Guia Bioquimica

EXPERIMENTO N° 7

PROPIEDADES DE LAS PROTEINAS II

FUNDAMENTO TEORICO:

Los grupos R de los aminoácidos son diversos, por lo que pueden reaccionar de varias maneras. Así, aminoácidos como al ácido aspártico y el ácido glutámico poseen un segundo ácido carboxílico, la lisina, posee un segundo grupo amino. Además, otros aminoácidos con grupos laterales reactivos son: la cisteína (-SH), la arginina (guanidio), la histidina (imidazol), la serina, la treonina y la tirosina (alcoholes), la asparagina y la glutamina (amidas), la metionina (un tioeter) y el triptofano (indol).

La reactividad de estos grupos funcionales ha sido aprovechada de diversas maneras en el estudio y análisis de las proteínas. Como un ejemplo, se menciona el caso de las lisinas, que reaccionan con aldehídos (carbonilo) para formar bases de shift, esto se ha aprovechado para producir un papel aldehídico, al que las proteínas se unen covalentemente , lo que permite fijarlas para su estudio.

También es posible hacer reaccionar las cisteínas o las lisinas con diversos grupos químicos reactivos presentes en resinas, con lo que es posible unir proteínas a materiales para columnas de cromatografía y fabricar columnas con enzimas inmovilizadas, anticuerpos y receptores estere o selectivos para ligandos específicos.

Una tercera aplicación de la reactividad de los restos laterales de los aminoácidos está en identificar el tipo de aminoácidos involucrados directamente en cierta función de unas proteínas. Así. Por ejemplo, si un residuo de cisteína participa en el reconocimiento de un ligando específico, al modificar este residuo con metil-metano-tiosulfonato, la proteína pierde su actividad biológica. En cambio, si el metil-metano-tiosulfonato se añade cuando el ligando está presente, la presencia del ligando protege a la cisteína con la que interactúa y evita la pérdida de la función.

Además, las propiedades químicas de los aminoácidos ciertamente son aprovechadas por los sistemas vivos para realizar diferentes funciones. 25

PARTE EXPERIMENTAL: Materiales Reactivos

Tubos de ensayo Albúmina al 1%

Pinzas para tubos de ensayo Gelatina al 1%

Vasos de precipitación Caseína al 1%

Mechero Reactivo de Millon

Pipetas graduadas Reactivo de Biuret

Goteros Ninhidrina al 1%

HNO3 c

NaOH al 10% y 1N

HgCl2 al 1%

AgNO3 al 1%

Etanol absoluto

Ácido tricloroacético

Procedimiento:

REACCIONES DE COLORACION DE PROTEINAS

1. Prueba de Millon.

La evidencia de esta reacción requiere la presencia de un anillo fenólico en la muestra como la tirosina.

Poner en 4 tubos de ensayo diferentes cinco gotas de: albúmina al 1%, gelatina al 1%, caseína al 1% ; añadir a cada tubo tres gotas del reactivo

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