LA CUANTIFICACIÓN DEL TOTAL DE FENOLES Y FLAVONOIDES CONTENIDOS, Y LA ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA DE DIOCLEA REFLEXA

LA CUANTIFICACIÓN DEL TOTAL DE FENOLES Y FLAVONOIDES CONTENIDOS, Y LA ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA DE DIOCLEA REFLEXA

Resumen: Tamizaje fitoquímico de los extractos revelaron presencia de terpenos sólo en el extracto de n-hexano mientras que los flavonoides, los esteroides y terpenoides estaban presentes en el extracto metanólico. Alcaloides, saponinas y glicósidos de antraquinona estaban ausentes en todos los extractos. El extracto metanólico era activo contra K. pneumoniae y P. aeruginosa, e inactivos frente a E. coli, P. vulgaris y S. aureus. El total de fenoles contenido obtenido fue de 41,58 ± 0,15 mg de extracto de ácido gálico equivalente / g, mientras que el contenido total de flavonoides era 29.82 ± 0.31 quercetina equivalente / g de extracto.

Palabras clave: reflexa Dioclea, fitoquímica, antibacteriano, fenólicos, flavonoides

Introducción

Durante años, algunas plantas se han utilizado tradicionalmente para el tratamiento de enfermedades y dolencias. Estas plantas conocidas como plantas medicinales se han demostrado que poseen componentes químicos que exhiben terapéutico propiedades. Hay un creciente interés en el estudio de las plantas medicinales que poseen propiedades antioxidantes. Estas antioxidantes naturales han demostrado ser eficaces en la inhibición de la oxidación de los alimentos, la reducción de la edad de enfermedades relacionadas,  y tienen la capacidad de aumentar la capacidad antioxidante del plasma reduciendo así la riesgo de contraer cáncer y enfermedades relacionados con el corazón. Estos antioxidantes actuar como captadores de radicales libres que pueden eliminar los radicales libres y especies reactivas de oxígeno que se forman durante los procesos fisiológicos normales de ese modo la prevención de daño celular.

Reflexa Dioclea es un escaladora leñosa. Se encuentra en Nigeria y otros países de África occidental como Senegal. La semilla de la planta es conocida por su sabor y aroma dulce. Tradicionalmente, se utiliza para el tratamiento de dolores e infecciones del tracto respiratorio. La mayoría del trabajo de investigación ha sido en la semilla de la planta. Ogundare y Olorunfemi (2007) informó de la eficacia antimicrobiana de las hojas. El objetivo de este estudio fue determinar la fitoquímicos presentes, evaluar el total de fenoles, flavonoides contenidos y para examinar la actividad antibacteriana del extracto de hoja de metanol de Dioclea reflexa.

Materiales y métodos

El ácido gálico y quercetina se obtuvieron de Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, EE.UU.). Etanol, metanol, hexano, hidróxido de sodio, carbonato de sodio, hidróxido de aluminio, el reactivo de Folin-Ciocalteu y nitrito de sodio se obtuvieron de E. Merck (Darmstadt, Alemania). Genesys 10S VL. 200 espectrofotómetro 2l7H311008 se utilizó para las mediciones de absorbancia.

El material vegetal y la extracción

Hojas de plantas frescas se obtuvieron de Kaba, el estado de Kogi, Nigeria. Estos fueron llevados al Departamento de Ciencias Biológicas de la Universidad de Landmark para su identificación. Las hojas se pulverizaron en un polvo fino y almacenado en un recipiente. se extrajo 500 g de las hojas pulverizadas usando un extractor Soxhlet utilizando disolventes de diferentes polaridades (n-hexano y metanol). Los extractos se concentraron a presión reducida para dar el extracto crudo.

Tamizaje fitoquímico

Los extractos n-hexano y metanólicos se examinaron para la presencia o ausencia de fitoquímico componentes utilizando el método descrito por Tona et al., 199810. Placas de TLC de gel de sílice Merck Recubierta eran manchadas de cada extracto y desarrollado utilizando ácido-agua n-butanol-ácido acético (4: 1: 5) mezcla de disolventes. Las manchas a continuación, se visualizaron con una solución de 1% AlCl3 en metanol y se observa bajo la lámpara de UV a 366 nm. Por la detección de esteroides y terpenos en los extractos, la mezcla de disolventes n-hexano: diclorometano en la relación 1: 9 se utilizó para desarrollar el cromatograma, mientras que las manchas se identificaron utilizando el reactivo Libermann-Burchard después de calentar las placas durante 10 minutos. a 100oC. El método descrito por Harborne, 198 111 se usó para la detección de  taninos utilizando FeCl3 mientras que se utilizó reactivo s Dragendorf "para la identificación de alcaloides. Formación de espuma era utilizada para probar la presencia de saponinas mientras que se utilizó reactivo Molisch "s para identificar la presencia de glicósidos. Ensayo antibacteriano

Los organismos de ensayo

Se utilizaron cultivos puros de E. coli, K. pneumoniae, S. aureus, P. vulgaris y P. aeruginosa para la ensayo antibacteriano. Preparación del medio de medio de agar de nutrientes se preparó disolviendo 28 g de agar nutriente en 1000 ml de agua destilada. El medio se esterilizó en una autoclave a 121 ° C durante 15 minutos. Se enfrió a 45 ° C y se vertió en placas de Petri estériles que se solidifique. 5 mm de tamaño se utilizó barrena para perforar las placas solidificadas que se utilizaron para el ensayo antibacteriano.

Preparación de muestras de ensayo

10 mg cada uno de los extractos se disolvieron en 10 ml de cada destilarse disolvente (n-hexano, metanol). La  actividad de la estreptomicina, un antibiótico estándar también se determinó utilizado como control positivo; 10,0 mg de la misma se disuelto en 10 ml de agua destila. Destilar agua y disolventes bidestilada se utilizaron como control negativo.

Método

 Método de difusión en disco de Bauer-Kirby et al., (1966) fue empleado. Esto implicó el uso de papel de filtro disco como portador para los agentes antibacterianos. Esterilizados discos cortados de Whatman no. 1 papel de filtro eran impregnados con soluciones de los agentes antibacterianos en diferentes concentraciones (1,0 mg / ml, 2,0 mg / ml). El disolvente se evaporó y el disco se seca adecuadamente. El medio de agar nutriente se inoculó con la prueba, el organismo y el disco impregnado colocado sobre la superficie del agar nutriente. El agente antibacteriano sobre en contacto con el agar difundido en todas las direcciones. La capacidad del organismo de prueba para crecer o no en presencia de la muestra de ensayo se determinó a continuación, dentro de las 24 horas mediante la medición de las zonas de inhibición. Las placas se incubaron a 37oC revés. Disolventes redestilado se utilizaron como control. Todas las pruebas se realizaron por cuadruplicado y la actividad antibacteriana se expresó como una media de los diámetros de inhibición (mm) producido por la hoja de extraer y la estreptomicina utiliza como el estándar.

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