Cinética enzimática

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1. INTRODUCCIÓN

Las triplesulfas presentan buena absorción (70 a 100%) cuando se administran por vía parenteral, el intestino delgado es el sitio principal donde ocurre este proceso, pero parte del medicamento puede hacerlo en el estómago. Por tratarse de fármacos de acción intermedia y corta, se distribuyen en distintos órganos con rapidez, alcanzando concentraciones terapéuticas en plasma, líquido cefalorraquídeo, sinovial y peritoneal. Ello está en relación con la fijación a las proteínas plasmáticas y su liposolubilidad.  La sulfadiazina penetra en el líquido cefalorraquídeo y en general las sulfonamidas pueden ser absorbidas y alcanzar niveles sanguíneos detectables, ya que se metabolizan parcialmente a nivel hepático por acetilación aunque también por glucuronoconjugación y oxidación. En una alta proporción se eliminan por la orina (principalmente por filtración glomerular), ya sea sin ser metabolizadas o como metabolitos inactivos y en pequeñas cantidades son eliminadas por las heces y bilis. La 3Sulfas® se excretan en la orina en forma inalterada hasta un 30 – 44% y un 15 – 40% como metabolito acetilado[1].

Una alta unión a proteínas incrementa marcadamente la semivida de la misma, sin embargo, la no ionizada y no unida a proteínas es la sulfamida farmacológicamente activa, la que es metabolizada y excretada.

1. MÉTODOS Y MATERIALES

Formación de grupos

Para la obtención de la concentración del fármaco en los distintos órganos y fluidos por diferentes vías de administración se utilizaron 2 ratas de la cepa Wistar de 279 g y 280 g.

Administración de fármacos

Se empleó la solución de 3 Sulfas® lote N° F-16161 de 100 ml  combinación de sulfametazina sódica (6.67 g), sulfadiazina sódica(6.67 g), sulfatiazol sódico (6.67 g) concentración [200 mg/ml] (200 mg/kg), el volumen administrado de fármaco se realizó por dos vías: intraperitoneal(IP) y por sondeo esofágico (SE), seguido de la administración de 2 ml de solución salina isotónica por vía IP. Posterior a la recolección de muestra de orina, se administró pentobarbital sódico [32 mg/ml] (32 mg/kg) por vía intraperitoneal.

Posología

Considerando las 2 ratas  y tomando en cuenta el peso de ambas, el volumen del fármaco administrado  3 Sulfas® para la rata 1 fue de 0.279 ml y para la rata 2 de 0.280 ml. Para administrar el pentobarbital sódico se requirió una sobredosis para lograr la muerte de ambas ratas.

3 Sulfas®

Metodología

Se administraron los volúmenes del fármaco de sulfonamidas establecidos en la posología en ambas ratas por vía IP y por SE con un volumen de 2 ml de SSI , para después llevarlas a las jaulas metabólicas y obtener 0.1 ml de muestra de orina de ambas ratas, al volumen obtenido se le adicionó 1.9 ml de H2O destilada en un vaso de precipitados, se tomó 1 ml de la dilución para adicionarle 1 ml de AcCl3 y 5 ml de H2O, luego de este proceso se llevó a cabo la filtración.  

Para la obtención de los tejidos y la sangre, se administró una sobredosis de pentobarbital sódico a las ratas por vía intraperitoneal, se procedió a la obtención de la muestra de sangre por punción cardiaca y para lograr aislar la masa de los tejidos se diseccionaron ambos sujetos experimentales, de esta forma se pesaron aproximadamente 1 g de corazón, riñón, músculo esquelético, músculo liso, corazón, cerebro e hígado, se llevó a maceración de los órganos en 10 ml de NaOH 0.1% y se tomó 2 ml del sobrenadante y se adicionó de 4 ml de AcCl3 y 4 ml de H2O, de igual manera se filtró la disolución hasta no observar turbidez alguna en el vial de recolección.

Teniendo las disoluciones filtradas y diluidas se empleó la técnica de Bratton- Marshall para poder leer las muestras en el espectrofotómetro, se tomaron 5 ml volumen de la muestra de cada filtrado y a cada uno se le adicionaron 1 ml de NaNO3, 1 ml de NH4OSO2NH2 y 1 ml de C12H14N2; la disolución formadas se transfirieron a las fotoceldas y se procedió a la lectura de las mismas.

1. RESULTADOS

A partir de la curva patrón de la concentración (tabla 1), se determinó por la ley de Ley de Lambert-Beer, la concentración de 3 Sulfas® en cada tejido con base al valor de  absorbancia presentados en la tabla 2.

Tabla1. Valores de la curva patrón

De acuerdo a la ley de Beer, la absorbancia está relacionada linealmente con la concentración de la especie absorbente y con la longitud de la trayectoria de la radiación con el medio absorbente. De esta forma la concentración queda expresada como:

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Donde A, el valor de absorbancia de la fotocelda; b, la ordenada al origen de la ecuación de la curva patrón; m, la pendiente. Para este caso la ecuación de la recta fue:

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Tabla 2. Valores de absorbancia de los tejidos y fluidos de las ratas administradas por vía IP y SE.

Obtenida la concentración, se consideró el factor de dilución de la muestra, para la sangre fue de 1:80 y orina 1:224, en el caso de los órganos este valor variaba con respecto a la masa de tejido macerado. Se obtuvieron los valores de concentración de Sulfas (tabla 3) y las observaciones por cada tejido.

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