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PRACTICA 1 DE INMUNOLOGIA.


Enviado por   •  23 de Septiembre de 2016  •  Apuntes  •  823 Palabras (4 Páginas)  •  222 Visitas

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UNIVERSIDAD GUADALAJARA LAMAR

INMUNOLOGÍA

Práctica No. 2      Título: Recuento leucocitario y viabilidad celular

MARIAJOSE NUÑO MENDOZA

Nombre ________________________________________   Grupo ____3B___

INTRODUCCIÓN.

El recuento leucocitario representa el número de leucocitos en un litro de sangre completa. La cuantificación o recuento de leucocitos es muy importante para el diagnóstico de enfermedades.

OBJETIVO

  • Cuantificar los leucocitos por milímetro cúbico de sangre a través de la lectura de la cámara de Neubauer.

MATERIAL

MATERIAL/EQUIPO

CANTIDAD

REACTIVO

CANTIDAD

Pipeta de Thoma para glóbulos blancos (perla blanca)

Equipo para venopuncion

Boquilla blanca

Tubo de goma con EDTA

Tubos de ensayo

Papel parafilm

Cámara de Neubauer

Cubrehematimetro

Microscopios

Gasas

5

5

5

5

10

1 rollo

5

5

5

1 paq

Alcohol al 70%  

Liquido de Turk o ácido ácetico 2 -3%

Cloro / detergente

1 Lt

1 Lt

1 pizeta

PROCEDIMIENTO:

Recuento leucocitario

  1. Una vez seleccionada, desinfecta la zona del brazo con alcohol al 70%, y practica la punción venosa. Recoge la sangre en un tubo con EDTA.
  2. Coloca el tubo de plástico y la boquilla para aspirar en la pipeta
  3. Llena la pipeta de glóbulos blancos con sangre hasta la marca 0.5 para realizar una dilución de 1/20. Limpia la punta con gasa o papel absorbente. Si la sangre se pasa de la marca, se puede absorber con gasa el excedente.
  4. Introduce la pipeta en el tubo o frasquito que contiene el diluyente (liquido de Turk) y absorbe hasta la marca 11, no deben quedar burbujas.
  5. Tapa ambos extremos de la pipeta con papel parafilm y colocala en un rotador automático o se hazla rotar manualmente de 2-3 minutos.
  6. Monta la laminilla de vidrio en la cámara para recuento. Debe estar limpia y seca.
  7. Destapa la pipeta y descarta 3 a 4 gotas del tallo, luego coloca una gota pequeña cerca de un extremo de la cámara para que por capilaridad se llene exactamente.
  8. Deja 3 minutos para que los leucocitos se sedimenten.
  9. Coloca en la platina del microscopio y enfoca la cuadricula a 10x. y cuenta en los 4 cuadrados angulares.
  10. En el recuento se incluyen las células que cubren o tocan por dentro o por fuera las líneas limitantes superior e izquierda en el cuadro pequeño de recuento y no se consideran los que estén en los límites inferior y derecho.

Viabilidad celular

  1. Coloca 0.5 ml de sangre completa en un tubo de ensayo a agrega 9.5 ml de solución de acido acético, para realizar una dilución de 1/20.
  2. Sitúa una alícuota de 10 μL de la suspensión celular en un tubo de ensayo y adiciona 10 μL del colorante azul de tripano.
  3. Toma 10 μL con la pipeta y llena una cámara hemocitométrica de Neubauer.
  4. Realiza el conteo con ayuda del microscopio.

RESULTADOS.

(Dibuja lo observado en el microscopio o inserta la foto capturada con el celular).

[pic 1]

CUESTIONARIO:

  • Cuáles son los valores normales de leucocitos de un hemograma?

Niveles normales: 4.500.000-5.900.000 /ml en varones
                          4.000.000-5.200.000/ml en mujeres

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