Materiales | Reactivos | - Microscopio
- 1 Beaker de 50 ml
- 1 Gradilla
- 2 Tubos de ensayo
- Pinzas de madera
- Pinza metálica
- Aguja de disección
- Caja de Petri
- Baño serológico
| - Raíces de cebolla cabezona (Allium cepa)
- Bisturí
- Cinta de enmascarar
- Gotero
- Servilletas
- Portaobjetos
- Cubreobjetos
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Solución:
- Solución hidrolizante. Preparación: 100ml de agua destilada, agregar 10 ml de ácido acético y 5 ml de etanol al 95% (pedir esta solución con anterioridad)
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Procedimiento
3.1 Técnica para obtener células de cebolla en división
- Tome, un bulbo de cebolla, corte la raíz incluyendo parte del bulbo y quítele la epidermis más extrema.
- Coloque en un recipiente apropiado (por ejemplo: un Beaker de 50 ml, un frasco de boca ancha o un vaso desechable de plástico) con agua, de tal manera que ésta cubra una porción de la parte inferior del bulbo.
- En los tres días siguientes las raíces emergerán. Cuando hallan alcanzado 3 a 4 cm, se cortan las raíces sin dañar el extremo más blanco y se ponen durante un mínimo de 24 horas en tubos de ensayo que contengan solución hidrolizante.
6.2 Preparación de las placas de células de cebolla
- retire las raíces de la solución hidrolizante y colóquelas en el fondo de un tubo de ensayo.
- Agregue 1 ml de acetoorceina, asegurándose de que las raíces queden sumergidas totalmente en el colorante.
- Lleve el tubo de ensayo a baño maría, durante 20 minutos a 50 °C. esta temperatura debe controlarse y por ningún motivo debe pasar de 52 °C; si aumenta se debe adicionar agua fría.
- Después de transcurrido el tiempo, tome 23 a 4 raíces y póngalas sobre un porta objeto. Corte transversalmente el extremo más blanco a una distancia de aproximadamente 0.5 cm y descarte el otro extremo.
- Agregue una gota de acetoorceina y deje actuar el colorante durante unos segundos. Macere suavemente con el extremo redondo de una aguja metálica y cubra con una laminilla haciendo presión sobre el tejido.
- Con ayuda de papel absorbente, realice una suave presión con el dedo pulgar sobre el cubreobjetos, en el mismo punto y en una sola dirección para evitar que se quiebre. Esto asegura una buena distribución del macerado y facilitará su observación al microscopio.
- Retire el papel. Observe al microscopio con el objetivo de menor aumento la calidad del macerado. Si su apariencia es muy gruesa y no hay una buena distribución, mejor elabore un nuevo montaje.
- Identifique bajo el microscopio, con aumento de 400, y con ayuda del material bibliográfico, cada una de las fases de la mitosis y haga sus propios esquemas para ilustrarlas.
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Profase Los principales acontecimientos que ocurren durante la profase son: - La cromatina se empieza condensar formando cromosomas.
- La envoltura nuclear se fragmenta hasta desaparecer.
- Desaparece el nucléolo, dispersándose en citoplasma.
- Cada centriolo, duplicado en la interfase, se desplaza a un extremo de la célula. Entre ellos, se forma el huso acromático, unos filamentos de proteínas.
- Los cromosomas, se unen a una fibra del huso acromático por el centrómero, de tal forma que las cromáticas quedan orientadas hacia los polos de la célula.
- Los cromosomas, una vez unidos a las fibras del huso, se van moviendo hacia el centro de la célula.
[pic 1] [pic 2] [pic 3] Metafase La metafase es la fase de mayor duración, y los principales acontecimientos que ocurren son: - Los cromosomas ya están totalmente condensados y se sitúan en el centro de la célula, formando la placa ecuatorial.
- Los cromosomas están unidos a las fibras del huso acromático por el cinetocoro de cada cromosoma.
[pic 4] |
- ¿Cuál es la importancia biológica de la mitosis? Explique con varios ejemplos.
La mitosis es un proceso, común a todo tipo de células eucarióticas, mediante el cual se garantiza que las células hijas tengan los mismos cromosomas que la célula madre y, por tanto, la misma información genética de lo cual lo más importante es: - Crecimiento del tejido. Un claro ejemplo son los huesos, que se formando durante la pubertad, mientras que estamos creciendo en altura.
- Reposición o renovación de las células de los diferentes tejidos. Algunas células tienen gran actividad y pueden "desgastarse", es decir, envejecen y pueden llegar a morir. Un ejemplo, son las células de la sangre, que se producen y funcionan durante un máximo de cuatro meses
- Se desarrollan para formar los músculos, otras forman neuronas, células reproductoras, etc. En este caso, las células que forman el cuerpo se diferencian en dos tipos: células sexuales y células somáticas
- Establezca las diferencias entre mitosis en células vegetales y mitosis en células animales.
El proceso es básicamente el mismo, pero hay algunas diferencias. - Las células animales presentan centríolos, por lo que se forma un huso mitótico astral, mientras que en las vegetales es anastral.
- Los cromosomas, en las células animales, se sitúan generalmente en la periferia de la placa metafásica, mientras que en las vegetales tienden a ocupar toda la placa ecuatorial.
- Los cinetocoros de los vegetales presentan una morfología esferoidal, pero en los animales es discoidal y con estructura trilaminar.
- La división del citoplasma o citocinesis, en las células animales, tiene lugar por estrangulación, pero la pared celular de los vegetales imposibilita este procedimiento, formándose un septo o tabique entre las dos células resultantes.
- ¿Cuál es la acción de la solución fijadora sobre las estructuras celulares?
Los fijadores actuales como el formaldehído y glutaraldehído, establecen enlaces covalentes con los grupos amino libres presentes en las proteínas y forman puentes cruzados entre sí y con las proteínas adyacentes. Esto da como resultado la formación de una delgada malla que mantiene la estructura interna celular y la cohesión tisular. La solución fijadora lo que hace es evitar el deterioro de la estructura celular. La raíz de la cebolla es un buen material para observar este proceso, puesto que en el meristemo apical las células se dividen a gran velocidad, lo que Aumenta la probabilidad de detectar células en mitosis. - ¿Qué acción ejercen los agentes antimitóticos sobre el mecanismo de la mitosis? De algunos ejemplos.
Este agente antimitótico controla el ciclo celular y hace que la célula se detenga en la fase metafase. Y para obtener un buen número de células en metafase. Otros buenos agentes antimitóticos que pueden utilizarse en este procedimiento son: - Paclitaxel
- Docetaxel
- Vinblastina
- Vincristina
- Vinorelbina
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