PRUEBA CRUZADA MENOR

6.- PRUEBACRUZADA MENOR

6.1.- OBJETIVO.

Describe el procedimiento estandarizado para determinar la compatibilidad entre el hemocomponente del dador y los glóbulos rojos del receptor, para detectar anticuerpos irregulares presentes en los eritrocitos del receptor que vayan en contra del suero del donante. Para seleccionar hemocomponentes (PFC, PF, CP, Cpp) que no afecten al receptor y tenga una sobrevida postranfusional aceptable.

6.2.- ALCANCE

Determina la compatibilidad y la búsqueda de anticuerpos antieritrocitos en el suero del dador, que reaccionen con los antígenos de los eritrocitos del receptor. A pacientes internos y externos que requieran ser transfundidos hemocomponentes. 

6.3.- FASE I (PRUEBA SALINA RÁPIDA) Detecta la incompatibilidad  ABO

6.3.1.- FUNDAMENTO DEL MÉTODO

Se basa en una reacción inmunológica de aglutinación antígeno-anticuerpo, que identifica anticuerpos antieritrocitos activos  presentes en el plasma del donante, que reaccione con antígenos del eritrocito del receptor.

6.3.2.- PROCEDIMIENTO

1. Antes de iniciar el procedimiento de las pruebas pretransfusionales, el personal debe vestir la ropa de protección individual (EPI) y cumplir con las normas de Bioseguridad.
2. Confirmar o verificar que la muestra sanguínea, coincida con la solitud         de transfusión, llevando la misma identificación.
3. Centrifugar, la muestra de sangre del receptor con o sin anticoagulante, por 2 a 5 minutos a 3500 rpm, para obtener eritrocitos y plasma o suero.
4. Colocar en tubos de hemólisis, por separado, eritrocitos y plasma o suero del receptor. Bien identificado con sus iníciales y más letra R.
5.  Lavar los eritrocitos  del receptor con solución salina a 3500 rpm durante 3 a 5 minutos, tres veces, para obtener una suspensión del botón de eritrocitos al 2% en solución salina (color jugo de tomate).
6. Identificar tubos de hemolisis, para cada muestra de unidad (hemocomponente) del donante a cruzar con la suspensión de glóbulos rojos del receptor, además de las iníciales del receptor.
7. Corte un segmento de la tubuladura de la unidad del hemocomponente a transfundir (PFC, CP, Cpp) y transfiera al tubo identificado con letra D (donante).
8. Colocar 100 ul (2 gotas) del suero o plasma del donante a cada tubo.
9. Agregar 50 ul (1gota) de la suspensión de los eritrocitos al 2% del receptor a cada tubo que correspondiente.
10. Mezclar  suavemente y centrifugar de 10 a 15 segundos a 3500 rpm.
11. Desprender con movimientos suaves, el botón de células y observar la presencia de aglutinación o hemólisis utilizando el fluroscopio.
12. Leer y observar la presencia de hemolisis y/o aglutinación y registrar los resultados en cruces. Si es negativo continuar con la prueba con albúmina.

6.4.- VERIFICACIÓN DE RESULTADOS.

Autotestigo.- En un tubo de hemólisis identificar como autotestigo. Colocar 2 gotas o 100 ul de suero del receptor y agregar 1 gota o 50 ul de eritrocitos lavados suspendidos al 2% del mismo receptor. Mezclar suavemente y centrifugar por 10 a 15 segundos a 3500 rpm. Desprender con movimientos suaves, el botón de células y observar la presencia de aglutinación o hemólisis. Así se confirma que las pruebas de compatibilidad están bien realizadas, cuando en la prueba de autotestigo no hay hemólisis o aglutinación.

6.5.- INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

6.6.- CONTROLES

Controles a tomar muy en cuenta:

1. Ser sumamente cuidadoso (a) en la numeración e identificación de muestras y tubos de hemólisis.
2. Utilizar tubos de ensayo y hemólisis de vidrio limpio y estéril, para recoger las muestras de sangre.
3. Controlar la calidad de la solución fisiológica, que este transparente y claro.
4. Controlar las revoluciones y tiempo de la centrífuga.
5. Antes de empezar y al terminar la jornada laboral limpiar la mesa de trabajo.
6. Cumplir en todo momento con las normas de bioseguridad.

Nota.- PRUEBA SALINA RÁPIDA menor,  se deben realizar a todas las unidades de hemocomponentes (PFC, CP, Cpp) antes de su transfusión. Esta prueba debe  continuar su desarrollo con la FASE II y FASE III. A menos que exista urgencia en la transfusión.

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