PREINFORMES DE LABORATORIOS DE QUIMICA

I. ACTIVIDAD UREÁSICA EN MUESTRAS DE ORIGEN BIOLÓGICO

Introducción

La ureasa es una enzima, que cataliza la hidrólisis de la urea en gas carbónico e hidróxido de amonio, esta enzima, se encuentra en diversos tejidos vegetales y puede ser usada en análisis de alimentos en la determinación de urea. En esta práctica se usará la técnica volumétrica de Berthelot, en la cual se sustituye de un hidróxido por un halógeno.

Mentefacto ó diagrama conceptual

1. Materiales y métodos

1.1. Materiales y equipos requeridos

Material / Equipo Características

Tubos de ensayo y gradilla Pyrex medianos

Pinzas para bureta

Erlenmeyer 125 ml

Pipetas 5 y 10 ml

Matraz aforado 100 ml

Baño termostato

Beakers 400 ml

Bureta 25 ml

Soporte universal

1.2 Reactivos a utilizar

Reactivo Fórmula Concentración

Ureasa En buffer 0,1%

Fosfato pH 7 (PO4)-3 pH7

Urea H2NCONH2 0,25 M

Cloruro de mercúrico HgCl2 1%

Ácido clorhídrico HCl 0,1N

Indicador Tashiro

1.3 Procedimiento

1.3.1.En campo:

Se toma una muestra de 250g de suelo, 200g de forraje y 100g de harina, se empacan en bolsas negras y se rotulan las muestras según los protocolos existentes. 1.3.2 En Laboratorio

Se realiza la pesada de las muestras, se realiza la extracción con NaCl 1%, se pasa a centrifugar, el sobrenadante se pasa a titulación con HCl, se registra el volumen gastado y se pasa a realizar los registros correspondientes de las tablas de datos.

1.3.3.Diagrama de Flujo

2. Tabla de datos

Muestras – tubos Indicadores

Masa de muestras Vf(ml) VHCl (ml)

Forraje

Harina

Suelo

Tubo blanco

Tubo stnadar

3. Resultados esperados:

• La actividad Ureásica deberá ser mayor en la muestra de suelo, según los ml de HCl gastados en la titulación del amonio producido, dando una coloración rosado violáceo

• La actividad Ureásica deberá ser intermedio en la muestra de forraje

• La actividad Ureásica deberá ser menor en la muestra de harina según los ml de HCl gastados en la titulación

Glosario:

RBE: Reacción Bioquímica Enzimática

AU: Actividad Ureásica, velocidad de hidrólisis de la urea

NNP: Nitrógeno No Proteico, son los compuestos que pueden ser convertidos en proteínas por algunos organismos vivos

Bibliografía

• Granados, J.,(2010),Protocolo prácticas de laboratorio, Pág 3-8; ECAPMA; UNAD

• http://es.wikipedia.org/wiki/Ureasa

• http://www.youtube.com/watch?v=dwju_7mvikg

II. CARBONO ORGÁNICO, MATERIA ORGÁNICA Y CAPACIDAD AMORTIGUADORA ( DE SUELOS )

Introducción

Los componentes que conforman el suelo (orgánicos e inorgánicos) forman una mezcla heterogénea que se pueden presentar en cualquiera de los estados líquido, solido o gaseoso; la interacción de estos componentes se encuentra en permanente actividad lo que le da las características fisicoquímicas y biológicas haciéndolos aptos para todas las actividades del agro.

Mentefacto ó diagrama conceptual

3. Materiales y métodos

3.1. Materiales y equipos requeridos

Material / Equipo Características

Erlenmeyer 125mL

pipetas graduadas 10mL

probeta graduada 100mL

bureta 25mL

beaker 250mL

equipo de titulación, balanza analítica, Potenciómetro, soporte universal, Embudos, espectrofotómetro, celdas espectrofotométricas, muestras de suelo, agitador de vidrio, papel filtro, espátula metálica

1.2 Reactivos a utilizar

Reactivo Fórmula Concentración

Ácido sulfúrico H2SO4 Concentrado

Dicromato de potasio K2Cr2O7 1N

Ácido fosfórico H3PO4

Difenilamina C12H11N

Sulfato ferroso FeSO4 1N

Hidróxido de sodio NaOH 0,1N

Acido clorhídrico HCl 0,1N

Fenolftaleína, agua destilada, solución buffer fosfato

1.3 Procedimiento

1.3.1.En campo:

Tomar las muestras de suelo, secarlas y realizar el proceso de tamizado con el tamiz de 2 mm.

1.3.2 En Laboratorio

Carbono Orgánico, por titulación volumétrica: adición de K2Cr2O7, H2SO4, filtración, adición de H3PO4, C12H11N, FeSO4, titulación, registro de volúmenes usados.

Carbono Espectrofotométrico, calibrar el espectrofotómetro, ajustando la Absorbancia, posteriormente colocar el filtrado anterior en la celda espectrofotométrica, y leer la absorbancia a la longitud de onda registrando los valores obtenidos en la tabla de datos.

Capacidad amortiguadora Método Potenciométrico, rotular cuatro beakers, y adicionar muestra de suelo a cada uno, y los reactivos establecidos para cada caso midiendo el pH y por ultimo registrarlos en la tabla de datos.

1.3.3.Diagrama de Flujo

4. Tabla de datos

• Determinación de carbono orgánico método volumétrico y espectrofotométrico

Muestras Peso (Wm) V FeSO4 (ml) Absorbancia (A)

M1

M2

Blanco (B)

• Capacidad amortiguadora de suelo

Muestras Peso (Wm) Volumen (ml) pH1 pH2

Suelo 1

Suelo 2

Agua destilada

Solución buffer

3. Resultados esperados:

• El cambio de color de la solución antes de titular con difenilamina que debe ser de color pardo amarillento o oscuro, al comenzar la titulación debe pasar a azul oscuro, y el punto final se caracteriza por un color verde intenso.

• Los valores de longitud de onda (λ) debe estar entre los siguientes rangos 590 nm y 650 nm en un tiempo de reacción: entre 3 y 24 horas

• Los pH deben estar entre los siguientes criterios de evaluación de un suelo con respecto a su pH (NOM-021- REC-NAT-2000):

Fuertemente ácido: 5.0

Moderadamente ácido: 5,1-6,5

Neutro: 6,6-7,3

Medianamente alcalino: 7,4-8,5

Fuertemente alcalino: 8,5

Glosario:

• MATERIA ORGANICA: en los suelos se produce por la descomposición química de las excreciones de animales y microorganismos, de residuos de plantas o por la degradación de cualquiera de ellos tras su muerte. En general, la materia orgánica se clasifica en compuestos húmicos y no húmicos.

• pH: es una medida de acidez o alcalinidad de una disolución acuosa

• CAPACIDAD

...