PRACTICA 1 SEPARACÓN DE PIGMENTOS FOTOSINTÉTICOS POR CROMATOGRAFÍA ASCENDENTE MONODIMENSIONAL SOBRE PAPEL

PRACTICA 1

SEPARACÓN DE PIGMENTOS FOTOSINTÉTICOS POR CROMATOGRAFÍA ASCENDENTE MONODIMENSIONAL SOBRE PAPEL

INTRODUCCIÓN. Buscar y realizar una pequeña introducción con referente al objetivo (s), con cita(s) actuales  no más de 40 renglones, adicionando una o varias imágenes correspondientes al tema que se trabajara en la práctica.

BIBLIOGRAFÍA: anexa 2 ó 3 bibliografías recientes, en donde se investigó la  introducción.

OBJETIVOS.        

1. Extraer biomoléculas de la espinaca mediante un solvente orgánico.
2. Separar los pigmentos fotosintéticos por cromatografía ascendente en papel.

MATERIAL.

-Espinaca (15g)

-Pipeta Pasteur con bulbo

-Embudo de vidrio de talle largo

-Papel Whatman No. 1

-Probeta de 50 Ml

-Mortero con pistilo

-Tanque cromatográfico

-Vaso de precipitado de 100 mL

-Agua destilada

-Acetona

-Éter de Petróleo

-Cartulina negra

PROCEDIMIENTO.

1. Colocar el embudo de vidrio, con un pedazo de papel filtro (15x15) previamente doblado para formar un cono (filtro liso).
2. Pesar 5 g de espinacas sin nervaduras, seleccionar las hojas de color más verde.
3. Moler en el mortero la espinaca con 10 ml de acetona. Este proceso hacerlo lo más rápido posible, pues la acetona es un líquido volátil.
4. Colocar el extracto obtenido en el interior del cono de papel filtro depositado en el embudo para eliminar los residuos de las hojas, recibir el extracto filtrado en un vaso de precipitado.
5. En una hoja rectangular de papel filtro de 10 cm x 20 cm pintar con lápiz una raya perpendicular al largo del rectángulo de papel, a 3 cm de uno de los extremos.
6. Tomar el papel filtro con los dedos solo por la punta de un extremo y aplicar el extracto de los pigmentos con la punta de una pipeta Pasteur, acondicionada con un bulbo en el extremo más ancho, trazando sobre la línea de lápiz una línea de pigmento de aproximadamente 5 mm de ancho, esperar a que se seque y aplicar una línea más del extracto de pigmento, en este punto se debe tener cuidado de no saturar con la muestra pues esto impactara en una buena separación.
7. En el fondo del tanque cromatografico colocar 50 ml de una solución de éter de petróleo y acetona 95:5 (v.v), introducir el papel filtro de manera que la línea de pigmento quede hacia la parte inferior del frasco (cuidando que no moje la línea que contiene el extracto con la mezcla de solventes), paralela a la superficie de la mesa.
8. Esperar, sin mover el frasco, a que la mezcla de solventes ascienda por capilaridad a lo largo, del papel filtro que deberá estar completamente vertical, hasta que alcance el extremo superior del papel, sacarlo y secarlo. Repetir este paso 3 o 4 veces hasta que se puedan diferenciar sobre el papel las bandas separadas de los pigmentos fotosintéticos (de color verde y amarillo).
9. Observar el número de bandas de pigmentos que se separaron después de hacer el corrimiento cromatografico.
10. Medir el frente de corrimiento, así como, la distancia de corrimiento de cada banda con respecto al origen y anotar el color de las mismas.

RESULTADOS:

Anota tus observaciones realizadas durante el experimento.

CONCLUSIÓN: Realiza una conclusión corta que sustente tus objetivos.

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