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MEDIOS DE CULTIVO Y TÉCNICAS DE SIEMBRA DE MICROORGANSMOS


Enviado por   •  13 de Octubre de 2015  •  Informe  •  1.154 Palabras (5 Páginas)  •  543 Visitas

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INFORME DE LABORATORIO

LIZETH LORENA RODRIGUEZ GONGORA

GEIDY JAZMIN MORENO MOSQUERA

JINETH XIMENA ESTRADA JIMÉNEZ

LUIS ALBERTO SUAREZ SEGURA

ASTRID CAROLINA DIAZ GIRALDO

FUNDACION UNIVERSITARIA DEL AREA ANDINA

FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD- ENFERMERIA

14 DE SEPTIEMBRE DE 2015

BOGOTA D.C

INFORME DE LABORATORIO

LIZETH LORENA RODRIGUEZ GONGORA

GEIDY JAZMIN MORENO MOSQUERA

JINETH XIMENA ESTRADA JIMÉNEZ

LUIS ALBERTO SUAREZ SEGURA

ASTRID CAROLINA DIAZ GIRALDO

MEDIOS DE CULTIVO Y TÉCNICAS DE SIEMBRA

Solange V. Benitez H.

Bact UCMC M Sc. Microbiología

Docente FUAA-UCMC

FUNDACION UNIVERSITARIA DEL AREA ANDINA

FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD- ENFERMERIA

14 DE SEPTIEMBRE DE 2015

BOGOTA D.C

INTRODUCCION

El cultivo de microorganismos es la forma en la que se hacen crecer los microorganismos y consiste en proporcionarles las condiciones químicas, físicas y nutritivas adecuadas para que puedan multiplicarse de forma controlada. En general, podemos distinguir cultivos líquidos y sólidos en función de las características del medio y cultivos discontinuos y continuos en función de la disponibilidad de nutrientes en el medio.

PALABRAS CLAVES

  1. Microorganismo: también llamado microbio, es un ser vivo que solo puede visualizarse con el microscopio.
  2. Aislamiento: Separación de una población o una cosa, dejándolas solas o incomunicadas.
  3. Agar: Sustancia mucilaginosa que se extrae de algunas algas rojas o Rodofíceas, frecuentes en el Océano Atlántico, Pacífico e Indico es una sustancia amorfa la cual se emplea como medio de cultivo en bacteriología, como apresto de sedas, como sustituto de la gelatina, etc.
  4. Bacteria: Organismo microscópico unicelular, carente de núcleo, que se multiplica por división celular sencilla o por esporas.
  5. Hongo: Ser vivo sin clorofila, de reproducción preferentemente asexual, por esporas, que suele ser parásito o vive sobre materias orgánicas en descomposición y no tiene núcleo.

MATERIALES

Microorganismos

Implementos

  • Staphylococcus aereus.
  • Escherichia coli.
  • Bacilus cereus
  • Listeria monocitogenes.
  • Pseudomonos aeruginosa.
  • 1Cepa de hongos.

  • Escobillones estériles.
  • Láminas y laminillas.
  • Portaobjetos.
  • Microscopios.
  • Asa bacteriológica metálica redonda y recta.
  • Aceite de inmersión.
  • Solución salina 0.85%.
  • Toalla de manos.
  • Coloraciones de Gram.
  • Coloración de Wrigth
  • -Hisopos y baja lenguas estériles.
  • Láminas Porta y Cubreobjetos con los microorganismos aislados en la clase anterior.
  • Tinta china -Solución salina al 0.85%.
  • Servilletas o toallas de papel.
  • Encendedor.
  • Cinta de enmascarar.
  • Hipoclorito de sodio (Clorox).
  • Etanol 70%.
  • Agua destilada.
  • Frasco de Compota.

METODOLOGIA

Preparación de medios de cultivos para todas las practicas se tiene una limpieza y desinfección  de la superficie en la que se va a trabajar, tener el mechero prendido y lo elementos con los que va a trabajar a mano y organizados, tener claridad de que microorganismo va a trabajar y la cantidad que va a usar. Mezclar el medio deshidratado con la mitad del agua, agite bastante  y agregue el agua que sobra. Lleve a ebullición si es necesario (En el caso de agares, no a los caldos). Esterilice en autoclave según las indicaciones impresas en la etiqueta del producto Finalizada la esterilización, sirva asépticamente aproximadamente 15 a 20 ml de medio en las cajas de Petri; evite la condensación de agua sobre la caja de Petri.

Para los medios que se dispensan en tubos, se recomienda servir la cantidad adecuada de medio de acuerdo al tamaño del mismo, Los medios ya esterilizados no deben ser expuestos al ambiente, para evitar su contaminación estos solos deben ser abiertos en el momento de su uso.

TIPOS DE AISLAMIENTO

Medio sólido:

  • Por agotamiento: Tomar el tubo con el cultivo mixto, agitar para homogeneizar su contenido, flamear el asa bacteriológica y tomar una muestra del cultivo, flamear la boca del tubo tanto al abrirlo como antes de cerrarlo, en una placa con agar nutritivo y tocando con suavidad la superficie del medio, extender la muestra el recorrido del asa debe ser lo más largo posible con el fin de conseguir al final del mismo células aisladas que darán lugar a colonias.

  • En cuadrantes: Tomar el tubo con el cultivo mixto, agitar para homogeneizar su contenido, flamear el asa bacteriológica y tomar una muestra del cultivo. Flamear la boca del tubo tanto al abrirlo como antes de cerrarlo, en una placa con agar nutritivo y tocando con suavidad la superficie del medio, dividir la caja Petri en tres segmentos y hacer el cultivo de diferentes microorganismos cada uno en su espacio.

  • Rejilla o masivo: Tomar el tubo con el cultivo mixto, agitar para homogeneizar su contenido, flamear el asa bacteriológica y tomar una muestra del cultivo, flamear la boca del tubo tanto al abrirlo como antes de cerrarlo, en una placa con agar nutritivo y tocando con suavidad la superficie del medio, extender la muestra el recorrido del asa debe ser lo más largo posible y luego hacer lo mismo de forma transversal para que quede con forma de reja.

Medio semisólido:

  • Por punción (Hongos): aislamiento de hongos: Con una se toma el material que se quiere sembrar y se lo introduce en el tubo, con medio semisólido. Introducir la aguja hasta el fondo, tomamos 1 ml del medio y lo ponemos en el centro de la caja de Petri.

Medio liquido:

  • Medio de cultivo en tubo: Líquido y en bisel o inclinado marque correctamente los tubos con el número del grupo, técnica de siembra utilizada y la fecha, encienda el mechero y trabaje siempre a lado de él, caliente el asa recta al rojo y déjela enfriar, con el asa tome un poco de la muestra, destape el tubo (flameando la boca del tubo con el mechero, retire el asa, flamee la boca del tubo y tape. caliente el asa al rojo, esterilícela siempre antes de usarla y después de usarla, coloque el material en el sitio y temperatura asignada para cada microorganismo.

RESULTADOS

Medio de cultivo

Microorganismo

Objeto

Composición del medio

Forma de preparación

Interpretación del medio

Agar – Agar

(1-5%)

Escherichia coli

Caldo nutritivo: Contiene extracto acuoso de carne adicionado de peptona al 1% y cloruro de sodio al

0,5%.

Los tubos llenos de medio

de cultivo esterilizado, todavía líquido, se colocan en posición inclinada de forma tal que se forme una

placa de aproximadamente 3 cm y una superficie inclinada de iguales dimensiones

en los cuales se requiera medio sin inclinar, estos deben dejarse solidificar en

posición vertical sobre una gradilla

Los tubos llenos de medio

de cultivo esterilizado, todavía líquido, se colocan en posición inclinada de forma tal que se forme una

placa de aproximadamente 3 cm y una superficie inclinada de iguales dimensiones

en los cuales se requiera medio sin inclinar, estos deben dejarse solidificar en

posición vertical sobre una gradilla

Bacterias tienen movimiento.[pic 1]

Agar – Agar

(1-5%)

Staphylococcus aereus

Caldo nutritivo: Contiene extracto acuoso de carne adicionado de peptona al 1% y cloruro de sodio al

0,5%.

[pic 2]

Bacterias no tienen movimiento.

Liquido

(no agar)

Staphylococcus aereus

Caldo nutritivo: Contiene extracto acuoso de carne adicionado de peptona al 1% y cloruro de sodio al

0,5%.

[pic 3]

Bacterias tienen moviento.

Semisolido

(5-7%)

Staphylococcus aereus

Caldo nutritivo: Contiene extracto acuoso de carne adicionado de peptona al 1% y cloruro de sodio al

0,5%.

[pic 4]

Bacterias no tienen moviento.

Semisolido

(5-7%)

Escherichia coli

Caldo nutritivo: Contiene extracto acuoso de carne adicionado de peptona al 1% y cloruro de sodio al

0,5%.

[pic 5]

Bacterias tienen movimiento

Agar – Agar

(1-5%)

Staphylococcus aereus

Caldo nutritivo: Contiene extracto acuoso de carne adicionado de peptona al 1% y cloruro de sodio al

0,5%.

Bacterias sin movimiento[pic 6]

...

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