Determinación del punto isoelectrico de la caseína

UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL

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DETERMINACIÓN DEL PUNTO ISOELÉCTRICO DE LA CASEÍNA

EXPERIENCIA CURRICULAR:

BIOQUÍMICA AMBIENTAL

DOCENTE

Mg. CASTRO MALABRIGO, VICTOR MANUEL

AUTORES

JARA FLORES, DIEGO EDUARDO

LA CUNZA MARCELIANO, JOSHEP FERNANDO

LEÓN MALLQUI, JEAN CRISTOPHER ELIAS

 ORDOÑEZ GARCIA, DEIVY ULICES

CICLO V - B

TRUJILLO - 2022

INDICE

I.        INTRODUCCIÓN        1

II.        OBJETIVOS        1

III        FUNDAMENTO TEÓRICO        1

IV        MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS        2

V        PROCEDIMIENTO        3

VIII        DISCUSIONES        4

X        REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS        5

XI        ANEXOS        6

PRÁCTICA 1: Determinación del punto Isoeléctrico de la caseína

1. INTRODUCCIÓN

Las estructuras de las proteínas estás formadas por combinaciones de componentes estructurales unitarios llamados aminoácidos. Se dice que la neta de una molécula cuando es cero se determina como punto isoeléctrico, es decir, cuando se encuentran en el equilibrio las cargas positivas y negativas, y esto hace que la proteína esté en su máxima posibilidad para ser precipitada al disminuir su solubilidad y facilitar su agregación.

Los puntos isoeléctricos brindan una mejor indagación por lo que nos permite analizar las diferentes reacciones tanto de las proteínas de solución como de los aminoácidos.

En el presente trabajo se determinó de manera experimental el punto isoeléctrico de la caseína necesario para que se forme un precipitado, asimismo se calculó el pH, también la cantidad de ácido y sal que se usó durante el experimento.

1. OBJETIVOS

• Determinar el punto isoeléctrico de la caseína.
• Determinar el pH de las distintas soluciones, aplicando la ecuación de Henderson-Hasselbach

1. FUNDAMENTO TEÓRICO

Todas las proteínas tienen una carga neta dependiendo del pH del medio en el que se encuentren y de los aminoácidos que la componen, así como de las cargas de cualquier ligando que se encuentre unido a la proteína de forma covalente (irreversible).

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Medio ácido: la proteína tendría una carga neta positiva, debido a que los grupos COOH de los aminoácidos aspártico y glutámico estarían en su forma neutra pero los grupos amino de Arginina y lisina estarían protonados (-NH3+).

Punto Isoeléctrico: La proteína tiene un pH característico al cual su carga neta es cero.

Medio básico: la proteína estaría cargada negativamente, ya que en este caso los grupos carboxilo están desprotonados (COO-) y los grupos amino estarían en su forma neutra (NH2).

La caseína

 Es una fosfoproteína, está químicamente unida a una sustancia que contiene ácido fosfórico. En la caseína, la mayoría de los grupos fosfato están unidos por los grupos hidroxilo de los aminoácidos serina y treonina.

La caseína está formada por Alpha(s1), Alpha(s2)-caseína, ß-caseína, y kappa-caseína formando una micela o unidad soluble. Está micela está estabilizada por la kappa caseína mientras que las alfa y beta son fosfoproteínas que precipitan en presencia de iones calcio.

El punto isoeléctrico de la caseína es 4.6. A este pH, la caseína se encuentra en su punto de menor solubilidad, debido a la reducción de repulsiones intermoleculares, por lo que precipita.

1. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

• Solución de ácido acético 1N
• Solución de caseína al 1 % (en acetato de sodio 0,1 N)
• 9 tubos de ensayo
• Pipetas de 5 mL y 10 mL
• Gradilla para tubos
• Agua destilada

1. PROCEDIMIENTO

• En el primer tubo de ensayo mezclamos 3,2 ml de ácido acético 1N, con 6,8 ml de agua destilada.
• De la mezcla de 10 ml, retiramos 5ml con ayuda de una pipeta de 5ml y lo agregamos al tubo 2, posteriormente se adicionan 5 ml de agua destilada, y de estos nuevos 10 ml se procede a realizar lo mismo hasta el tubo 9, en el cual los 5ml que se retiraran de este lo desechamos.

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• Cuando todos los 9 tubos de ensayo presentan cada uno 5 ml de mezcla entre agua destilada y ácido acético, se adiciona a cada uno 1 ml de caseína, observamos y registramos lo que sucede a los 0 y 60 minutos.[pic 4]

1. RESULTADOS

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1. DISCUSIONES

En la presente práctica de laboratorio, se tiene como principal objetivo determinar el punto isoeléctrico de la caseína. Para ello se parte de los resultados que se obtuvieron de las soluciones contenidas en los 9 tubos de ensayo, luego de que pasará 60 minutos desde que se echó 1 mL de caseína a la solución de ácido acético 1 N y agua destilada. En la primera, y última muestra no se aprecian cambios algunos, mientras que en las demás se observa opalescencia, a excepción del tubo 4, 5 y 6 donde se evidencia la formación de un precipitado, evidenciándose un mayor cantidad de precipitado en el tubo 5, y en dicha muestra contiene ácido acético a una concentración de 0,0167 N y acetato de sodio a una concentración de 0,0167 N, con ello se obtiene un pH de 4,7 ; el cual vendría a ser el punto isoeléctrico de la caseína, ya que a ese valor de pH se forma un precipitado y la suma de las cargas es 0.

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