Micobacterium Tuberculosis.

Microbiología Medica UNAN – Managua

Seminario: Tuberculosis Pulmonar.

1. Generalidades de la Micobacterias:

• Son bacterias aerobias obligadas.
• De contornos cilíndricos.
• No esporulados.
• No móviles.
• AARR (Gracias a los ácidos micólicos).
• Obtienen Q de la oxidación de compuestos simples de carbono.
• ↑ CO2 → ↑ Proliferación.
• Tiempo de generación, aprox. 18 – 20 horas.
• Proliferan satisfactoriamente entre 22 – 33 grados Celsius.
• Son resistentes químicamente por su naturaleza hidrófoba y crecimiento en cúmulos.
•  Los bacilos de Tb son resistentes al secamiento (esputo seco).
• Dan lugar a colonias muy plegadas y secas, con apariencia de micelio.
• El bacilo de la Tb es sensible al calor, alcohol y acido fenico y resistente al cloro, ácidos, álcalis y los amonios cuaternarios.

1. Mycobacterium Tuberculosis:

Entonces M. Tb son finas estructuras cilíndricas de 0.4 x 0.3 micras, que en medios artificiales se observan de forma cocoide o filamentosa, no se clasifican como gram, sino que son AARR (97% alcohol etílico, 3% HCL).

• Se utiliza la técnica de Ziehl – Neelsen para identificación de AARR.
• Positivo para M. Tb si hay fluorescencia amarillo – naranja al aplicar los colorantes fluorocrómicos (auramina - rodamina).

Zielh – Neelsen (procedimiento):

1. Fijar el frotis con calor.
2. Cubrir con carbolfucsina y calentar suavemente.
3. Lavar con agua desionizada.
4. Decolorar con alcohol acido hasta que la muestra se torne rosa débil.
5. Lavar con agua.
6. Aplicar azul de metileno (1min) como contraste.
7. Lavar con agua desionizada y dejar secar.

1. Cultivos Para Micobacterias:

El cultivo primario para M. Tb. debe ser selectivo para evitar el crecimiento de bacterias y hongos, y no selectivo.

1. Medio de Agar Semisintético: (7H10, 7H11), se utiliza para inóculos grandes, contienen sales definidas, vitaminas, albumina, catalasa y glicerol, 7H11 contiene también hidrolizado de caseína.

La albumina neutraliza los efectos tóxicos e inhibidores de los ácidos grasos en la muestra o el medio.

  Este medio se utiliza para observar la morfología de las colonias.

1. Medios de Huevo Espesado (Lowestein - Jensen):

Contienen sales definidas, glicerol y sustancias orgánicas, en este se incluye el verde de malaquita para inhibir otras bacterias, estos se utilizan como selectivos al añadirles antibióticos.

1. Caldos (Middlebrook 7H9, 7H12):

Se utiliza para inóculos pequeños, las Micobacterias crecen como masas por el carácter hidrófobo del medio, pero si se agregan esteres hidrosolubles de ácidos grasos y permite la proliferación dispersa.

1. Constituyentes de la Pared de los Bacilos de Tb:

La pared de las Micobacterias induce Hipersensibilidad Tardía (solo en animales ya sensibilizados) y moderada resistencia a la infección.

1. Lípidos:

• Poseen ácidos micólicos (responsables de AARR), ceras (D) y fosfátidos.
• El dipéptido murámilo (proveniente de los Peptidoglucanos) en complejo con los ácidos micólicos pueden hacer que se formen granulomas.
• Fosfolípidos → Necrosis Caseosa.
• Lípidos → AARR.
• La propiedad AARR se pierde pues si se eliminan los lípidos por temperatura o ultrasonido a las bacterias.
• Los lípidos de la pared también funcionan para el serotipaje.

En cepas virulentas se observa el Factor Cordón,  formados por ácidos micólicos estreatificados con Trehalosa. Con funciones en:

• Es un factor letal en ratones de experimentación.
• Inhibe la migración de neutrófilos.
• Induce la formación de TNF.
• Activa la vía alterna del complemento.
• Participa en la formación de granulomas crónicos.

1. Proteínas:

Cada tipo de Mb. Contiene proteínas que desencadenan la reacción tuberculinica.

También estimulan la formación de Ac.

1. Polisacáridos:

• No se ha dilucidado su función en la patogenia de la enfermedad.
• Inducen el tipo de hipersensibilidad inmediata y pueden actuar con Ag. en reacciones con suero de personas infectadas.
• En la pared de las Mb. hay glucolípidos que inhiben la fusión de los fagolisosomas.

Las Micobacterias no segregan toxinas.    

En la pared celular de las Mb. los lípidos (ácidos micólicos) están unidos a los arabinogalactanos y a los péptidoglucanos subyacentes, esta estructura de casi nula permeabilidad explica la ineficiencia de muchos antibióticos ante la Tb.

Otra molécula que forma parte de la pared e interviene en la patogenia es el Lipoarabinomanano, que interviene en la interacción patógeno – hospedador y favorece la supervivencia de Mb. Tb. en el interior del macrófago.

1. Patogenia:

1. Fuente de infección: Aerosoles de las personas que portan bacilos activos.

1. Vía de entrada: Inhalación. M. Bovis vía digestiva. En otros casos puede ser cutánea.

• Las Mb. son expulsadas en gotitas de <25 micras, al toser, estornudar, cantar o hablar.
• Las gotitas se evaporan y dejan la Mb. en el ambiente y es inhalada, depositándose en los alveolos.
• En el interior el sistema inhume libera citosinas y linfocinas que estimulan a monocitos y macrófagos.
• Después de uno a dos meses de la exposición, aparecen en los pulmones algunas lesiones patógenas de la infección.

1. Lesiones: La aparición, curación y evolución de las lesiones dependerá del número de Mb. en el inoculo, su proliferación y también del tipo de hospedador.

Lesión Exudativa: Consiste en una reacción inflamatoria aguda, con liquido de edema, presencia de leucocitos PMN y más tarde monocitos alrededor de los bacilos. Toma tres caminos:

• Llegar a la resolución.
• Inducir necrosis masiva del tejido pulmonar.
• Pasar a la lesión productiva.

Lesión Productiva: Consiste en la formación de un granuloma crónico, divididos en tres zonas:

1. Zona central de células gigantes multinucleadas que contienen bacilos Tb.
2. Zona media de células epiteloides pálidas dispuestas en forma radiada.
3. Zona periférica de fibroblastos, linfocitos y monocitos.

Más adelante surge tejido fibroso periférico y la zona central presenta necrosis caseosa y se forma un tubérculo, este puede romperse y vaciar su contenido en un bronquio y formar una cavidad. Más adelante cura por fibrosis o calcificación.

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