Determinación del Diagrama de Partición de Extracción Binaria

Determinación del Diagrama de Partición de Extracción Binaria a partir de: Purification of serine protease from mango (Mangifera Indica Cv. Chokanan) peel using an alcohol/salt aqueous two-phase system.
Mehrnoush Amid, Mustafa Shuhaimi, Md. Zaidul Islam Sarker, Mohd Yazid Abdul Manap.

Obtención de datos:

Para el recuento de los datos necesarios para la elaboración del Diagrama de Partición se consultó la sección 2.4.1 “Ensayo de la actividad de la serina proteasa” del artículo, donde se menciona que para determinar la actividad de la proteína usaron el método descrito por Whooley, O’Callaghan en Effect os substrate on the regulation of Exoprotease Production by Pseudomonas aeruginosa (1982) aplicando algunas modificaciones. En este último artículo se menciona que para determinar la actividad de la exoproteasa se empleó el método de Oliver H. Lowry, descrito en Protein Measurement with the folin phenol reagent (1951), para la cuantificación de proteína.

Lowry menciona que para la cuantificación de las proteínas en un intervalo de concentración de entre 5 – 25 μg/mL se recomienda leer a 750nm en un espectrofotómetro, rango que es el adecuado para los 25 reportados. [pic 4]

Para el valor de la concentración total de la enzima proteasa en la cascara de Mango (Mangifera Indica Cv. Chokanan) se hizo una comparación con los datos reportados en la extracción de proteasa a partir de Pitaya, del artículo del mismo autor Mehrnoush Amid, Purification and Characterization of Alkaline-Thermostable Protease Enzyme from Pitaya (Hylocereus polyrhizus) Waste: A Potential Low Cost of the Enzyme (2014), cuyo valor es de 44.2 μg/mL.

Mehrnoush menciona un coeficiente de partición (KD) de 64.5, una actividad especifica de la enzima de 130 U/mgprot y un rendimiento del 96.7% para el sistema de 16% (w/w) 2-propanol, 19% (w/w) fosfato potásico, 20% (w/w) de carga bruta y 5% (w/w) de NaCl a un pH 8.

Se obtuvieron las fracciones de masa del soluto de cada flujo:

[pic 5]

[pic 6]

Considerando que la ecuación que rige al diagrama de extracción binaria liquido-liquido es y=mx+b, donde b=0 y la pendiente (m) es el coeficiente de partición, así podemos obtener la fracción masa de la salida del flujo II (FII) de la siguiente manera:

[pic 7]

Cuya ecuación fue utilizada para las operaciones siguientes.

[pic 8]

Figura 1. Diagrama de balance de masa

Para la elaboración del diagrama de partición se realizó un barrido de las fracciones masa en los flujos FI y FII, el cual se muestra a continuación:

Tabla 1. Barrido de fracciones masa para la determinación del diagrama de partición

...