TITULACION DE AMINOACIDOS Laboratorio de Bioquímica

TITULACION DE AMINOACIDOS

María Juliana Ochoa Moreno18, Lina Valentina Ladino Aguirre22, Laura Valentina Bermudez Velasquez16

Universidad de la Salle, Facultad de Ciencias Agropecuarias. Programa de Medicina Veterinaria.

Laboratorio de Bioquímica. Grupo 13

RESUMEN:

Introducción: La importancia que se evidencia en esta práctica de laboratorio, es reconocer en qué momento el aminoácido se encuentra en zona de amortiguamiento, pues allí se entiende lo que hemos estado viendo en cátedra en el transcurso de este corte información que se ampliará más en el cuerpo de este artículo. Objetivo: Efectuar la titulación potenciométrica de algunos aminoácidos y determinar los valores de pKa para los mismos sobre la curva de titulación. Materiales y método: Para esta práctica de laboratorio usamos aminoácidos tales como, ácido glutámico, arginina y glicina,a los cuales el pKa fue puesto a prueba con una muestra de NaOH, pues cada vez que se le agregan 0,5 ml se media su pH. Esto nos sirvió para poder entender cómo funcionaba la zona de amortiguamiento. Y claramente nos sirvió para tener nuestros valores experimentales de los pKa de los aminoácidos anteriormente mencionados.

Resultados: Las siguientes tablas son los resultados obtenidos de cada aminoácido: Arginina Básico, Glicina, Glutamico. Conclusiones:Esta práctica, aunque su desarrollo fue sencillo, nos deja conocimientos amplios, sobre todo las curvas de titulación, que son herramientas muy poderosas, ya que a través de éstas pudimos determinar, por ejemplo, el pK1, pK2 y por medio de éstos, el punto isoeléctrico de un aminoácido.

ABSTRACT:

Introduction: The importance that is evidenced in this laboratory practice, is to recognize in which moment the amino acid is in buffer zone, because there it is understood what we have been seeing in chair in the course of this cut information that will be expanded further in the body of this article. Objective: To perform potentiometric titration of some amino acids and determine the pKa values for them on the titration curve. Materials and method: For this laboratory practice we use amino acids such as glutamic acid, arginine and glycine, to which pKa was tested with a sample of NaOH, because each time 0. 5 ml is added, its pH is measured. This helped us to understand how the buffer zone worked. And it clearly helped us to have our experimental values of the pKa of the amino acids mentioned above. Results: The following tables are the results obtained from each amino acid: Basic Arginine, Glycine, Glutamine. Conclusions: This practice, although its development was simple, leaves us ample knowledge, especially the titration curves, which are very powerful tools, since through them we could determine, for example, the pK1, pK2 and through these, the isoelectric point of an amino acid.

Introducción:

Las aminoácidos son compuestos químicos que se metabolizan en el organismo para ejercer diversas funciones, entre ellas la más importante formar proteínas, están formados por un amino (NH2) y un carboxilo, (OOH) de allí su nombre (“Aminoácidos” s. f) estos tienen diferentes clasificaciones, una de ellas es escenciales y no esenciales, donde esenciales son aquellos que el organismo necesita para funcionar correctamente, y que se ingieren con la dieta, (Ruiz, A. s. f) pero la clasificación que realmente nos interesa es la que se da a partir de su cadena lateral, estos se clasifican en tres grupos:

- Aminoácidos neutros, son aquellos que en su cadena lateral no posee ni grupos carboxilo, ni grupos amino y por lo tanto su carga neta es 0, en este grupo se encuentra la glicina, fenilalanina, histidina, triptófano, metionina entre otros.

- Aminoácidos básicos, son aquellos que contienen algún grupo en la cadena lateral, por lo tanto su carga neta es positiva, a este grupo pertenece la arginina, histidina y lisina.

- Aminoacidos acidos: presentan un grupo carboxilo en una de sus cadenas laterales y poseen una carga neta negativa, a este grupo pertenece el ácido aspártico y glutámico.

(Aragón. s. f)

Materiales y métodos:

Para la realización de esta práctica, usamos un aminoácido, el cual nos fue asignado, en este caso, ácido glutámico, el cual fue contenido en un vaso precipitado, después agregamos NaOH en una bureta, también teníamos un potenciómetro, después de lavar y tenes todos nuestros elementos listos empezamos nuestra práctica.

A los aminoácidos, tomamos los pH iniciales y proseguimos añadiendo 0,5 ml y midiendo su pH, hasta llegar a su pKa más alto, en nuestro caso 9,67 claramente tomando registros por escrito, que se verán evidenciados en las tablas de los resultados, con ello hicimos las curvas de titulación respectiva para cada aminoácido con los valores experimentales.

Igualmente podemos decir que debemos saber cual es la constante de acidez, conocida como pKa, que literalmente se define como -Log10 Ka. (Químicas. 2018)

Resultados:

Las siguientes tablas son los resultados obtenidos de cada aminoácido:

Figura N° 1: Gráfica Arginina

Tabla N° 1

Solución del aminoácido Arginina Básico:

Ml de NaOH 0.1 M adicionado pH

0.5 0.85

1.0 0.92

1.5 0.92

2.0 0.94

2.5 0.94

3.0 0.96

3.5 0.99

4.0 1.02

4.5 1.04

5.0 1.06

5.5 1.09

6.0 1.11

6.5 1.15

7.0 1.18

7.5 1.21

8.0 1.24

8.5 1.30

9.0 1.32

9.5 1.36

10.0 1.41

10.5 1.46

11.0 1.52

11.5 1.59

12.0 1.66

12.5 1.75

13.0 1.85

13.5 1.98

14.0 2.11

14.5 2.32

15.0 2.63

15.5 3.34

16.0 8.14

16.5 9.47

17 10.16

Figura N° 2: Gráfica Glicina

Tabla N° 2

Solución del aminoácido Glicina:

ml de NaOH 0.1 M adicionado pH

0 0,97

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