Sectores Agroindustrial

INFORME NUMERO 5

PROTEINAS

DAYRON ALONSO CANO PRADA

DAVID FELIPE MORENO BENITEZ

CESAR AUGUSTO PEDRAZA HIGUERA

Entregado a: CARMEN CECILIA ESPINDOLA DIAZ

UNIVERSIDAD PEDAGOGICA Y TECNOLOGICA DE COLOMBIA

FACULTA DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

INGENIERIA AGRONOMICA

TUNJA, BOYACA

2014

RESUMEN

Las proteínas o prótidos son moléculas formadas por cadenas lineales de aminoácidos, que significa prominente, de primera calidad. Las proteínas desempeñan un papel fundamental para la vida y son las biomoléculas más versátiles y diversas. Son imprescindibles para el crecimiento del organismo y realizan una enorme cantidad de funciones diferentes, entre las que destacan:

Estructural. Esta es la función más importante de una proteína (Ej: colágeno)

Inmunológica (anticuerpos)

Enzimática (Ej: sacarasa y pepsina)

Contráctil (actina y miosina)

Homeostática: colaboran en el mantenimiento del pH (ya que actúan como un tampón químico)

Transducción de señales (Ej: rodopsina)

Protectora o defensiva (Ej: trombina y fibrinógeno)

En el laboratorio aprendimos a cuantificar estas por la ley de Lambert-Beer y observaos como se puede mirar la concentración de estas con una solución patrón y como calcular la concentración de una o solución problema mirando y comparando las demás además conocimos como trabajar el espectrofotómetro y conocimos el laboratorio de alimentos, y como desarrollar cálculos para hallar la concentración y hallar la proteína estudiada muy importante para la carrera de ing. Agronómica.

2. INTRODUCCION

Lambert y Beer demostraron que la absorbancia (A), también llamada densidad óptica (D.O.) de una sustancia es directamente proporcional a la concentración (c) de la sustancia absorbente, la longitud del paso de luz (l) (espesor de la solución) y una constante denominada coeficiente de extinción o coeficiente de absorción (a), que es característico para cada sustancia a una longitud de onda () determinada.

A = al c Ecuación 1.1

Para medir la absorbancia de una sustancia se utiliza el espectrofotómetro, instrumento destinado a medir la absorción por especies inorgánicas y orgánicas de luz monocromática en la región ultravioleta / visible del espectro.

Los espectrofotómetros dan la lectura directa de la absorbancia (A) o bien, el porcentaje de transmitancia (%T). La relación entre ambos es:

A = 2 - log % T Ecuación 1.2

Análisis espectrofotométrico:

Todo método espectrofotométrico se basa en la comparación de la absorbancia de una sustancia de concentración desconocida con la de una solución de la misma sustancia cuya concentración se conoce y a la cual se denomina solución patrón o estándar.

La absorbancia de una solución es la resultante de la absorbancia del soluto cuya concentración se desea conocer y la de otros componentes del sistema (solventes, reactivos) que absorben también a esa longitud de onda. Estos compuestos se denominan interferencias. Se debe descartar la absorbancia de las interferencias, para ello es necesario hacer siempre una muestra que contenga todos los componentes del sistema menos aquel que se desea medir. Esta muestra se llama blanco y la absorbancia de éste debe restarse a las muestras problema y a los patrones, o bien, con el blanco se calibra el instrumento a absorbancia igual a 0, o sea 100% de transmisión.

Curva de Calibrado :

Se obtiene la curva de calibrado midiendo la absorbancia de una serie de soluciones de concentraciones conocidas de una misma sustancia tratadas con un mismo método y medidas a igual longitud de onda en el mismo instrumento. Para medir la concentración de una sustancia se elige por lo general, la región de máxima absorción del espectro, denominada longitud de onda analítica.

El resultado se expresa en una gráfica de la absorbancia (A) en función de la concentración (c). Si el sistema sigue la ley de Lambert-Beer se obtiene una línea recta que pasa cerca del origen; de cuya pendiente se puede obtener el coeficiente de extinción (a) (Ecuación 1.3).Es posible determinar gráficamente la concentración de una muestra desconocida (cx) midiendo la absorbancia de la muestra (Ax) e interpolando en la curva de calibrado.

Normalmente la concentración se estima, a partir de la ecuación de la curva de calibrado.

A = al c + Ao Ecuación 1.3

3. OBJETIVOS

Cuantificar proteínas presentes en muestras biológicas utilizando técnicas espectroscópicas.

Utilizar soluciones de concentración conocida para elaborar curvas de calibración.

Hallar la concentración de proteínas de una muestra problema utilizando la curvo de calibración.

4. MATERIALES Y METODOS

1 gradilla

Incubadora con termómetro

1 pipeta graduada de 5 ml

1 muestra problema

1 pipeta graduada

Reactivo de Biuret

Espectrofotómetro

1 pipeta graduada de 1 ml

1 Beaker de 100 ml

10 tubos de ensayo

Solución salina al 0.85%

1 pipeteador

Celdas para espectrofotómetro

Patrón de proteínas

Procedimiento

Preparación de la curva de calibración y de las muestras

Para la preparación dede la curva de calibración, marque los tubos

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