INFORME LABORATORIO PRACTICA DE ESPECTROFOTOMETRÍA

INFORME LABORATORIO

 PRACTICA DE ESPECTROFOTOMETRÍA

LORENA ARIAS HURTADO c.c 1152696648

ANDREA LISETTE PIEDRAHITA AGUDELO c.c 1040747226

NICOLÁS FELIPE RAMÍREZ ARDILA c.c 1098809355

THOMAS CAMILO SANÍN TOBÓN c.c  1193133370

Docente

Jaime Ivan Rodríguez Ospina

UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA

FACULTAD DE MEDICINA

MEDELLÍN

2018-2

Contenido

INTRODUCCIÓN        3

OBJETIVOS        4

General.        4

Específicos        4

MARCO CONCEPTUAL        5

METODOLOGIA        11

Reactivos:        13

Procedimiento        13

RESULTADOS.        15

ANALISIS.        32

CONCLUSIONES        34

BIBLIOGRAFIA        35

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS DE FIGURAS        35

ANEXOS        37

INTRODUCCIÓN

En este informe se plasmarán de manera clara y objetiva los resultados del laboratorio de “Espectrofotometría” de los cuales se hará un análisis. Este laboratorio con tiene también unos objetivos en los que se enfoca el informe y de los que se elaboran unas conclusiones.

Se obtendrán resultados de cuatro colorantes (dos obtenidos por un grupo y dos por otro grupo) a diferentes concentraciones y se medirán sus espectros de absorción, de estos resultados se harán tablas y gráficas de la absorción para obtener la absorbancia óptima y con esta poder construir una curva de calibración con las concentraciones de las diferentes disoluciones para organizar los resultados y facilitar el análisis.

El informe contiene marco conceptual en el que se da una idea sobre la definición de los métodos utilizados, los resultados obtenidos y con estos hacer un análisis y conclusiones adecuadas.

OBJETIVOS

General

Comprender el fenómeno de espectrofotometría mediante el análisis teórico y práctico de los resultados obtenidos de la práctica de laboratorio

específicos

• Obtener datos de absorbancia y transmitancia mediante el adecuado uso de un espectrofotómetro. Obtener resultados a partir de ecuaciones como la de Lambert-Beer de las que podemos saber concentraciones y densidades ópticas de los colorantes   
• Elaborar métodos de comparación de los datos con gráficas que permitan el análisis de las diferencias obtenidas. Con los resultados y la gráficas entender las diferencias entre las curvas de calibración de los colorantes y aprender en qué pruebas de laboratorio clínico se utiliza la espectrofotometría.

• Comprender según la longitud de onda, coeficiente de extinción molar, concentración y los factores de error en la práctica de laboratorio cómo influyen en los resultados y el análisis del fenómeno observado de espectrofotometría.

MARCO CONCEPTUAL

Alrededor de mediados de la mitad del siglo xv Isaac Newton tuvo las primeras impresiones de que el color no existe, cuando experimento encerrado en una habitación totalmente oscura exceptuando un pequeño rayo de luz blanca y lo hizo pasar por un prisma de base triangular, y notó que al pasar por el cristal el rayo de luz se descomponía y aparecían los seis colores del espectro reflejados en la pared en donde incidía el rayo de la luz original, los colores eran: rojo (con una longitud de onda de 610 a 750nm), naranja (con una longitud de onda de 590 a 610nm, amarillo (con una longitud de onda de 570 a 590nm), verde (con una longitud de onda de 500 a 570nm), azul (con una longitud de onda de 450 a 500nm) y violeta (con una longitud de onda de 380 a 450nm). De esta manera dio a conocer que la luz blanca, la cual está presente en todas partes, está formada por haces de luz de 6 colores y cuando esta luz choca con algún cuerpo u objeto, este absorbe algunos de estos haces de luz, y refleja otros. Los colores que son reflejados son los que captamos por nuestros ojos.
Si un cuerpo absorbe todos los colores, se ve negro. En cambio, si todos los colores se reflejan en la superficie del objeto, se ve blanco. Los colores absorbidos se desaparecen en el interior del objeto, los reflejados llegan al ojo humano.
Se puede concluir que los colores de los objetos dependen del tipo de luz que cae sobre ellos, pero también de la naturaleza de sus superficies; o sea, del tipo del pigmento que los rodee. Estos pigmentos absorben la luz de unos colores particulares, según su longitud de onda.

[pic 1]

Figura  N° 1 Experimento de Newton

Por lo anterior se puede afirmar que el color no es una propiedad intrínseca de los cuerpos, sino que dependen de la naturaleza de la luz que reciben. Percibir un color en lugar de otro se debe a su longitud de onda. Por ejemplo, vemos las hojas de los árboles “verdes” porque absorben todos los colores excepto el verde, que se refleja en su superficie y es lo que llega a nuestros ojos.
En la retina del ojo humano existen dos tipos de células fotorreceptoras: bastones que detectan los colores, y los conos que no los detectan. Estos recogen las diferentes partes del espectro de la luz solar y las transforman en impulsos eléctricos que son enviados luego al cerebro a través de los nervios ópticos, siendo encargándose de la sensación del color. Los bastones y conos de los ojos están organizados en agrupaciones de tres elementos sensibles, que cada grupo capta un solo color del espectro: uno el color azul, otro el color verde y otro el color rojo. Si vemos el color amarillo, es porque se “excitan” al mismo tiempo el verde y el rojo, si vemos el color celeste es porque funcionan al mismo tiempo el verde y el azul.
 
[pic 2]

Figura N° 2 Fotorreceptores del ojo

Se puede afirmar que, el proceso de identificación de colores depende del cerebro y del sistema ocular de cada persona en concreto, por lo que el concepto del color producido por ella es totalmente subjetivo.

Espectrofotometría

La espectrofotometría o colorimetría es uno de los métodos de análisis más usados para cuantificar el color mediante la obtención de un espectro luminoso seleccionado a partir de diferentes longitudes de onda, se basa en la relación que existe entre la capacidad de absorción de luz que tiene un compuesto y su concentración.
Al hacer incidir luz monocromática sobre un medio homogéneo, una parte de la luz se absorbe y otra se transmite, como consecuencia de la intensidad del rayo de luz sea atenuada desde Io (intensidad de la luz incidente) a I (intensidad del rayo de luz transmitido). La absorción se puede medir en compuestos en estado sólido, líquido y gaseoso.

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