Preparados Microscopicos

PREPARADOS MICROSCOPICOS

I. INTRODUCCION:

 El siguiente trabajo ha sido realizado con el fin de hablar sobre las diferentes técnicas de las coloraciones realizadas en el laboratorio.

 En la parte inicial del trabajo se explica algunos factores a tener en cuenta para el manejo personal, materiales y sustancias utilizadas en el laboratorio. Luego se hace una explicación de las técnicas de coloración de Gram.

 Las preparaciones para las observaciones microscópicas pueden ser de dos clases: preparados en fresco (cuando la muestra está sumergida en el agua y no existe ninguna sustancia entre la lente frontal de objetivo y el preparado, excepto el aire.) y preparados en seco (cuando en la lente frontal del objetivo y el preparado existe un sustancia generalmente aceite de cedro, los preparados en seco requieren que la sustancia a observar se encuentre fija a la lámina portaobjeto).

 Los colorantes son compuestos orgánicos, se dice que un colorante es básico si la porción coloreada actúa como base o acido si actúa como acido.

 Los colorantes ácidos se utilizan para colorear material básico, como por ejemplo el citoplasma; en tanto que los colorantes básicos colorean núcleos.

 la coloración supone que el cuerpo coloreado no va a perder la coloración adquirida por lavados con agua o cualquier otro disolvente.

II. OBJETIVOS.

 Realizar correctamente preparados en fresco y seco.

 Conocer y ejecutar los protocolos de las técnicas de coloración mas importantes.

 Realizar coloraciones con muestras biológicas.

 Dibujar correctamente las observaciones microscópicas.

III. MATERIALES

3.1proporcionados por el alumno

 Mucosa labial

 Sangre periférica

 Agua estancada

 Levadura en pasta

 Sarro dentario

 Mondadientes

 Bisturí o navajas

3.2 proporcionados por el laboratorio

 Microscopio compuesto

 Aceite de cedro

 Agua destilada

 Mecheros

 Laminas portaobjetos y cubreobjetos

 Azul de metileno

 Colorantes de giemsa

 Colorante de Wright

 Colorante safranina

 Colorante hematoxilina

 Colorante eosina

 Fucsia fenicada de ZIEHL-NEELSEN

 Solución de cristal violeta

 Solución de alcohol clorhídrico de 3 %

 KOH 10%

 Sacarosa 5%

VI. PREPARADOS

A. PREPARADOS EN FRESCO

1. Colocar en una lámina portaobjeto una gota de una muestra liquida (Ejm. Agua estancada).

2. Colocarle el cubre objetos con cuidado, tocando el borde del mismo con líquido (muestra) y dejando caer suavemente, para evitar la formación de burbujas.

3. Observar en el microscopio óptico usando los objetivos en seco (empezando con el de menor aumento).

4. Verificar La importancia de los tornillos macro y micrométrico y regulando la iluminación usando el diafragma.

Observación de protozoarios y microalgas

 Agitar el agua estancada recolectada en frascos de boca ancha.

 Con el gotero extraer una pequeña muestra del seno del líquido y colocarla en la lámina portaobjetos, procurando que la muestra contenga filamento algales.

 Cubrir el preparado con una laminilla.

 Observar un pequeño y mediano aumento e identificar los microorganismos

Observación de hongos ambientales

 Colocar una gota de KOH 10% sobre una lámina portaobjetos y en ella disgregar una pequeña muestra de micelio (del pan, frutas o levaduras).

 Cubrir con laminillas.

 Observar a pequeño y mediano aumento.

 Dibujar y colorear.

Son pequeños organismos productores de esporas, gralmente microscópicos, eucarioticos, ramificados y a menudo filamentosos que carecen de clorofila, tienen paredes celulares que contienen quitina, celulosa o ambos componentes. El talo de los hongos (cuerpo vegetativo pluricelular) puede ser de tres tipos: Plasmodial, Levaduriforme, Miceliar (que puede ser septado o cenocítico) a las bifurcaciones individuales o filamentos de micelio se les denomina hifas. Cada hifa o micelio puede tener un grosor uniforme o puede terminar en porciones más delgadas o anchas.

Observación de la gemación de levaduras

 En un tubo de ensayo, preparar una suspensión de levadura de panificación en una solución acuosa de sacarosa al 5%

 Extraer una gota de la suspensión y colocarla en el centro de una lámina portaobjetos y cubrir con laminilla.

 Observar a pequeño y mediano aumento.

 Dibujar.

• Pared celular

• Vacuolas

• Citoplasma

• Glóbulos de grasa

• Gránulos (metacromatico,albumina o de almidón)

Preparados a seco

Coloración simple

 Preparar un frotis, utilizando una muestra de mucosa labial.

 Colocar un portaobjeto solo un soporte de tinciones

 Cubrir la preparación con azul de metileno y dejar un minuto.

 Lavar con agua corriente.

 Seque al medio ambiente o encima del mechero.

Observa con el microscopio con lente de inmersión.

Células epitelio bucal

• Núcleos teñidos de azul oscuro

• Citoplasma azul pálido

• Bacterias pequeños puntos azules apenas visibles a estos aumentos.

Coloración doble

 Preparar un frotis o una muestra de mucosa labial.

 Colocar el portaobjeto sobre un soporte de tinciones

 Cubrir la solución de hematoxilina y dejar actuar cinco minutos.

 Coloque la lámina en una cubeta con agua destilada, durante 30 seg.

 Lavar con agua corriente.

 Sin sacar la muestra cubrirla con eosina por cinco minutos.

 Lavar con agua corriente.

 Secar al medio ambiente o encima del mechero.

 Observe con

...