Cromatografía Y Extracción De Pigmentos Vegetales.

Cromatografía y Extracción de Pigmentos vegetales.

Introducción

La clorofila es un pigmento de las plantas, que les proporciona su color verde y que absorbe la luz necesaria para la fotosíntesis. La clorofila absorbe principalmente luz violeta roja y azul y refleja luz verde. La abundancia de clorofila en hojas y su ocasional presencia en otros tejidos vegetales es la causa de que esas partes de las plantas aparezcan verdes, pero en algunas hojas la clorofila es enmascarada por otros pigmentos. La extracción y reconocimiento de estos pigmentos es interesante para el estudio y conocimiento de sus propiedades.

El color de un pigmento depende de la absorción selectiva de ciertas longitudes de onda de la luz y de la reflexión de otras. Constituyen el sustrato fisicoquímico donde se asienta el proceso fotosintético.

Revisión Bibliográfica

Cromatografía

La cromatografía es un método físico de separación para la caracterización de mezclas complejas, la cual tiene aplicación en todas las ramas de la ciencia. Es un conjunto de técnicas basadas en el principio de retención selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos componentes. Diferencias sutiles en el coeficiente de partición de los compuestos da como resultado una retención diferencial sobre la fase estacionaria y por tanto una separación efectiva en función de los tiempos de retención de cada componente de la mezcla.

La cromatografía puede cumplir dos funciones básicas que no se excluyen mutuamente:

• Separar los componentes de la mezcla, para obtenerlos más puros y que puedan ser usados posteriormente (etapa final de muchas síntesis).

• Medir la proporción de los componentes de la mezcla (finalidad analítica). En este caso, las cantidades de material empleadas son pequeñas.

Las distintas técnicas cromatografías se pueden dividir según cómo esté dispuesta la fase estacionaria:

Cromatografía plana. La fase estacionaria se sitúa sobre una placa plana o sobre un papel. Las principales técnicas son:

• Cromatografía en papel

• Cromatografía en capa fina

Cromatografía en columna. La fase estacionaria se sitúa dentro de una columna. Según el fluido empleado como fase móvil se distinguen:

• Cromatografía de líquidos

• Cromatografía de gases

• Cromatografía de fluidos supercríticos

La cromatografía de gases incluye a numerosos compuestos orgánicos. En el caso de compuestos no volátiles se recurre a procesos denominados de "derivación", a fin de convertirlos en otros compuestos que se volatilicen en las condiciones de análisis.

Tipos de Cromatografía:

Tipos Fase móvil Fase estacionaria

Cromatografía en papel

Líquido Papel de celulosa.

Cromatografía en capa fina

Líquido Gel de sílice o alúmina.

Cromatografía de gases

Gas Columnas capilares de sílice fundida, columnas empacadas con tierras diatomeas hechas de tubos de vidrio o metal.

Cromatografía líquida

en fase reversa

Líquido (polar) Empaques de siloxano de octilo o siloxano de octadecilo.

Cromatografía líquida

en fase normal

Líquido

(menos polar) Empaques de sílice, alúmina o un soporte al que se unen químicamente grupos polares (ciano, amino, etc).

Cromatografía líquida

de intercambio iónico

Líquido (polar) Resinas de intercambio iónico.

Cromatografía líquida

de exclusión

Líquido Empaques de pequeñas partículas de sílice o polímeros con red de poros uniforme.

Cromatografía líquida

de adsorción

Líquido Partículas finamente divididas de sílice o de alúmina.

Cromatografía de

fluidos supercríticos

Líquido Columnas abiertas de sílice fundida con recubrimientos internos de varios tipos de siloxanos enlazados y de enlaces cruzados.

Pigmentos:

Los diversos tipos de clorofilas existentes, se diferencian en pequeños detalles de su estructura molecular y que absorben longitudes de onda luminosas algo distinto. Por cromatografía se pueden separar cuatro clorofilas distintas:

• La clorofila A constituye de manera aproximada el75% de toda la clorofila de las plantas verdes, estando presente también en las algas verde azuladas y en células fotosintéticas más complejas.

• La clorofila B es un pigmento accesorio presente en vegetales y otras células fotosintéticas complejas; absorbe luz de una longitud de onda diferente y transfiere la energía

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