Tipos de tinción

INSTITUTO DE ESTUDIOS SUPERIORES DE CHIAPAS

UNIVERSIDAD SALAZAR

ESCUELA DE MEDICINA

Catedrático:

Biólogo Hans Hartman Jiménez

Materia:

Bases de la ecología.

Tema:

Tinción.

Alumnos(as):

Colomo Meza Lucía Marleni.

González Domínguez Karina Guadalupe.

León Méndez Ivett Verónica.

Matus Cundapi Carlos Alberto.

Meza Morales Carlos Horacio.

Pérez Luna Gema.

Segundo semestre grupo «E»

Tuxtla Gutiérrez, Chiapas a 26 de marzo del 2014.

INTRODUCCIÓN

Tinciones: Es una técnica que consiste en teñir los microorganismos o material celular mediante sustancias que generan un color para la diferenciación entre ellas. (Murray,2009).

Las tinciones se combinan químicamente con el protoplasma bacteriano; si la célula no ha muerto, el proceso de la tinción termina por hacerlo. (Brooks, 2004).

Los tipos de colorantes más usados son los básicos, ya que tiñen uniformemente a las células bacterianas, en cambio las básicas no la tiñen y solo se usan para teñir el fondo con un color de contraste.(Ibídem).

Gracias a estas podemos encontrar dos clasificaciones importantes para las bacterias:

Gram positiva, su principal componente es la capa de peptidoglucano la cual le confiere una coloración violeta o azul.

Gram negativa, a diferencia de la anterior no cuenta con una capa de peptidoglucano la cual le confiere una coloración rosácea. (Ibídem).

MARCO TEÓRICO

Tipos de tinción:

Tinción de gram: Es la más conocida y utilizada de forma generalizada, constituye el fundamento de la clasificación fenotípica de las bacterias.(Murray, 2009).

La base de la reacción diferencial de gram es de estructura de la pared celular, la cual es una característica muy importante en las bacterias. (Brooks, 2004).

Tinción acido resistente: Las bacteria acido resistente son las que retienen la carbolfucsina (fucsina básica disuelta en una mescla de alcohol, agua, fenol) la especie mycobacterium. (Ibídem).

Tinción negativa: consiste en la tinción del fondo con un colorante acido para dejar a las células incoloras en contraste.

Este método sirve para observar bacterias o estructuras que difícilmente se tiñe con las técnicas directas. (Ibídem).

Tinción de los flagelos: Los flagelos son estructuras demasiados finas, es por eso que se tratan con una suspensión coloidal inestable en sales de ácido tánico para formar un precipitado denso en ellos y poner en manifiesto su presencia. (Ibídem)

Tinción de capsula: La cápsula se pone en manifiesto con una coloración negativa o modificación de ella; ejemplo: Método de Welch.(Ibídem).

Tinción de núcleos: se pueden teñir con la tinción Feulgen, la cual es específica para ADN. (Ibídem).

Tinción de las esporas: la pared de la espora es relativamente impermeable, no obstante, los colorantes pueden penetrarla si se calienta la preparación. La misma impermeabilidad sirve para evitar la decoloración de la espora durante el tratamiento. La mayoría se tiñen con verde malaquita o carbolfucsinasa. (Ibídem).

Clasificaciónbacteriana por la tinción de gram.

La pared celular es la estructura principal para diferenciar a las bacterias, sus componentes son exclusivos en las bacterias su estructura repetitiva desencadena respuestas inmunitarias innatas en el ser humano.

El peptidoglucano es el elemento que proporciona rigidez, por lo que también determina la forma de la célula bacteriana. (Murray, 2009).

Bacterias gram positivas: Poseen una envoltura sencilla, la cual está constituida por dos o tres capas:

• Membrana citoplasmática.

• Capa de peptidoglucano gruesa.

• Capsula o capa s.

La mayoría de sus paredes celulares contiene cantidades considerables de ácido teicoico y teicurónico, pueden contener moléculas de polisacáridos. (Brooks, 2004).

El peptidoglucano es un elemento clave para la estructura, replicación y supervivencia de las células en condiciones hostiles en las que proliferan las bacterias.(Murray, 2009).

Bacterias gram negativas: Cuenta con una estructura compleja de múltiples capas:

• Membrana citoplasmática o membrana interna, la cual está rodeada por una capa laminar sencilla de peptidoglucano la cual está anclada a una capa compleja denominada membrana externa.

• Espacio periplasmatico: Es una zona comprendida entre la superficie externa de la membrana, citoplasmática y la superficie interna de la membrana externa.

• Puede estar presente en la capa s. (Brooks, 2004).

Según Murray en estas bacterias la capa de peptidoglucano representa tan solo un 5 a 10 % del peso de la pared celular, tampoco contiene ácidos teicoicos ni lipoteicocos. Sus factores de virulencia líticos se encuentran en el espacio periplasmatico. Su membrana externa mantiene la estructura bacteriana y constituye una barrera impermeable a moléculas de gran tamaño, también ofrece protección contra condiciones ambientales adversas.(Ver tabla 1)

Objetivo:

Que el alumno adquiera habilidades en la preparación de extendido de bacterias, así como la aplicación de una técnica de coloración diferencia, como en la gram, para la identificación de bacterias

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Materiales

Biológicos No biológicos Cristalería Metal

Cepas de microorganismos de colección. Papel para film. Portaobjeto. Asa bacteriológica.

Frotis bacteriano teñido de colección. Cubreobjetos. Mechero de busen.

Agua destilada. Puente de tinción.

Pipeta pasteur.

Vaso precipitado.

Reactivos Equipo

Colorantes para coloración de gram. Microscopio.

Aceite de inmersión.

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