Carotenoides

TRABAJO 1: ESTUDIO DEL EFECTO DE LAS CONDICIONES DE ELUCIÓN EN SEPARACIÓN DE PIGMENTOS VEGETALES POR CROMATOGRAFÍA EN PAPEL.

PRESENTADO POR:

SANDRA PAOLA GOMEZ 2141

MARÍA FERNANDA MERCADO 2140189

SHEILA BRIDGET BELTRÁN 2141

PRESENTADO A:

JAIRO RENÉ MARTÍNEZ

ESTADÍSTICA PARA QUÍMICOS

UNIVERSIDAD INDUSTRIAL DE SANTANDER

FACULTAD DE CIENCIAS

ESCUELA DE QUÍMICA

BUCARAMANGA, SANTANDER

2015

INTRODUCCIÓN

En esta práctica se estudiará el efecto de las condiciones de elución sobre el factor de retención con la técnica de cromatografía en papel, la cual es una técnica que permite separar los distintos componentes de una mezcla facilitando su identificación y cuantificación.

En ésta técnica el fenómeno de separación ocurre al hacer pasar una fase móvil fluida  que en este caso será una disolución apolar  de heptano, metanol y  agua con almidón, que arrastra a la mezcla (pigmentos de zanahoria), a través de una fase estacionaria que está constituida por una tira de papel filtro; Se realizarán cinco replicas por cada variable de almidón dulce, agrio y agridulce. En éste proceso los componentes de la mezcla interaccionan de diversa forma  con la fase estacionaria, atravesando a ésta a distintas velocidades, por lo cual se van separando. Los pigmentos más polares se retendrán más en la fase estacionaria, mientras que los más apolares avanzarán más rápido junto con la fase móvil.

En la cromatografía en papel lo que determina el grado de avance de un soluto es el factor de retención (Rf) que se calcula como el cociente entre la distancia recorrida por el soluto y la distancia recorrida por el solvente. Los factores de retención calculados serán los datos a observar  y con éstos se  realizará la prueba de Fisher  para conocer si posee efectos significativos, en caso de que sea así, se empleará la prueba Tukey  y  finalmente se determinará en cuales condiciones se produce la mejor separación.

SECCIÓN EXPERIMENTAL

Materiales

• Una zanahoria
• Un rayador
• Papel capa fina
• Capilares
• Tijeras, regla y lápiz

Reactivos

• Heptano
• Metanol
• Agua destilada
• 0,5 g de almidón agrio
• 0,5 g de almidón dulce
• 0,5 g de almidón agridulce

Procedimiento

1. Pelar y rayar la zanahoria, suficiente cantidad, para luego macerarla con un mortero o una cuchara y un pocillo, se puede agregar 10 gotas de metanol para aumentar el extracto; luego colar.
2. Se cortan aproximadamente 20 tiras de papel de 10x2 cm y en cada una trazar una línea de 1 cm como punto de referencia.
3. Se prepara el capilar cortándolo con un mechero, y dejando puntiagudo un extremo para luego tomar una mínima muestra del extracto metanolico de la zanahoria.
4. En un recipiente preparar la mezcla de solvente 4 mL heptano, 2mLmetanol y 1mL agua (4:2:1), teniendo en cuenta disolver primero el almidón con el agua y luego las otras sustancias.
5. Para analizar mejor la separación de los pigmentos, es necesario sobre el punto de referencia marcar una gota de extracto con el capilar 10 veces, permitiendo secar en cada intervalo.
6. Como se realizarán cinco replicas para cada tipo de solvente, variando el almidón (agrio, dulce, agridulce), para el primer montaje tomamos 5 tiras ya preparadas con el extracto concentrado y sumergirlo en el solvente, sin que éste supere el punto de referencia. Realizar el mismo procedimiento con los otros almidones.
7. Hallar el factor de retención y hacer los debidos cálculos para emplear la prueba de Fisher y si es necesario la de Tukey.

ANÁLISIS DE RESULTADOS

Al momento de que la fase móvil de heptano, metanol y  agua con almidón arrastrara la mezcla de pigmentos de zanahoria, la velocidad alcanzada hasta la fase estacionaria fue muy eficiente en los tres tratamientos, ya que sus desplazamientos duraron entre 30 y 35 segundos. Pero observamos que el que logró el alcance en menor tiempo fue el solvente que contenía almidón agridulce y el que mayor tiempo fue el de almidón agrio.

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