MULTIPLICACIÓN DE CULTIVOS ¨ IN VITRO¨

PRACTICA N°5

MULTIPLICACIÓN DE CULTIVOS ¨ IN VITRO¨

CHAMORRO ANAYA LINA MARÍA

MEJÍA ACOSTA VIVIANA LUZ

MEDINA PAYARES JUAN CAMILO

DOC: JAVIER DARIO BELTRAN HERRERA

UNIVERSIDAD DE SUCRE

FACULTAD DE EDUCACIÓN Y CIENCIAS

PROGRAMA DE BIOLOGÍA

BIOTECNOLOGÍA

SINCELEJO-SUCRE

2013

INTRODUCCION

La expresión cultivo in vitro de plantas, significa cultivar plantas dentro de un frasco de vidrio en un ambiente artificial. Esta forma de cultivar las plantas tiene dos características fundamentales: la asepsia (ausencia de gérmenes, etc), y el control de los factores que afectan el crecimiento. El avance alcanzado por las ciencias biológicas ha permitido en los últimos años el estudio detallado de las plantas tanto a nivel celular como molecular, y en condiciones de laboratorio es posible actualmente reproducir todos los factores que puedan incidir en el crecimiento y desarrollo de las plantas. Este principio general se aplica también al cultivo in vitro de plantas.

Reproducir en condiciones de laboratorio todos los factores que conforman el ambiente de la planta en la naturaleza es técnicamente muy complejo. Por esa razón se realiza una simplificación de la realidad escogiendo aquellos factores que se puedan mantener controlados. Cuando no se realiza el estudio con todo el ser vivo sino con solamente una parte del mismo, se utiliza el término explante para indicar la parte del órgano ó tejido vegetal que se cultiva in vitro. A la dificultad de reproducir las condiciones naturales en condiciones de laboratorio, se debe añadir en este caso la dificultad de suministrar al explante todo aquello que antes obtenía del sistema completo. En resumen, el cultivo in vitro de plantas es una técnica que exige un control específico del ambiente, tanto físico como químico, en el que se sitúa al explante. Conviene, por tanto, conocer cuáles son los principales factores que conforman dicho y que deberán ser controlados.

La propagación de plantas in vitro es una técnica muy utilizada en cultivos de importancia económica. Permite cultivar células, tejidos, órganos, semillas, embriones y obtener individuos selectos en forma rápida. Los cultivos son realizados por personal especializado en medios específicos (hormonas, minerales, vitaminas, fuente de carbono, agente gelificante, agua, etc.) y condiciones ambientales controladas (temperatura, humedad y luz). Una vez ajustados los protocolos para la especie o cultivo de interés, es posible automatizar el proceso de modo de llevarlo a mayor escala de producción.

El Ñame (Dioscorea sp.) es un género de plantas tropicales, cuyo tubérculo se usa ampliamente para la alimentación, siendo un producto básico para el consumo humano en Nueva Guinea y África oriental. Su consumo es importante también en el Caribe. En Asia y África su cultivo data de hace ocho mil años, en tanto en América tropical es cultivada por los pueblos indígenas desde la época precolombina. Es cultivado por pequeños y medianos agricultores y constituye la principal fuente de ingresos y de empleo en muchas zonas rurales del mundo.

En Colombia el ñame es uno de los productos de gran importancia socio-económica y cultural especialmente en la Costa Caribe Colombiana, en los departamentos de Córdoba, Bolívar y Sucre, estos aportan aproximadamente el 92 % de la producción nacional y beneficia cerca de 18.500 familias  de pequeños productores.

Importancia: El Ñame es una planta herbácea, trepadora, dioica perteneciente a la familia Dioscoreaceae, género Dioscorea que comprende 603 especies. De las 603 especies que pertenecen al género Dioscorea sólo 12 son cultivadas a nivel comercial, entre las cuales D. rotundata, D. cayenensis  y D. alata. Son las más ampliamente distribuidas a nivel mundial y de mayor importancia económica. Este tubérculo se ha constituido en uno de los productos alimenticios de mayor interés, debido a su riqueza en carbohidratos para millones de personas que habitan en los trópicos y subtrópicos de África, América Central, Sur América, partes de Asia, el Caribe e islas del Pacifico. Repercutiendo esto en su comercialización y por ende en la economía a nivel mundial.

OBJETIVO

• Obtener mediante la propagación agámica, un conjunto de individuos genéticamente estables e iguales a la planta de la cual se obtuvo. 
• Conocer las condiciones necesarias para llevar a cabo la multiplicación de cultivos in vitro.

MATERIALES

PROCEDIMIENTO

Preparación de la cámara de siembra: La limpieza y desinfección inicial del cubículo de trabajo de la cámara se realizo con una solución de alcohol al 70% y algodón  por todas partes. Se ingreso todo el material necesario para la siembra y se organizaron, los frascos con medio de cultivo (MC), se limpiaron exteriormente con algodón al 70% para minimizar el ingreso de contaminantes al cubículo de trabajo y luego se ingreso el resto del material de apoyo exceptuando las soluciones de hipoclorito, peróxido y alcohol. Se encendió la luz ultravioleta por 15 minutos antes de iniciar la sesión de trabajo. (Trabajo realizado por la auxiliar de laboratorio).

Multiplicación de los explantes: después de haber crecido suficientemente (4 a 6 nudos), los explantes se encuentran en condiciones optimas para ser multiplicados. Previamente  se ha preparado el medio de multiplicación seleccionado, se procede a llevar los frascos a la cámara ya desinfectada y acondicionada.[pic 3]

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Preparación de los explantes para ser multiplicados: se tomo el frasco, se le quito la tapa de aluminio y con la pinza y con mucho cuidado de no maltratar la plántula se saca y se coloco en un papel absorbente estéril y cuidadosamente se le retiraron  las hojas necróticas, luego se corto entre los nudos para sacar varios explantes. Las hojas y el material de desecho se colocaban dentro del frasco auxiliar destinado para tal fin.

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