CUALES SON LAS TECNICAS PARA EL ESTUDIO DE CELULAS: TINCION CELULAR

TECNICAS PARA EL ESTUDIO DE CELULAS: TINCION CELULAR. PRACTICA #3

María Alejandra Díaz pacheco1. Ingris Sofía torres Fernández2. carolina arcia hortua3. Katen del Carmen Sánchez padilla4. Carlos Andrés correa rodriguez5.Carmen Isabel parra Monterroza6.

Universidad de Córdoba

Facultad de Ciencias Agrícolas

Ingeniería Agronómica

Montería

2017

Presentado a: Gabriel Montes Fuentes

Docente Biología Celular y  Molecular. Universidad de Córdoba

RESUMEN

Las diversas células que podemos observar en el laboratorio, algunos casos se hace difícil mirar de forma detallada las estructuras de estas mismas; por tal motivo contamos con una serie de colorantes que no ayudan a que el contraste de las células aumente y poder observar la presencia de algunos órganos celulares dependiendo del tipo de muestra a observar. Se puede decir que las técnicas de tinción celular son de gran ayuda al momento de observar microorganismos que son difícil de encontrar en una muestra simplemente con el microscopio óptico.

PALABRAS CLAVES: Tinción celular, colorantes, microorganismos

OBJETIVO GENERAL  

• Conocer las distintas formas de tinción y colorantes empleados en el laboratorio de química

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Manejar las distintas técnicas de preparación de una muestra mediante frotis, fijación o coloración.

• Identificar los distintos microorganismos bacterianos presentes en yogurt, vinagre, y en el moho del pan

INTRODUCCION

Debido a que las células bacterianas son muy pequeñas, en la práctica se emplearan las distintas formas de tinción que nos ayudaran a solucionar este problema. También se observaran las distintas bacterias, dándolas a conocer con el fin de realizar un reconocimiento de cada  microorganismo y así poder clasificarlas  según su estructura.

MATERIALES Y METODOS  

Microscopio

MARCO TEORICO

La tinción es el proceso por el cual las moléculas de un colorante se adsorben a una superficie. El uso de colorantes permite cambiar el color de las células de los microorganismos y poder realizar la observación en microscopio óptico. Dado que las bacterias son casi incoloras, no presentan contraste con el medio en el cual se encuentran suspendidas y no pueden observarse claramente sin algún tratamiento previo. De acuerdo a la reacción que ocurre, existen diferentes tipos de tinción:

Tinción simple:

El colorante utilizado sirve solo para denotar la morfología celular.

Tinción diferencial:

El colorante utilizado pone de manifiesto diferencias entre células bacterianas o entre partes de una misma célula. Estas técnicas utilizan más de un colorante o bien ciertos reactivos complementarios para la tinción. Ejemplos: Tinción de Gram, Tinción de Ziehl-Neelsen, etc

Colorantes

Los colorantes más utilizados: azul de metileno, cristal violeta, safranina, son catiónicos y se combinan fuertemente con componentes celulares cargados negativamente, como los ácidos nucleicos y los polisacaridos ácidos (las envueltas externas de los microorganismos están por lo general cargadas negativamente)

Porta objetos y cubre objetos

Puente de coloración

Beaker

Solución de lugol

Solución de azul de metileno

Aceite de inmersión

Guantes

Agua destilada

PROCEDIMIENTO  

YOGURT

• Realizar un frotis disolviendo 1 gota de yogurt en una pequeña gota de agua destilada o solución salina.
• Teñir con azul de metileno durante 2 minutos
• Lavar la placa con agua y dejar secar al ambiente
• Adicionar una gota de aceite de inmersión y observar al microscopio  

VINAGRE

• Tomar una gota de vinagre y extenderle en el portaobjetos con una gota de agua destilada o solución salina  
• Dejar secar y fijar con calor empleado la llama de un mechero
• Teñir durante dos minutos con azul de metileno, luego, lavar el exceso de colorante y secar al ambiente
• Adicionar una gota de aceite de inmersión y observar al microscopio

  LEVADURA

• Se toma una muestra de levadura y se extiende en el portaobjetos con una gota de agua destilada.
• Teñir durante dos minutos con azul de metileno, luego, lavar el exceso de colorante y secar al ambiente
• Adicionar una gota de aceite de inmersión y observar al microscopio  

RESULTADOS

• YOGURT

En el yogurt después de realizar todo el montaje antes mencionado se observó la muestra en  el microscopio a 40x (ver imagen. 1). Se observó estructuras bacterianas de estreptococo aunque no muy claros.

[pic 1]

 Imagen 1. Vista de yogurt a 40x 

Luego se le agrego aceite de inmersión y observamos la misma muestra a 100x (ver imagen 2) y se observó nuevamente los estreptococos, pero esta vez se redujo el capo visual.

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