Optimización Rápida de la Composición de Solventes

Optimización Rápida de la Composición de Solventes

1. Objetivos:

Los objetivos planteados para esta práctica son:

- Optimizar el Sistema de Solventes

- Elegir con criterio la polaridad de los solventes

- Conocer los distintos tipos de placas cromatografías y sus respectivos usos.

- Separar por cromatografía en placa delgada los análitos presentes en las muestras suministradas por los docentes.

2. Etapas

1. Aplicación de la Muestra

- Método por capilares

2. Desarrollo

a. Primer Ciclo (efecto polaridad)

b. Segundo Ciclo (efecto solvente): mezclas binarias de solventes

c. Tercer Ciclo (efecto composición): mezclas ternarias de solventes

3. Visualización

- UV 254-366 nm (sustancias fluorecentes)

- Derivatización (yodo)

4. Interpretación de resultados

Nota: en nuestro caso trabajamos con la muestra D

3. Materiales utilizados

- Cromatofolios de silicagel, con zona de concentración fase normal (polar)

- Solventes no polares: Iso-Octano, Tolueno, Diclorometano, Acetato de Etilo, Acetona, Etanol.

- Cubas cromatográficas

4. Interpretación de Resultados:

Primer Ciclo: EFECTO POLARIDAD

El compuesto es analizado en placas de Silicagel (Fase estacionaria) y con 6 solventes (Fase Móvil) de polaridades diferentes (de < Iso-Octano a > Etanol). Anexos: Gráficas 1, Tabla 1.

GRUPO A: Para este grupo el compuesto analizado nos permite observar que los análitos no son separados por el Iso-Octano (M1) que es menos no polar de los solventes,la polaridad del compuesto muestra ser muy similar a la de la fase estacionaria por lo que se queda pegado a la línea de siembra Rf=0, el Tolueno (M2) y DCM (M3) si bien es cierto no separan totalmente el compuesto de la línea de siembra (que también puede ser alguna impureza M3) , desplaza aparentemente 2 y 3 análitos del compuesto (Rf=0,04 - 0,65) ya que la polaridad de F.M es ligeramente superior al Iso Octano por tanto podrían tomar en cuenta sus polaridades para las próximas etapas , el Acetato de Etilo (M4), Acetona (M5) y Etanol(M6) son muy polares por tanto arrastran el compuesto muy cerca del frente del solvente (RF=0,86-0,93) lo que tampoco es recomendable pues los Rf están fuera del rango aceptable.

GRUPO B: El Iso-Octano muestra un análito de baja polaridad se ve atraída por la FM y el resto se quedan en la línea de siembra. Las M2, M3 muestran la separación de más análitos en presencia de los solventes de Tolueno y DCM su polaridad ligeramente superior que el Iso Octano separa un poco más los análitos de la línea de siembra, sin embargo aún queda pegada la muestra. Las M4, M5, M6 tienen la ventaja de separar casi en su totalidad el compuesto de la línea de siembra sin embargo la FM es muy polar ya que levanta los análitos cerca al frente del solvente, en estas muestra se evidencia un exceso de compuesto sembrado ya que hay Tailing (M4) y líneas tenues que arrastran desde la línea de siembra hasta las manchas marcada.

GRUPO C: A diferencia de los dos grupos anteriores la polaridad de la muestra parece ser bastante baja, ya que las M1 y M2, M3 separan análitos de la línea de siembra, casi en su totalidad las M2 y M3 los análitos son levantados y sus Rf muestran distancias recorridas aceptables para tomar decisiones en las etapas posteriores. Las M4, M5, M6 al igual que la de los grupos anteriores la FM es muy polar y los análitos están muy cerca del frente del solvente (Rf=0,93-0,95). Se evidencian más de una línea de frente en M3, M6, es necesario ser lo más preciso posible en la señalización de datos para tomar decisiones correctas .

GRUPO D: En nuestro caso de acuerdo a lo que se observa gráficamente y con los Rf obtenidos podemos decir que en el compuesto analizado los análitos se separan mejor con la polaridad del DCM (M3) ya que revela 3 manchas, aunque aún queda compuesto en la línea de siembra y los Rf son bajos podemos decir que los análitos del compuesto son mayormente eluídos con este solvente y por tanto tomar como referencia para las próximas etapas, las M1 , M2 solo muestran dos análitos separados y las M4,M5,M6 la F.M es muy polar y los análitos están cerca del frente del solvente (Rf= 0,86-0,94), en estas muestras también se presenta una línea muy tenue desde la línea de siembra hasta el frente solvente causado por el exceso de muestra en el momento de sembrar.

Segundo Ciclo: EFECTO SOLVENTE

De acuerdo a los resultados obtenido para el primer ciclo se toma en cuenta el o los eluyentes que mejor afinidad tuvieron con la muestra (# de manchas o análitos separados) y su polaridad, luego procedemos a construir las mezclas binarias con los solventes elegidos y se fija una polaridad constante .Anexos: Gráficas 2, Tabla 2.

GRUPO A: De acuerdo a lo observado gráficamente y con los Rf el grupo decidió trabajar con una polaridad de 4.5, la misma que está bien ya que se partió del criterio que la M3 DCM ε=3,5 es la que más análitos separa sin embargo aún se queda en la línea de siembra, por tanto debemos subir un poco la polaridad de la F. M para levantar el análito de la línea de siembra, el valor de polaridad no debe ser muy cercana ,ni superior al de la muestra M4 Ac. Etilo ε=6 ya que se llevaría todo el compuesto a la línea de frente. Con la polaridad establecida lograron obtener el mismo # de análitos (no aumentaron pero la tendencia se mantiene), los compuestos que evidencian una mejor afinidad y mejor valor de Rf son el Tolueno-Etanol (M4), Tolueno-acetona (M5), Etanol-DCM(M6) con un ε aprox. = 6 en todas estas tres mezclas. El Tolueno y Etanol están presentes en al menos dos mezclas, por lo tanto este dato se debería tomarse en cuenta para el siguiente ciclo, las mezclas con Iso Octano los Rf evidencian valores bajos o altos, por tanto no deberían tomarlo en cuenta para la siguiente etapa, pues con otras mezclas tenemos mejores Rf.

GRUPO B: Bajo los mismos criterios el grupo B estableció la polaridad en 4,5 ya que el DCM se separó la mayor cantidad de análitos y en el Ac. Etilo los análitos fueron llevados hasta el frente del solvente. Los resultados evidencian que las mezclas de las Iso Octano- Ac Etilo (M1), Iso Octano – Etanol (M3), Tolueno-Ac. Etilo (M4), Tolueno - Etanol (M6) hacen una mejor separación de análitos y levantan casi toda la muestra, existen un punto muy tenue en la línea de siembra que más bien puede tratarse de impurezas, la teoría señala que pueden encontrarse impurezas hasta de un 5% respecto a la cantidad sembrada. Los Rf permiten ver que los análitos

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