

Ejercicios de integración

Investigue las estructuras y punto isoeléctrico de los veinte aminoácidos que conforman las proteínas

NOMBRE

ESTRUCTURA PUNTO

ISOELÉCTRICO

ALANINA

6.01

ARGININA

10.76

ASPARGINA

5.41

ÁCIDO ASPÁRTICO

2.97

CISTEÍNA

5.07

ÁCIDO GLUTÁMICO

3.22

GLUTAMINA

5.65

GLICINA

5.97

HISTIDINA

7.58

ISOLEUCINA

6.02

LEUCINA

5.98

LISINA

9.74

METIONINA

5.74

FENIALANINA

5.48

PROLINA

6.48

SERINA

5.68

TREONINA

5.87

TRIPTÓFANO

5.89

TIROSINA

5.66

VALINA

5.97

El pH de la sangre es 7.4. Formúlese las estructuras predominantes de cada uno de los siguientes aminoácidos a dicho pH: Prolina, Triptófano, Ácido Glutámico e Histidina.

Aminoácido Forma predominante

Prolina Básica

Triptófano Básica

Ácido Glutámico Básica

Histidina. Básica

Nota: Se adjunta archivo de Excel con diagrama de especies

REFERENCIAS

“titulación de un aminoácido” [en línea] http://es.scribd.com/doc/49829356/Curvas-de-Titulacion-de-Aminoacidos#scribd [consulta 01/03/2015]

Principios de Bioquímica, Lehninger, Omega, 2009, Pág. 73 , 81

Propósito de la práctica: Comprobar el carácter anfotérico de los aminoácidos

Observaciones y resultados

Volumen solución titulante 30 mL de glicina titular con HCl

30 mL de glicina con NAOH 15 mL de glicina + 15 mL de formol neutro 30 mL de ácido acético con NaOH 30 mL de Acético acético + 15 mL formol neutro con NaOH

HCl NaOH

0.0 6.10 6.10 4.09 4.21 2.81 3.26

2.0 5.5 8.32 3.27 4.71 3.41 3.67

3.0 3.17 8.72 2.64 5.20 3.85 4.06

5.0 2.82 9.13 2.19 5.79 4.26 4.43

5.0 2.54 9.40 1.81 6.32 4.57 4.73

5.0 2.40 9.60 1.59 7.00 4.87 5.04

1.0 2.37 9.71 1.56 7.24 4.93 5.12

1.0 2.33 9.75 1.51 7.53 5.00 5.20

1.0 2.20 9.78 1.49 8.43 5.08 5.28

1.0 2.27 9.82 1.46 9.54 5.15 5.35

0.5 2.25 9.84 1.44 9.70 5.20 5.43

0.5 2.23 9.85 1.43 9.84 5.49

El cambio de viraje de incoloro a rosa en la titulación de glicina con NaOH comenzó a pH 8.74 haciéndose más intenso el color a pH 9.13.

El cambio

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