Cromatografia

CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA

OBJETIVOS

• Conocer la técnica de cromatografía en capa fina, (ccf), sus características y los factores que en ella intervienen.

• Calcular valores de Rf de varias sustancias y correlacionarlo a la selección adecuada del eluyente y deducir la relación que existe entre la polaridad de las sustancias que se analizan y la de los eluyentes utilizados.

• Aplicar la técnica de cromatografía en capa fina como criterio de pureza e identificación de sustancias.

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MATERIALES SUMINISTRADOS POR EL LABORATORIO:

Placa cromatografica, cubeta cromatografica (frasco con volumen y altura suficiente), tubo capilar con diámetro menor a 1 mm.

MATERIALES QUE DEBE POSEER EL ESTUDIANTE:

Alcohol etílico, tinta china, bisturí, regla, blusa de laboratorio, gafas de seguridad.

INTRODUCCION

Concepto de cromatografía

La cromatografía se define como la separación de una mezcla de dos o más compuestos por distribución entre dos fases, una de las cuales es estacionaria y la otra una fase móvil. Varios tipos de cromatografía son posibles, dependiendo de la naturaleza de las dos fases involucradas: sólido-liquido (capa fina, papel o columna), liquido-líquido y gases-liquido (fase vapor).

Todas las técnicas cromatográficas dependen de la distribución de los componentes de la mezcla entre dos fases inmiscibles: una fase móvil, llamada también activa, que transporta las sustancias que se separan y que progresa en relación con la otra, denominada fase estacionaria. La fase móvil puede ser un líquido o un gas y la estacionaria puede ser un sólido o un líquido.

Todos los sólidos finamente pulverizados tiene el poder de absorber en mayor o menor grado otras sustancias sobre su superficie; y, similarmente, todas las sustancias pueden ser adsorbidas, unas con más facilidad que otras. Este fenómeno de adsorción selectiva es el principio fundamental de la cromatografía.

Cromatografía en capa fina:

En este caso se utiliza una placa recubierta con fase estacionaria manteniendo un pequeño espesor constante a lo largo de la placa. El eluyente ascenderá, por capilaridad, por la placa y arrastrará los componentes a lo largo de ésta produciendo "manchas" de los componentes.

En la cromatografía en capa fina (ccf), el grado de elución de las sustancias depende tanto de su propia polaridad como de la polaridad del eluyente utilizado. El adsorbente se coloca en forma de una capa delgada adherida sobre un soporte rígido, que pueden ser placas de vidrio, aluminio o poliéster. Los tamaños de la placa para ccf convencional son: 20 x 20; 10 x20 y 5x2 cm.

Hay adsorbentes que contienen un indicador de fluorescencia para facilitar la identificación de muestras. Si no se usa indicador y los componentes no son coloridos, se requerirán otras técnicas de revelado.

Factor de retención (Rf)

El factor de retención se define como el cociente entre la distancia recorrida del compuesto, tomada desde el centro de la mancha hasta la línea de aplicación, y la línea del eluyente tomada desde la misma línea de aplicación hasta la posición final del frente.

El valor de este factor para cualquier compuesto no puede ser mayor de 1 ni menor de 0.

Eluyentes más comunes para cromatografía en capa fina:

• éter de petróleo

• cloruro de metileno

• n-hexano

• acetato de etilo

• ciclohexano

• acetona

• tolueno

• iso-propanol

• dietil-éter

• etanol

• t-butil-éter

• metanol

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