INFORME DE LABORATORIO DE GENÉTICA PCR

UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO[pic 1][pic 2]

FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERÍA EN ALIMENTOS Y BIOTECNOLOGÍA

INFORME DE LABORATORIO DE

GENÉTICA

1. TEMA

PCR

1. OBJETIVO

II.I. Objetivo General

• Comprender los fundamentos de la técnica de PCR mediante el estudio de las tres etapas que lo componen para amplificar secuencias de ADN.

II.II. Objetivos Específicos

• Detallar los materiales y los ciclos de la PCR por medio de un mapa mental para facilitar el aprendizaje de la técnica.
• Realizar la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa mediante los parámetros obtenidos del gen IL6 para determinar su pureza y rendimiento.

1. INTRODUCCIÓN

La PCR o reacción en la cadena de la polimerasa incrementa el número de secuencias de ADN, mediante una enzima llamada ADN polimerasa la cual se encarga de sintetizar el ADN de las células. Sin embargo, si el ADN sintetizado es complementario (ADNc) se obtiene una PCR de transcripción inversa, la cual se origina por la enzima transcriptasa reversa que convierte el ARNm en un ADNc (NIH, 2022).

Este proceso consta de tres etapas: en la desnaturalización las cadenas de ADN son separadas a una temperatura de 95°C, los primers en la hibridación alinean sus extremos en dirección 3’ e hibridan con la secuencia complementaria y en la etapa de extensión la Taq polimerasa cataliza el complejo templado-primers agregando dNTP’s complementarios para formar cadenas de ADN (Tamay, 2013).

Para visualizar el resultado es necesario emplear la técnica de electroforesis en gel de agarosa, en esta técnica se separan los ácidos nucleicos de acuerdo con su tamaño y carga, mediante una matriz sólida que funciona como un filtro. En la actualidad la PCR es la técnica más utilizada debido a su precisión, aun teniendo una cantidad mínima de templado. Asimismo, para garantizar la eficacia del proceso se aplican primers diseñados en programas informáticos o comprarlos luego de que sean validados (Tamay, 2013).

1. RESULTADOS

Mapa mental

[pic 3]

Nombre del Gen

IL6

Secuencia del Gen

ATTCTGCCCTCGAGCCCACCGGGAACGAAAGAGAAGCTCTATCTCCCCTCCAGGAGCCCAGCTATGAACTCCTTCTCCACAAGTAAGTGCAGGAAATCCTTAGCCCTGGAACTGCCAGCGGCGGTCGAGCCCTGTGTGAGGGAGGGGTGTGTGGCCCAGGGAGGGCTGGCGGGCGGCCAGCAGCAGAGGCAGGCTCCCAGCTGTGCTGTCAGCTCACCCCTGCGCTCGCTCCCCTCCGGCACAGGCGCCTTCGGTCCAGTTGCCTTCTCCCTGGGGCTGCTCCTGGTGTTGCCTGCTGCCTTCCCTGCCCCAGTACCCCCAGGAGAAGATTCCAAAGATGTAGCCGCCCCACACAGACAGCCACTCACCTCTTCAGAACGAATTGACAAACAAATTCGGTACATCCTCGACGGCATCTCAGCCCTGAGAAAGGAGGTGGGTAGGCTTGGCGATGGGGTTGAAGGGCCCGGTGCGCATGCGTTCCCCTTGCCCCTGCGTGTGGCCGGGGGCTGCCTGCATTAGGAGGTCTTTGCTGGGTTCTAGAGCACTGTAGATTTGAGGCCAACGGGGCCGACTAGACTGACTTCTGTATTTATCCTTTGCTGGTGTCAGGAAGTTCCTTTCCTTTCTGGAAAATGCCAAATGGGTCTGAAATCCATGCCCACCTTTGGCATGAGCTGAGGGTTATTGCTTCTCAGGGCTTCCTTTTCCCTTTCCAAAAAATTAGGTCTGTGAAGCTCCTTTTTGTCCCCCGGGCTTTGGAAGGACTAGAAAAGTGCCACCTGAAAGGCATGTTCAGCTTCTCAGAGCAGTTGCAGTACTTTTTGGTTATGTAAACTCAATGGCTAGGATTCCTCAAAGCCATTCCAGCTAAGATTCATACCTCAGAGCCCACCAAAGTGGCAAATCATAAATAGGTTAAAGCATCTCCCCCACTTTCAATGCAAGGTATTTTGGTCCTGTTTGGTAGAAAGAAAAGAACACAGGAGGGGGAGATTGGGAGCCCACACTCGAATTCTGGTTCTGCCCAAACCAGCCTTGTGATCTTGGGTAAATTCCCTACCACCTCTGGACTCCATCAGTAAAATTGGGCGTGGACTAGGTGATCTCATAGATCCTTCCTGCTGGAACATTCTTAGGCTTGAATTATATTCTCCTAATTATTGTCAAAATTGCTGTTATTAAGTATCTACTGTGTGCCAGGCACTTTAAATAAATATTGTGTCTAATCTTCAAAACAAATTTGCAAGGAAGGTTTTTGGAGATAAGGAAACTGAGACTCAGGATTAAGTAACACACCTAAAGTCACAGGTGAGCTTGGAACTGAACCCAAGTGTGCCCCCACTCCACTGGAATTTGCTTGCCAGGATGCCAATGAGTTGTAGCTTCATTTTCTTAGAGACTTTCCTGGCTGTGGTTGAACAATGAAAAGGCCCTCTAGTGGTGTTTGTTTTAGGGACACTTAGGTGATAACAATTCTGGTATTCTTTCCCAGACATGTAACAAGAGTAACATGTGTGAAAGCAGCAAAGAGGCACTGGCAGAAAACAACCTGAACCTTCCAAAGATGGCTGAAAAAGATGGATGCTTCCAATCTGGATTCAATGAGGTACCAACTTGTCGCACTCACTTTTCACTATTCCTTAGGCAAAACTTCTCCCTCTTGCATGCAGTGCCTGTATACATATAGATCCAGGCAGCAACAAAAAGTGGGTAAATGTAAAGAATGTTATGTAAATTTCATGAGGAGGCCAACTTCAAGCTTTTTTAAAGGCAGTTTATTCTTGGACAGGTATGGCCAGAGATGGTGCCACTGTGGTGAGATTTTAACAACTGTCAAATGTTTAAAACTCCCACAGGTTTAATTAGTTCATCCTGGGAAAGGTACTCTCAGGGCCTTTTCCCTCTCTGGCTGCCCCTGGCAGGGTCCAGGTCTGCCCTCCCTCCCTGCCCAGCTCATTCTCCACAGTGAGATAACCTGCACTGTCTTCTGATTATTTTATAAAAGGAGGTTCCAGCCCAGCATTAACAAGGGCAAGAGTGCAGGAAGAACATCAAGGGGGACAATCAGAGAAGGATCCCCATTGCCACATTCTAGCATCTGTTGGGCTTTGGATAAAACTAATTACATGGGGCCTCTGATTGTCCAGTTATTTAAAATGGTGCTGTCCAATGTCCCAAAACATGCTGCCTAAGAGGTACTTGAAGTTCTCTAGAGGAGCAGAGGGAAAAGATGTCGAACTGTGGCAATTTTAACTTTTCAAATTGATTCTATCTCCTGGCGATAACCAATTTTCCCACCATCTTTCCTCTTAGGAGACTTGCCTGGTGAAAATCATCACTGGTCTTTTGGAGTTTGAGGTATACCTAGAGTACCTCCAGAACAGATTTGAGAGTAGTGAGGAACAAGCCAGAGCTGTGCAGATGAGTACAAAAGTCCTGATCCAGTTCCTGCAAAAAAGGTGGGTGTGTCCTCATTCCCTCAACTTGGTGTGGGGGAAGACAGGCTCAAAGACAGTGTCCTGGACAACTCAGGGATGCAATGCCACTTCCAAAAGAGAAGGCTACACGTAAACAAAAGAGTCTGAGAAATAGTTTCTGATTGTTATTGTTAAATCTTTTTTTGTTTGTTTGGTTGGTTGGCTCTCTTCTGCAAAGGACATCAATAACTGTATTTTAAACTATATATTAACTGAGGTGGATTTTAACATCAATTTTTAATAGTGCAAGAGATTTAAAACCAAAGGCGGGGGGGCGGGCAGAAAAAAGTGCATCCAACTCCAGCCAGTGATCCCACAGAAACAAAGACCAAGGAGCACAAAATGATTTTAAGATTTTAGTCATTGCCAAGTGACATTCTTCTCACTGTGTTGTTTCAATTCTTTTTCCTACCTTTTACCAGAGAGTTAGTTCAGAGAAATGGTCAGAGACTCAAGGGTGGAAAGAGGTACCAAAGGCTTTGGCCACCAGTAGCTGGCTATTCAGACAGCAGGGAGTAGACTTGCTGGCTAGCATGTGGAGGAGCCAAAGCTCAATAAGAAGGGGCCTAGAATGAAACCCTTGGTGCTGATCCTGCCTCTGCCATTTCTACTTAAGCCAGGGTTTCTCATATGTTAACATGCATGGGAATTCCCTGGGCATCTTCTTGTGGTGTGGAGTCTGACTTAGCAAGCCTCGGGTGGGTTTGAGGGTCAAATTTCTACCAGGCTTATATCCCTGGTGATGCTGCAGAATTCCAGGACCACACTTGGAGGTTTAAGGCCTTCCACAAGTTACTTATCCCATATGGTGGGTCTATGGAAAGGTGTTTCCCAGTCCTCTTTACACCACCGGATCAGTGGTCTTTCAACAGATCCTAAAGGGATGGTGAGAGGGAAACTGGAGAAAAGTATCAGATTTAGAGGCCACTGAAGAACCCATATTAAAATGCCTTTAAGTATGGGCTCTTCATTCATATACTAAATATGAACTATGTGCCAGGCATTATTTCATATGACAGAATACAAACAAATAAGATAGTGATGCTGGTCAGGCTTGGTGGCTCATGCCTGTATTCCCTAAACTTTGGGAGCCTAAGGTGAGAACTCCTTGAACTCCTAAGGCCAGGAGTTCAAGACCAGCCTGGATAACATAGCAAGACCCCATCTCTACAAAAAACCAAAACCAAACAAACAAAAATGATAGTGGTGCTTCCCTCAGGATGCTTGTGGTCTAATGGGAGACAGAACAGCAAAGGGATGATTAGAAGTTGGTTGCTGTGAGCCAGGCACAGTGCTGATATAATCCCAGCGCTATGGGAGGCTGAGGTGGGTGGATCATTTGAGGCCAGGAGTTTAAGACCAGCCTGGTCAACATGGTAAAACCCCATCTCTACTTAAAAATACAAAAAAGTTAGCCAGGCATGGTGGCATACACCTGTAACCCAGCTACTCAGGAGGCTGAGGCACATGAATCACTTGAACCCAGGAGGCAGAGGTTGCTGTGCACCACTGCACTCCAGCCTGGGTGACAGAACGAGACCTTGACTCAAAAAAAAAAAAAAAAGAAGTTTGTTGCTATGGAAGGGTCCTACTCAGAGCAGGCACCCCAGTTAATCTCATTCACCCCACATTTCACATTTGAACATCATCCCATAGCCCAGAGCATCCCTCCACTGCAAAGGATTTATTCAACATTTAAACAATCCTTTTTACTTTCATTTTCCTTCAGGCAAAGAATCTAGATGCAATAACCACCCCTGACCCAACCACAAATGCCAGCCTGCTGACGAAGCTGCAGGCACAGAACCAGTGGCTGCAGGACATGACAACTCATCTCATTCTGCGCAGCTTTAAGGAGTTCCTGCAGTCCAGCCTGAGGGCTCTTCGGCAAATGTAGCATGGGCACCTCAGATTGTTGTTGTTAATGGGCATTCCTTCTTCTGGTCAGAAACCTGTCCACTGGGCACAGAACTTATGTTGTTCTCTATGGAGAACTAAAAGTATGAGCGTTAGGACACTATTTTAATTATTTTTAATTTATTAATATTTAAATATGTGAAGCTGAGTTAATTTATGTAAGTCATATTTATATTTTTAAGAAGTACCACTTGAAACATTTTATGTATTAGTTTTGAAATAATAATGGAAAGTGGCTATGCAGTTTGAATATCCTTTGTTTCAGAGCCAGATCATTTCTTGGAAAGTGTAGGCTTACCTCAAATAAATGGCTAACTTATACATATTTTTAAAGAAATATTTTATATTGTATTTTATATAATGTATAAATGGTTTTATACCAATAAATGGCATTTTAAAAAATTCA

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