Frotis

INTRODUCCIÓN

Como técnica necesaria el frotis tiene múltiples ventajas, una de ellas es que es sencillo, práctico y funcional. El frotis (dependiendo de su tipo) da la información necesaria acerca de ciertas células, (bien sea epiteliales, parte de hongos, bacterias, sanguíneas, entre otras), para el estudio de estas y el diagnostico de algunas enfermedades; que este método tenga como paso elemental la fijación y posterior tinción de la muestra permite al que observa tener una selección clara de cada elemento (Carr, 2010; Rodak, 2010).

De esta manera al introducirnos en el tema podemos encontrar una gran cantidad de herramientas, que como estudiantes permiten el aprendizaje claro y preciso de ciertos elementos, en este caso sanguíneo y epiteliales. Mediante la técnica del frotis, se observaran las estructuras principales de la sangre (eritrocitos, leucocitos, plaquetas) en el caso del frotis sanguíneo; y los epitelios de la mucosa bucal por medio del frotis sanguíneo.

MARCO TEÓRICO

FROTIS

Un frotis o extendido de sangre es un mecanismo científico que consiste en el extendido de una gota de sangre en la superficie de un portaobjetos o de un cubreobjetos, con el fin de analizarla posteriormente. Es más adecuado emplear sangre que aún no ha estado en contacto con el anticoagulante, pues este podría alterar los resultados, algunos anticoagulantes tienden a deformar las células de la sangre (Rapaport, 1980).

PORTAOBJETOS

El portaobjetos es una lámina rectangular de vidrio muy delgada, donde se colocan objetos de mínimo tamaño o preparaciones de baja escala, las cuales pueden ser observadas en el microscopio (Wintrobe, 1969).

CUBREOBJETOS

Un cubreobjetos es una fina hoja de material transparente de planta cuadrada (normalmente 20mm x 20mm) o rectangular (de 20 mm x 40 mm habitualmente). Se coloca sobre un objeto que va a ser observado bajo microscopio, el cual se suele encontrar sobre un portaobjetos. Sirve para: cubrir los objetos que estén en el portaobjetos que a su vez está en un objeto llamado microscopio (Wintrobe, 1969).

FROTIS SANGUÍNEO

Un frotis de sangre preparado en forma adecuada es esencial para asegurar la evaluación correcta de la morfología celular. Se encuentra disponible una variedad de métodos para la preparación y la tinción de los frotis de sangre; a continuación se describe el más común (Carr, 2010; Rodak, 2010).

FROTIS BUCAL

Todas las paredes de la cavidad bucal se encuentran con mucosas, superficie húmeda, en la mucosa bucal se pueden apreciar los núcleos interfasicos. Orgánulo celular (células eucariotas) alberga la mayor dotación de ADN y que se encuentra separado del citoplasma por la envoltura nuclear.

Las células obtenidas por raspado de la superficie, muestra el contorno poligonal correspondiente a células epiteliales, células que recubren las superficies interna y externa del cuerpo formando así capas celulares las que ayudan a proteger los órganos(Ruiz, 2003).

PREPARACION DE UN FROTIS CON LA TECNICA DEL PORTAOBJETOS EN CUÑA

La preparación de extendidos con la técnica del portaobjetos en cuña es la más conveniente y común para hacer un frotis de sangre periférica. Esta técnica requiere al menos de dos portaobjetos de vidrio, limpios, de 75 x 25 mm. Se recomienda el empleo de portaobjetos para microscopia de alta calidad, con bordes biselados. Uno de los portaobjetos se utiliza como soporte del extendido sanguíneo y el otro como portaobjetos extensor, los que luego pueden invertirse para preparar un segundo extendido. Una alternativa aceptable es colocar una gota de sangre de tamaño similar obtenida por punción de un dedo. El tamaño de la gota de sangre es importante. Las gotas demasiado grandes forman extendidos muy largos o gruesos, mientras que las que son demasiado pequeñas por lo general producen extendidos cortos o delgados. Al preparar el frotis, el portaobjetos extensor debe ser sostenido de manera segura por delante de la gota de sangre de 35-45 grados con respecto al otro portaobjetos (Carr, 2010; Rodak, 2010).

TINCION DEL FROTIS DE SANGRE PERIFERICA

El propósito de teñir los frotis sanguíneos es identificar las células y reconocer fácilmente la morfología a través del microscopio. La tinción de Wright o Wright- Giemsa es la utilizada con mayor frecuencia para frotis de sangre periférica o medula ósea. Ambas contienen eosina y azul de metileno; por lo tanto, se denominan tinciones policrómicas. Las células se fijan sobre el portaobjetos de vidrio con el metanol de la tinción (Carr, 2010; Rodak, 2010).

Un frotis teñido de manera adecuada tiene las siguientes características:

1. Los eritrocitos deben ser de color rosa a salmón.

2. Los núcleos son de color azul oscuro a violeta.

3. Los gránulos citoplasmáticos de los neutrófilos son de color lila.

4. Los gránulos citoplasmáticos de los basófilos son de color azul oscuro a negro.

5. Los gránulos citoplasmáticos de los eusinofilos son de color rojo a anaranjado.

6. El área entre las células debe estar limpia y libre de precipitados de colorante. Es necesario contar con un extendido bien teñido para lograr una interpretación exacta de la morfología celular. (Carr, 2010; Rodak, 2010).

LA SANGRE

La sangre representa alrededor del 8% del peso corporal del hombre. Esta formada en un 40% por células sanguíneas: eritrocitos y leucocitos. Y en un 60% de plasma (donde están los minerales y otros componentes de la sangre). La sangre se compone de:

PLASMA

Con excepción del oxigeno transportado principalmente por la hemoglobina, la mayoría de las moléculas requeridas por las células individuales, así como los productos de desecho de estas células, son arrastradas dentro del torrente sanguíneo disueltas en el plasma, que al ser 90% agua, funciona químicamente como un solvente polar. Además, el plasma contiene moléculas de proteínas, conocidas como proteínas plasmáticas que no son nutrientes ni productos de desecho. Las proteínas plasmáticas mantienen elevado el potencial osmótico con relación al fluido intersticial y también se unen a ciertos iones y moléculas pequeñas, actuando como transportador de grasas, colesterol y otras moléculas insolubles en el torrente sanguíneo (Curtis,2000).

CÉLULAS SANGUÍNEAS

La formación de las células sanguíneas (hematopoyesis) se produce muy temprano en el embrión humano, en el hígado y en menor cantidad en el bazo. Después del nacimiento,

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