Medios De Cultivos
Enviado por 5102yul • 26 de Mayo de 2015 • 5.590 Palabras (23 Páginas) • 221 Visitas
CLASIFICACIᅮN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO.
Se pueden clasificar atendiendo a distintos criterios:
ATENDIENDO A SU ESTADO FᅪSICO:
ᄋ L■quidos: favorecen mucho el desarrollo y multiplicacin de las bacterias
porque al difundirse estas por todo el medio encuentran f£cilmente las
sustancias que necesitan para nutrirse. No contienen agar.
ᄋ Slidos: contienen de 15 a 17 g de agar por litro. Las bacterias crecen
con mayor dificultad; no obstante, son de gran utilidad para el estudio de
las caracter■sticas de crecimiento, de la produccin de hemlisis y otras
peculiaridades.
ᄋ Semislidos: se utilizan mucho para observar la movilidad de los
microorganismos. Contienen agar en una proporcin de 3 a 5 g. por litro.
ATENDIENDO A SU UTILIDAD:
GENERALES O COMUNES:
Son apropiados para el cultivo de la mayor■a de los microorganismos por la
facilidad con que se desarrollan en ellos. Se usan para cultivar bacterias poco
exigentes.
Entre ellos podemos citar el caldo nutritivo, el TSB, el agar nutritivo y el TSA.
MEDIOS ESPECIALES:
Conocidos tambi←n como espec■ficos, van dirigidos al cultivo de determinadas
especies bacterianas o son utilizados con fines de diferenciacin.
Entre ←stos tenemos:
A) MEDIOS ENRIQUECIDOS: son medios generales a los que se les aade
ciertos productos (sangre, suero, glucosa,...), favoreciendo as■ el crecimiento de
ciertos microorganismos muy exigentes. Ejemplos: agar-glucosa (agar nutritivo
aadido de glucosa), agar sangre (agar nutritivo aadido de sangre), agar
chocolate, etc.
B) MEDIOS SELECTIVOS: estos medios contienen componentes que inhiben el
desarrollo de ciertos microorganismos, lo cual permite aislar el microorganismo
que se busca. Entre estos medios podemos citar: agar Salmonella-Shigella (agar
SS, selectivo para Salmonellas y Shigellas), agar MacConkey (se utiliza para el
aislamiento de Enterobacterias), agar de Thayer-Martin (selectivo para
Neisseria), agar Manitol salado (Chapman, selectivo de Estafilococos coagulasa
positivos), agar de Lowenstein-Jensen (selectivo para el cultivo de
micobacterias, especialmente Mycobacterium tuberculosis, agar de Sabouraud
(para el cultivo de la mayor■a de las levaduras y hongos patgenos).
C) MEDIOS DIFERENCIALES: son aqu←llos en los que adem£s de crecer las
bacterias, al actuar ←stas sobre alguno de los componentes espec■ficos del
medio, demuestran alguna de sus propiedades bioqu■micas. Contienen
azcares e indicadores, concebidos para provocar una respuesta bioqu■mica
conocida (si la bacteria es capaz de fermentar el azcar que lleva el medio, se
producir£ una acidificacin del medio con el consiguiente viraje de color del
medio por el cambio de pH).
Ejemplos:Agar hierro de Kligler, Agar de MacConkey (diferencia los bacilos
ent←ricos fermentadores y no fermentadores de la lactosa.
Fermentadores de lactosa---> colonias rosas;
No fermentadores de lactosa (lactosa negativos) ---> colonias incoloras).
D) MEDIOS DE ENRIQUECIMIENTO: son medios l■quidos que favorecen o
permiten la multiplicacin de unas bacterias, inhibiendo parcial o totalmente la de
otras. Ejemplos: agua de peptona alcalina (favorece la multiplicacin de Vibrio
cholerae), caldo selenito (favorece el crecimiento de Salmonellas y Shigellas,
fundamentalmente Salmonellas).
E) MEDIOS DE TRANSPORTE: se utilizan para asegurar la viabilidad de las
bacterias desde el momento de la toma de las muestras hasta su posterior
siembra en el laboratorio o para su env■o de unos laboratorios a otros.
Actualmente los medios de transporte m£s utilizados son los de Stuart, Amies, y
el medio de Cary-Blair.
F) MEDIOS DE CONSERVACIᅮN: son una variacin de los medios de
transporte. Aseguran las caracter■sticas morfolgicas y fisiolgicas de las
bacterias por un periodo largo de tiempo. Ejemplo: agar de tripticasa y soja.
Un gran nmero de medios de cultivo utilizados en el laboratorio de
microbiolog■a se podr■an englobar en varios de los grupos anteriormente
expuestos. Ej.: agar sangre, es un medio enriquecido y diferencial.
E.M.B. Agar.
Este medio (tambi←n denominado E.A.M.) es utilizado para el aislamiento selectivo de bacilos Gram negativos de r£pido desarrollo y escasas exigencias nutricionales. Permite el desarrollo de todas las especies de la familia Enterobacteriaceae.
Fundamento
Este medio combina las frmulas de Holt-Harris y Teague con la de Levine, para obtener un mejor rendimiento en el aislamiento selectivo de enterobacterias y otras especies de bacilos Gram negativos. La diferenciacin entre organismos capaces de utilizar la lactosa y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces de hacerlo, est£ dada por los indicadores eosina y azul de metileno; ←stos ejercen un efecto inhibitorio sobre muchas bacterias Gram positivas. Muchas cepas de Escherichia coli y Citrobacter spp. presentan un caracter■stico brillo met£lico. Las cepas que utilizan la lactosa poseen centro oscuro con periferia azulada o rosada, mientras que las que no lo hacen son incoloras. Este medio permite el crecimiento de Candida spp. como colonias rosadas y puntiformes; la siembra en profundidad permite el desarrollo de clamidosporas en C. albicans. Enterococcus spp. crece en este medio como colonias puntiformes y transparentes, mientras que Acinetobacter spp. y otras bacterias oxidativas pueden dar colonias de color azul lavanda; esto puede ocurrir aunque las cepas no sean capaces de acidificar a partir de lactosa al 0.5% y ello se debe a la incorporacin de azul de metileno a sus membranas. En este medio se obtiene adem£s, un buen desarrollo de especies de Salmonella y Shigella.
Frmula (en gramos por litro) Instrucciones
Peptona 10.0 Suspender 36 g del polvo en un litro de agua destilada. Reposar 5 minutos; mezclar, calentando a ebullicin durante 1 o 2 minutos hasta su disolucin. Esterilizar en autoclave a no m£s de 121ᄚC durante 15 minutos. Enfriar a 45ᄚC y distribuir agitando suavemente.
Lactosa 5.0
Sacarosa 5.0
Fosfato dipot£sico 2.0
Agar 13.5
Eosina 0.4
Azul de metileno 0.065
pH final: 7.2 ᄆ 0.2
Siembra
En superficie, por estriado a partir de un inculo poco denso, para obtener colonias aisladas.
En profundidad, para favorecer
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