Perfil lipídico

Universidad de Sonora

División de Ciencias Biológicas y de la Salud

Depto. de Ciencias Químico Biológicas

Laboratorio de Química Clínica II.

Práctica no. 1.

“Perfil lipídico”.

Grupo 1

Horario. 15:00 pm- 17:00 pm

Equipo

Hermosillo, Son. México 16 de Febrero del 2022

Objetivo.

El objetivo principal de esta práctica, es la determinación en suero de colesterol total, HDL- Colesterol y triglicéridos. E identificar el probable riesgo en un paciente.

Introducción.

El perfil lipídico es un examen de laboratorio requerido por el doctor que tiene como fin revisar los valores clásicos de los lípidos, o sea, de LDL, HDL, VLDL, triglicéridos y colesterol total, que una vez que se hallan fuera de sus parámetros típicos representan un peligro enorme para el desarrollo de patologías cardiovasculares, como angina, infarto, ACV o trombosis venosa, ejemplificando.

El perfil lipídico se solicita con el propósito de detectar el peligro de estas patologías y contribuir a orientar el procedimiento para cada individuo, a fin de evitar complicaciones de salud. El ayuno de 12 horas es indicado según la historia clínica del individuo.

Fundamento

Determinación de colesterol total

El colesterol se determina por acción enzima colesterol éster hidrolasa y colesterol oxidasa. La primera libera el colesterol de ésteres de colesterol, y la segunda oxida el colesterol libre produciéndose peróxido de hidrógeno, el cual en presencia de la enzima peroxidasa reacciona con el sistema cromogénico dando origen a un compuesto coloreado.

Materiales

Tubos de ensayo

Pipetas automáticas

Espectrofotómetro

Suero Estándar de colesterol (200 mg/dl)

Reactivo de trabajo para el colesterol

Reactivo precipitante

Estándar de triglicéridos (200 mg/dl)

Reactivo de trabajo para triglicéridos

Procedimiento

Determinación de colesterol total

Marcar 3 tubos de ensayo (Blanco, Estándar y Muestra).

Primero tenemos que agregar la muestra en el tubo “Muestra”.

Cambiamos de punta al finalizar, para agregar el reactivo estándar en su tubo de ensayo.

Tomamos una punta azul y agregamos 1000 μl de colesterol a cada tubo.

Esperar 10 min a 37 grados Celsius y agitar un poco los tubos.

Posteriormente utilizar el espectrofotómetro y calibrar en absorbancia.

Introducir línea base que sería el tubo de ensayo “Blanco”.

Blanco

Standard

Muestra

H2O Destilada

10 μl

Standard

10 μl

Muestra

10 μl

Reactivo

1000 μl

1000 μl

1000 μl

Incubar 5 min x 37 grados Celsius

Determinación de triglicéridos

Marcar 3 tubos de ensayo (Blanco, Standard y Muestra).

Tomamos una pipeta de 10 μl, colocamos una punta amarilla.

Tomamos 10 μl del suero del paciente y lo agregamos al tubo de ensayo “Muestra”.

Tomar 10 μl de reactivo standard de triglicéridos y agregar al tubo de ensayo “Standard”

Tomar pipeta de 1000 μl y agregar a los 3 tubos de ensayo 1000 μl

Esperar 10 min a temperatura ambiente o 5 min a 37 grados Celsius

Blanco

M

St.

H2O Destilada

10 μl

-

-

St.

-

10 μl

-

Muestra

-

-

10 μl

Reactivo

HDL

Standard

Muestra

St.

6 μl

-

Muestra (Suero)

-

6 μl

Reactivo 1

600 μl

600 μl

Incubar (5 min x 37 grados Celsius)

Reactivo 2

200 μl

200 μl

LDL

Standard

Muestra

St.

6 μl

-

Muestra (Suero)

-

6 μl

Reactivo 1

600 μl

600 μl

Incubar (5 min x 37 grados Celsius)

Reactivo 2

200 μl

200 μl

Resultados

Para realizar los cálculos para el perfil lipídico se necesita esta fórmula:

mg/dl = A(muestra)/ A(estándar) x Conc. estándar

Concentración estándar del colesterol: 200 mg/dL

Colesterol Total

Cotal=(Abs Mue/ Abs St)* 200mg/dL

Abs. Muestra= 0.461. Ctotal: (0.461)/(0.182) *200 mg/dL = 506.59 mg/dL

Abs. Standard= 0.182

Triglicéridos

TG=(Abs. Mue/ Abs. St)* 200mg/dL

Abs. Muestra= 0.026. TG: (0.026)/ (0.182) * 200 mg/dL= 28.571 mg/dL

Abs. Standard= 0.182

HDL

C(HDL)=A2/A1 *40 mg/DL

A1=578 nm

A2= 578 nm C(HDL)= (0.157/ 0.038)* 40mg/dL= 165.26mg/dL

Standard HDL=0.038.

Muestra HDL= 0.157

Con. HDL= 137 mg/dL

LDL

LDL c= CT-(HDLc+TG/5)

Standard LDL= 0.014

Muestra LDL= 0.195 LDLc= 506.59-(165.26+28.571/5)= 335.643 mg/dL

Con. LDL= 48 mg/dL

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