Análisis bioquímico clínico II Práctica #5 "Determinación de proteínas totales"

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ANÁLISIS BIOQUÍMICO CLÍNICO II

PRÁCTICA #5

"DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS TOTALES"

FACILITADORA:

DRA. JANETH TOSTADO QUEZADA

NOMBRES DE LOS INTEGRANTES:

ALVARADO GONZÁLEZ MARIANA

NÚÑEZ ALVARADO MARÍA FERNANDA

RAMÍREZ ATILANO PABLO DANIEL

SALAZAR CALLEROS CÉSAR EMILIANO

VÁZQUEZ NAVARRO VÍCTOR HUGO

GRADO Y SECCIÓN:
6° A

GÓMEZ PALACIO, DGO.                                  10 DE NOVIEMBRE 2023

PRÁCTICA #5

"DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS TOTALES"

OBJETIVO

Determinar la concentración de proteínas totales en una muestra biológica, así como comprender la importancia que este método implica para un análisis clínico.

INTRODUCCIÓN

Las proteínas son compuestos orgánicos formados por la unión de varios aminoácidos, siendo una macromolécula de gran importancia, ya que, comprende del 50 – 70% del peso seco de la célula; actuando como elementos estructurales, biocatalizadores, de señalización celular, inmunológica, receptores, sistema buffer, hemostasia y de transporte, apareciendo bajo la forma de enzimas, hormonas, anticuerpos, factores de la coagulación, etc. En rasgos generales, la síntesis o anabolismo de la mayoría de proteínas se da en el hígado, siendo estos marcadores metabólicos de gran importancia para hacer una valoración hepática; además, hay otro grupo de proteínas que son las inmunoglobulinas, siendo su síntesis en células plasmáticas. Por otra parte, el catabolismo o degradación de estos compuestos comienza en el tubo digestivo, hígado (exceso de aminoácidos), musculo y riñones, siendo otro punto clave la valoración renal en relación a las proteínas circulantes, por ejemplo, la desnutrición proteico-calórica está presente en un alto porcentaje de pacientes con enfermedad renal crónica (ERC) y está asociado con un aumento en las tasas de morbi-mortalidad (Quero y col., 2015).[pic 2][pic 3]

Estos compuestos nitrogenados se encuentran en todos los líquidos, secreciones y excreciones, esto debido a su carga, punto isoeléctrico y estructura que le da la característica de solubilidad. La sangre está constituida de un 5 - 7% de compuestos proteicos, llamadas proteínas plasmáticas. Particularmente en el plasma, las proteínas contribuyen a mantener el volumen del fluido circulante, transportan sustancias relativamente insolubles y actúan en la inactivación de compuestos tóxicos y en la defensa contra agentes invasores, de ahí la importancia de su estudio y determinación ya que son útiles en el monitoreo no solo de los cambios ocasionados por diversos estados de enfermedad, sino también para una evaluación sobre el estudio nutricional del paciente que en muchos casos se ha visto se relaciona directamente con la patología que este puede estar cursando (Puente y col., 2008).

Se dividen en dos fracciones elementales, albúmina y globulinas, proteínas globulares.  La albúmina es la proteína causante del 80% de la presión oncótica del plasma, las concentraciones excesivamente bajas de albúmina pueden dar lugar a edema en las extremidades inferiores, ascitis y edema pulmonar a consecuencia del incremento de la permeabilidad vascular. Presenta características basadas en su estructura molecular, como son ser un agente antioxidante por su residuo de cisteína, capacidad de unión a cationes y aniones, unión a determinados fármacos con alta unión a las proteínas, etc (Godinez y col., 2021). Por otra parte, las proteínas globulinas resaltan las que componen la sangre (seroglobulinas), el componente de coagulación sanguínea el fibrinógeno y las inmunoglobulinas G, M, A, D y G (anticuerpos) (Cosio, 2022). [pic 4][pic 5]

Su determinación es útil en la detección de:

- Hiperproteinemia producida por hemoconcentración, deshidratación o aumento en la concentración de proteínas específicas.

-Hipoproteinemia por hemodilución debida a un defecto en la síntesis proteica, perdidas excesivas (hemorragias) o catabolismo proteico excesivo.

El fundamento para la determinación de proteínas totales, es que estas dan un intenso color violeta azulado en presencia de sales de cobre; esto en medio alcalino. La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de proteína total en la muestra ensayada.

METODOLOGÍA

• Tomar muestra sanguínea (Suero o plasma heparinizado)
• Centrifugar muestra
• Ajustar longitud de onda del espectrofotómetro a 540 (530 -550) nm
• Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada.
• Pipetear en una cubeta los siguientes volúmenes:

• Colocar la cubeta en el espectrofotómetro (leer Abs).
• Realizar los cálculos correspondientes
• Registrar resultados

RESULTADOS

Posterior a la realización de cada una de las lecturas espectrofotométricas, se obtuvieron los cálculos en base a las fórmulas presentadas en los insertos para determinar la concentración de proteínas totales presente en la muestra. Los datos recabados y la concentración calculada se presentan a continuación:

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CONCLUSIÓN

La determinación de proteínas totales es un estudio de rutina, en el cual se mide la presencia de las principales proteínas en la sangre, las cuales son la albúmina y globulina. Las proteínas son necesarias para la mayoría de las funciones normales del cuerpo, como lo es el mantenimiento, crecimiento, reproducción, lactación y producción de cabello, por ello que un incremento o un descenso de dichas proteínas causarían enfermedades tales como sarcopenia, tramboflebitis, trombosis venosa,tromboembolismo pulmonar, desnutrición, enfermedades de los riñones, enfermedades del hígado, síndrome de malabsorción, hasta abortos espontáneos por lo cual es de suma importancia llevar un control de dichas proteínas.

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