Practica 2. Comprobando la ecuación de diseño para un reactor enzimático por lotes

INSTITUTO TECNOLÓGICO DE ZACATEPEC[pic 1][pic 2]

DEPARTAMENTO DE QUÍMICA Y BIOQUÍMICA INGENIERÍA BIOQUÍMICA

INGENIERÍA DE BIORREACTORES

PRACTICA 2. COMPROBANDO LA ECUACIÓN DE DISEÑO PARA UN REACTOR ENZIMÁTICO POR LOTES

EQUIPO

ALONSO MALPICA OSCAR                19091525 CAPISTRÁN BAHENA JORGE…        18090419

LÓPEZ GARCÍA CITLALI ABIGAIL.        19090569

DOCENTE: FRANCISCO JAVIER HERNANDEZ CAMPOS

FECHA:30/NOVIEMBRE /

ÍNDICE

RESUMEN        3

MARCO TEÓRICO        4

OBJETIVO GENERAL        5

OBJETIVOS ESPECÍFICOS        5

MATERIALES Y MÉTODOS        6

Reactivo de DNS        7

Solución Amortiguadora de Fosfatos pH         8

Solución de glucosa        8

Solución de enzima        9

OBTENCIÓN DE LA CURVA ESTÁNDAR DE GLUCOSA        9

DETERMINACIÓN DE PARÁMETROS CINÉTICOS        10

RESULTADOS        13

DISCUSIÓN        16

CONCLUSIONES        17

BIBLIOGRAFÍA        17

RESUMEN

Lo que se realizó en la práctica fue el procedimiento que se tuvo para preparar varias soluciones que se utilizaron en un experimento para determinar parámetros cinéticos de la enzima invertasa. Se inició con la preparación del reactivo DNS, la solución amortiguadora de fosfatos a pH 7, las soluciones de sacarosa y glucosa a diferentes concentraciones, y la solución de la enzima invertasa.

Posteriormente debemos obtener una curva estándar de glucosa midiendo la absorbancia de soluciones con concentraciones conocidas de glucosa después de añadir el reactivo DNS. Con los datos de absorbancia vs concentración se grafica una recta para obtener la ecuación que relaciona estas variables.

Por último, se describieron los pasos para determinar los parámetros cinéticos KM y rmax de la enzima con dos concentraciones diferentes de sustrato (sacarosa 50 g/L y 200 g/L). Esto involucra medir la concentración de producto (glucosa) formado luego de 5 minutos de reacción con la enzima y calcular la velocidad inicial. Los datos de velocidad inicial y concentración de sustrato se linearizan de 3 formas distintas para obtener KM y rmax. De esta forma y finalmente se compararon los parámetros

cinéticos obtenidos con las dos concentraciones de sustrato para analizar el efecto de la concentración de sustrato sobre la cinética enzimática.

MARCO TEÓRICO

La cinética enzimática se refiere al estudio de las velocidades de las reacciones catalizadas por enzimas y las interacciones entre las enzimas y sus sustratos. Una de las teorías fundamentales en este campo es la ecuación de Michaelis-Menten, que describe la relación entre la velocidad de una reacción enzimática y la concentración del sustrato. Esta ecuación es de vital importancia para comprender cómo funcionan las enzimas y cómo pueden ser reguladas.

Las enzimas enzimas son catalizadores biológicos de naturaleza proteica, que poseen una alta especificidad a su sustrato. Debido a que su actividad catalítica depende de su estructura la velocidad de consumo de ese sustrato (-rs) o de formación del producto (rP) depende de la temperatura, el pH, la concentración del sustrato, la concentración de la enzima, presencia de inhibidores, etc. La ecuación de Michaelis-Menten nos permite evaluar el comportamiento cinético de las enzimas para una temperatura y pH constantes. (GRANADOS MORENO., 2014)

La Ecuación de Michaelis-Menten

La ecuación de Michaelis-Menten es una herramienta fundamental para describir la cinética de las reacciones enzimáticas. La ecuación se expresa de la siguiente manera:

[pic 3]

OBJETIVO GENERAL

Aplicar una ecuación de diseño de un reactor enzimático por lotes para estimar el tiempo de reacción en un sistema que involucra la enzima invertasa y sacarosa.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

• Evaluar los parámetros cinéticos de la ecuación de Michaelis-Menten.
• Calcular la concentración final residual para obtener la velocidad de reacción.
• Calcular los valores de Km y rmax para la sacarosa y glucosa por las 3 diferentes linealizaciones.
• Obtener una ecuación de diseño para el reactor enzimático por lotes.
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MATERIALES Y MÉTODOS

EQUIPOS ,REACTIVOS Y MATERIALES

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