Trabajo practico de microdifusion en sangre

Trabajo Practico Nº 1

Determinación del monóxido de carbono por microdifusión

Fundamentos:

La cámara de Conway consiste en un receptáculo con dos compartimentos concéntricos, generalmente de porcelana y una tapa de vidrio esmerilada.

Se utiliza para la separación de compuestos volátiles o gaseosos, fijándolos en una solución apropiada para luego cuantificarlos.

La tapa de vidrio permite en cierre hermético, cuando se le aplica el sellador en sus bordes, como por ejemplo vaselina sólida, etc.

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En el compartimento externo se coloca el material el cual contiene el toxico volátil o gaseoso y en el comprtimento interior una solución fijadora del toxico apropiado para cada caso. El principio en el cual se basa el aislamiento de los compuestos volátiles o gaseosos es el siguiente:

Cuando una solución de un gas o compuesto volátil, llámese X, al colocarla en un recipeiente hermético se establece un equilibrio.

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Recién colocada la solución en el receptáculo, el equilibrio se desplaza hacia la derecha.

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Luego de cierto tiempo se llega al punto de equilibrio.

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Si se repite la experiencia pero se coloca la solución en el compartimiento externo de la cámara de Conway y en el compartimento interno una solución fijadora del compuesto, lo que ocurre es un desplazamiento hacia la derecha.

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Esto ocurre hasta que se agote el compuesto en la solución inicial. Par ayudar y mejorar la liberación se agrega a la muestra a ivestigar un reactivo liberador, por ejemplo H2SO4 diluido.

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El tiempo de difusión dependerá de la temperatura y de cada tipo de sustancia. A mayor temperatura menor tiempo de difusión. No se debe aumentar la temperatura ya que aumenta la posibilidades de pérdida del compuesto volátil o gaseoso.

Los mecanismos por los cuales se fijan los compuestos a los reactivos fijadores pueden ser varios. Para el caso del CO ocurre una reacción redox. En otros casos por solubilidad o reacción acido-base.

Determinación cuantitativa del CO en sangre por microdifusion:

Entre el paladio y el CO, ocurre la siguiente redox:

PdCl2 + CO + H2O                    CO2 + Pdº + 2HCl[pic 15]

Aparece en la camara interna, aproximadamente a los 30 minutos, una pátina de color metálico (Pdº).

Se tomo una alícuota de la cámara interna y se agrega solución de IK, obteniendo un complejo rojo.

4I- + Pd2+                  [I4Pd]2-[pic 16]

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