Banco De Sangre

Objetivo de la práctica

Establecer y describir las técnicas de laboratorio para realizar control de calidad de células y antisueros.

Preguntas problemas

• ¿Cuáles son las técnicas de laboratorio para realizar control de calidad de células y antisueros?

• ¿Cómo se realizan las técnicas de laboratorio para realizar control de calidad de células y antisueros?

• ¿Que nos indica cada una de las técnicas de laboratorio para realiza?

Marco teórico

Las células a las que se hace referencias aquí son los glóbulos rojos, los cuales se obtuvieron al mezclar una pequeña cantidad de sangre con solución salina al 0,85% (isotónica) en un tubo de ensayo, centrifugar por 45 segundos en la Serofuge, descartar el sobrenadante y se repite el mismo procedimiento dos veces, pero se centrifugan por 45 segundos y 1 minuto respectivamente, posteriormente se descarta el sobrenadante, se depositan las células del fondo en otro tubo, y se le adiciona solución salina al 0,85%, hasta alcanzar un tono de color rojo sandia. Dicho proceso de lavado removió todos los componentes de la sangre diferentes a los glóbulos rojos. Y los antisueros son suero sanguíneo que contiene anticuerpos.

En inmunohematológia la reacción antígeno-anticuerpo es de vital importancia para la clasificación de grupos sanguíneos, el diagnostico de ciertas enfermedades, entre otras, debido a su gran especificidad y sensibilidad.

Los antisueros están sujetos a variaciones biológicas, debido a que pueden ser de origen humano, animal o vegetal. Por ende es de gran importancia que se le dé un buen cuidado y uso a los antisueros, someterlo a las técnicas de control de calidad, un óptimo almacenamiento.

Los antisueros vienen de su casa comercial con unas indicaciones las cuales deben ser seguidas sin variaciones. Esto incluye fecha de caducidad, que por lo general es de un año. A cada antisuero se le deberá comprobar su especificidad y título.

A las células se les debe comprobar su especificidad, determinado a presencia de los antígenos de la superficie de los glóbulos rojos al reaccionar con antisueros específicos.

La especificidad de las células se comprueba de depositando en tubos de ensayo limpios y secos, 1 gota de las células problema por cada 2 gotas de antisueros de especificidad conocida que haya sido tratado bajo sus condiciones óptimas de almacenamiento y uso, posteriormente se centrifuga en la Serofuge por 15 segundos, y le leerá los tubos por número de cruces, los anticuerpos se unirán a los eritrocitos que tengan el antígeno con el que compartan sus características conformacionales y las mismas proteínas, en esta reacción antígeno-anticuerpo se distinguen dos fases, la primera consiste en la unión del antígeno con el anticuerpo y la segunda en las manifestaciones que resultan de dicha unión, la aglutinación. La especificidad de los antisueros se comprueba de forma similar, pero en estos se agregar en todos los tubos de ensayos limpios y secos, 2 gotas del antisuero problema que haya sido tratado bajo sus condiciones óptimas de almacenamiento y uso, y una gota de células reactivas (son las células suspendidas pero su especificidad ya es conocida), posteriormente se centrifuga en la Serofuge por 15 segundos, y le leerá los tubos por número de cruces, los anticuerpos del antisuero solo se unirán a los eritrocitos que tengan el antígeno con el que compartan sus características conformacionales y las mismas proteínas, en esta reacción antígeno-anticuerpo se distinguen las mismas fases ya mencionadas.

En resumen en la especificidad de las células, se buscara determinar que antígenos tiene estas en su superficie, y en la especificidad de los antisueros se buscara comprobar contra que antígenos de la superficie eritrocitaria reaccionan, que va determinado por los anticuerpos contenidos en este.

En la titulación de los antisueros, se mide la potencia del anticuerpo en el reactivo, y va determinada por la avidez, que es la velocidad con la que el anticuerpo aglutina cuando se une a un antígeno. En esta técnica se realizan unas diluciones seriadas de 1/2 a 1/512, utilizando un volumen de antisuero y el diluyente adecuado al tipo de anticuerpo contenido en el antisuero, si es tipo inmunoglobulina G se utiliza albumina, debido a que como solo posee dos sitios de unión necesita de otra sustancias que les ayude a potencializar su interacción con el antígeno, y si es de tipo inmunoglobulina M se utiliza solución salina, ya que al poseer diez sitios de unión al antígeno no necesita de un ayudante para su interacción con el antígeno. La temperatura también se debe tener encuentra durante la realización de la técnica, ya que los antisueros que tengan anticuerpos de tipo inmunoglobulina G, son óptimamente activos a temperatura de 37°C (anticuerpos calientes) y los tipo inmunoglobulina M a temperaturas inferiores a la temperatura ambiente (anticuerpos fríos). Posteriormente se les agrega una gota de las células reactivas, en caso de trabajar con anticuerpos tipo inmunoglobulinas G, se deberán incubar, y se esperan 30 minutos para después centrifugar por 15 segundos en la Serofuge y leer por número de cruces desde el tubo con mayor dilución (1/512) hasta el de menor dilución (1/2), el titulo será aquella dilución en donde primero haya dado dos cruces (2+).

La titulación de los antisueros se hace con el fin de determinar su potencia al reaccionar con el antígeno, estos tiene unos valores de referencia, si se está por debajo de estos valores, es indicio de que los anticuerpos han perdido potencia, que podría ser por su constante uso, por acercarse a su fecha de vencimiento, malas condiciones de uso y almacenamiento, si está por encima de estos valores de referencia nos indica que el anticuerpo tiene mucha potencia y que se encuentra en óptimas condiciones de uso.

Taller control de calidad de células y antisuero

1. Con sus palabras mencione: ¿Para qué es importante el control de calidad de las células y los antisueros?

Es importante porque nos permite corroborar si los antisueros cumplen con las especificaciones (especificidad y potencia) necesarias para su aceptación y uso, para poder realizar los procedimientos de laboratorio y poder emitir así resultados exactos y confiables. Con respecto a las células, se comprueba su especificada, lo que permite su uso adecuado.

2. ¿Qué pasaría si se realiza un mal control de calidad de los antisueros? Mencione 3 ejemplos.

No se comprobaría con exactitud la especificidad y

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