Tipos de microscopia óptica

Caratula

Introducción

En el siguiente informe de laboratorio se informará y dará a conocer las diferencias existentes entre observar una muestra con el microscopio metalográfico a campo oscuro y a campo claro, remarcando la importancia y facilidades que nos brindan cada uno de los diversos campos de iluminación.

Finalmente, se dará pasos a seguir si se quiere realizar ajustes para el campo oscuro y claro, según los principios de iluminación de Kohler.

Marco teorico

Tipos de microscopia óptica

El uso de determinados elementos colocados en el condensador u objetivos, es poco frecuente encontrarlos en los oculares, que se interponen al haz luminoso filtrándolo u obstaculizándolo da lugar a los distintos tipos de microscopía óptica.

Este tipo de dispositivos manipulan físicamente el haz luminoso seleccionando parte de las ondas de las que se compone dicho haz, lo que provoca una imagen contrastada de la muestra sin necesidad de teñirla.

Entre los tipos de microscopia más utilizados en el ámbito de la metalografía se pueden encontrar principalmente dos: Campo claro y Campo oscuro. Sin embargo, existen otros dos tipos de microscopio que son comunes fuera del campo de la metalografía, los cuales son: Contraste de fases y Contraste de interferencia.

1. Campo claro

No se interpone ningún elemento más allá de un filtro de luz de día caracterizado por ser de un color azul, que en esencia modifica la temperatura del color de la iluminación proveniente de una lámpara convencional haciéndola un tono más frío, más azulada, de esa manera transformándola en una más natural y amena a la vista del que va a realizar la examinación.

1. Campo oscuro

Se añade un dispositivo o filtro opaco entre el haz de luz y la muestra, de modo tal que solo permita pasar los rayos periféricos y el objetivo solo sea capaz de recibir aquellos rayos de luz dispersados por la muestra analizada, mientras el resto deja de tomarse en cuenta. De esta manera se es capaz de observar límites con mayores definiciones, al estos estar sobre un fondo oscuro. Por otro lado, es muy útil para muestras que no son observables con el tipo de microscopia más común, el cual es el campo claro.

[pic 1]

Para ajustar de manera correcta los microscopios de luz transmitida para campo claro y campo oscuro es se debe seguir los pasos de los principios de iluminación de Kohler. Estos deben ser seguidos debido a que tiene como objetivo la representación más fiel posible de un objeto y son las siguientes para cada caso:

Ajustes para luz transmitida-campo claro según KÖHLER

• El microscopio debe estar conectado, con la lámpara halógena encendida.
• Regular la claridad de la imagen mediante el regulador de tensión en el estativo del microscopio.
• Poner un preparado con contrastes fuertes en la platina de desplazamientos en cruz.
• Intercalar en caso dado la óptica frontal del condensador, se recomienda el objetivo de menor aumento y llevar el condensador mediante el mando para movimiento vertical hasta el tope superior. El tope tiene que estar ajustado de tal manera que el preparado no sea levantado por el condensador.
• Intercalar el objetivo 10x mediante el revólver porta objetivos y enfocar el preparado mediante el mando de enfoque.
• Cerrar el diafragma de campo luminoso, hasta que se pueda ver (aunque poco nítido) en el campo visual.
• Bajar el condensador mediante el mando para movimiento vertical (4-13/5 o sea 4-14/3) hasta que el borde del diafragma de campo luminoso aparezca con suficiente nitidez.
• Centrar la imagen del diafragma de campo luminoso mediante los dos tornillos de contraje situados en el porta condensador.
• Abrir después el diafragma de campo luminoso hasta que su borde justamente desaparezca del campo visual.
• Al cambiar de condensador, el diafragma de campo luminoso normalmente quedará centrado, siempre que no se haya movido los, tornillos de centraje.
• Para ajustar el diafragma de apertura (contraste) sacar un ocular de la porta oculares y mirar a simple vista por el tubo- Ajustar el diafragma de apertura a unos .2/3.,.4/5 del diámetro de las pupilas de salida de los objetivos. En la mayoría de las aplicaciones, este ajuste del diafragma. de apertura proporciona el mejor contraste con una resolución casi completa, y por lo tanto representa el compromiso más favorable para la vista humana.
• Volver a insertar el ocular en la porta oculares

Ajustes para luz transmitida-campo oscuro.

• Girar el disco de revólver del condensador universal a la posición de intercalar la óptica frontal del condensador.
• Quitar un ocular del tubo (o cambiarlo por el microscopio auxiliar) y controlar si el diafragma de campo oscuro está centrado en relación con la pupila de salida del objetivo. Si el diafragma de campo oscuro D central en el condensador universal se encuentra fuera de la pupila de salida del objetivo o descentrado en relación a ella y ésta no tiene un color oscuro uniforme, entonces hay que centrar el diafragma de campo oscuro de nuevo.

• Para centrar el diafragma de campo oscuro, girar los dos tornillos de centraje mediante los dos destornilladores de macho hexagonal SW1,5 hasta que la pupila de salida del objetivo quede uniformemente oscura. Después del contraje quitar los dos destornilladores de macho hexagonal SW 1,5 del condensador.
• Los objetivos con diafragma iris de apertura incorporado tienen aperturas demasiado altas para luz transmitida - campo oscuro, por lo cual es necesario cerrar el diafragma iris de apertura hasta la apertura límite de 0,75.
• Un criterio decisivo para el método de campo oscuro es un fondo lo más oscuro posible del campo visual.

[pic 2]

En el laboratorio de microscopia realizado en el horario de clase se pudo observar diferencias al momento de observar la misma muestra a campo oscuro y a campo claro y fueron las siguientes:

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