Como es el Bombeo de protones en levaduras y sus procesos inhibitorios
Enviado por munra96 • 13 de Septiembre de 2017 • Documentos de Investigación • 797 Palabras (4 Páginas) • 368 Visitas
BOMBEO DE PROTÓNES EN LEVADURAS Y SUS PROCESOS INHIBITORIOS
Romero, Roy; Tovar, Zharick; Peña, Rodrigo
Departamento de Ciencias Naturales
24 de Marzo del 2015
INTRODUCCIÓN
La glicolisis y el ciclo del ácido cítrico (Ciclo de Krebs) generan por si solos una cantidad relativamente baja de energía en forma de ATP. Sin embargo, seis pasos de deshidrogenación reducen un total de 10 moles de NAD+ a NADH y 2 moles de FAD a FADH2 por mol de glucosa. La reoxidación de estos transportadores de electrones reducidos generan la mayor parte de la energía necesaria para la síntesis de ATP.
Algunos compuestos de procedencia exógena actúan como inhibidores respiratorios ya sea como donadores o aceptores de electrones artificiales. Un grupo de compuestos, entre los que se encuentran el 2,4-dinitrofenol (DNP) y la trifluorocarbonilcianuro fenilhidrazona (FCCP), se denominan agentes desacoplantes, o desacopladores. Estos agentes, cuando se añaden a las mitocondrias, bloquean la síntesis de ATP, al tiempo que permiten que continúe la respiración.
Durante la práctica se comprobó que el consumo de glucosa por la levadura deprime progresivamente su concentración en el medio de cultivo, y trae como consecuencia cambios de pH a nivel extracelular. Para comprobar la acción de los inhibidores y desacopladores, se utilizaron distintos agentes inhibidores y desacopladores, DNP como desacoplador y azida sódica como inhibidor, y se midió el pH del medio extracelular, con lo que se podía estimar el pH al que se encontraba la matriz mitocondrial.
METODOLOGÍA
[pic 1]
RESULTADOS
Datos de Línea Basal | |||
pH | Control | DNP | Azida Sódica |
pH a los 0' | 6 | 5,88 | 5,98 |
pH después de 3' | 6 | 5,82 | 5,98 |
pH después de 5' | 5,89 | 5,76 | 5,98 |
TIEMPO | No. VASO | ||
1 Control | 2 DNP | 3 Azida | |
pH a los 5' | 5,57 | 5,61 | 5,91 |
pH a los 10' | 5,42 | 5,52 | 5,81 |
pH a los 20' | 5,32 | 5,47 | 5,8 |
pH a los 30' | 5,25 | 5,44 | 5,79 |
pH a los 40' | 5,17 | 5,43 | 5,79 |
[pic 2]
ANÁLISIS DE RESULTADOS
La toma de muestra control es importante porque permitió evidenciar la respiración mitocondrial y el flujo de protones a través de la membrana mitocondrial interna, lo que nos produce un cambio de pH en la matriz mitocondrial, pasando de ácido a básico. El hecho de que el resultado de la medición de pH sea cada vez más ácido, significa que la matriz se está haciendo cada vez más básica, ya que cuando no tenemos acción de un inhibidor o de un desacoplador, se está llevando a cabo la respiración mitocondrial y se evidencia la salida de los protones, que vuelven el medio más ácido, pero la matriz más básica.
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