Acción Enzimática De La Catalasa En El hígado De Pollo

Practica 1

Acción enzimática de la catalasa en el hígado de pollo

Objetivo:

Determinar el sustrato específico en el cual actúa la catalasa del hígado de pollo y ver las reacciones de esta. Para esto, variaré el sustrato utilizado entre agua oxigenada de diez, veinte y treinta volúmenes.

Materiales:

- Cincuenta gramos de hígado de pollo

- Cincuenta gramos de hígado de res

- Agua oxigenada de diez volúmenes

- Agua oxigenada de veinte volúmenes

- Agua oxigenada de treinta volúmenes

- Termómetro digital (Margen de error ± 1 ºC)

- Balanza digital (Margen de error ± 0,1 g)

- Pipeta (Margen de error ± 0,1 ml)

- Seis tubos de ensayo

- Papel tornasol

- Gradilla

- Pinzas

- Bisturí

- Hielo

- Fuego

Variables:

Variables independientes: agua oxigenada de diez, veinte y treinta volúmenes.

Variables dependientes: La intensidad del burbujeo de O2 ocasionado

Variables fijas: Cinco gramos (aproximadamente) de hígado de pollo, la temperatura (25ºC), el nivel de pH del sustrato (6), cinco mililitros (aproximadamente) de cada sustrato.

Procedimiento

El procedimiento es el siguiente: se vierte 5 mililitros de cada sustrato (agua oxigenada de diez, veinte y treinta volúmenes) en cada uno de los seis tubos de ensayo. A continuación, colocar el hígado de pollo cortado en porciones de aproximadamente 5 gramos en cada uno de los 6 tubos de ensayo. A partir de entonces se podrá notar la reacción química, la cual se deberá de analizar y obtener datos de lo que sucede.

Obtención y procesamiento de datos

Hígado de Pollo

Tabla #1: Intensidad del burbujeo de oxígeno en los diferentes sustratos en temperatura ambiente

Sustrato pH Temperatura en °C Volumen utilizado en ml Cantidad de hígado de pollo empleado en gramos Intensidad del burbujeo de O2

H2O2 de 10 volúmenes 5 Ambiente (25°C) 5 5 Moderado

H2O2 de 10 volúmenes (2do intento) 5 Ambiente (25 °C) 5 5 Intenso

H2O2 de 20 volúmenes 5 Ambiente (25 °C) 5 5 Intenso

H2O2 de 20 volúmenes (2do intento) 5 Ambiente (25 °C) 5 5 Intenso

H2O2 de 30 volúmenes 4 Ambiente (25 °C) 5 5 Intenso

H2O2 de 30 volúmenes (2do intento) 4 Ambiente (25 °C) 5 5 Intenso

Montaje 1: Procedimiento en temperatura ambiente del sustrato y del hígado de pollo

Con el agua oxigenada de 10 volúmenes hubo

un burbujeo O2 moderado en el primer intento y

en el segundo intento un burbujeo de O2 intenso.

Con el agua oxigenada de 20 volúmenes hubo un burbujeo O2 intenso en ambos intentos.

Con el agua oxigenada de 30 volúmenes hubo un burbujeo O2 intenso en ambos intentos.

Tabla #2: Intensidad del burbujeo de oxígeno en los diferentes sustratos en una temperatura de 35°C

Sustrato pH Temperatura en °C Volumen utilizado en ml Cantidad de hígado de pollo empleado en gramos Intensidad del burbujeo de O2

H2O2 de 10 volúmenes 5 35°C 5 5 Moderado

H2O2 de 10 volúmenes (2do intento) 5 35°C 5 5 Moderado

H2O2 de 20 volúmenes 5 35°C 5 5 Muy intenso

H2O2 de 20 volúmenes (2do intento) 5 35°C 5 5 Muy intenso

H2O2 de 30 volúmenes 4 35°C 5 5 Muy intenso

H2O2 de 30 volúmenes (2do intento) 4 35°C 5 5 Muy intenso

El procedimiento fue el mismo que en el montaje 1, sin embargo, se calentaron los sustratos lo cual llevo a que los resultados no fueran los mismos.

Tabla #3: Intensidad del burbujeo de oxígeno en los diferentes sustratos en una temperatura de 10°C

Sustrato pH Temperatura en °C Volumen utilizado en ml Cantidad de hígado de pollo empleado en gramos Intensidad del burbujeo de O2

H2O2 de 10 volúmenes 5 10°C 5 5 Muy intenso

H2O2 de 10 volúmenes (2do intento) 5 10°C 5 5 Muy intenso

H2O2 de 20 volúmenes 5 10°C 5 5 Muy leve

H2O2 de 20 volúmenes (2do intento) 5 10°C 5 5 Muy leve

H2O2 de 30 volúmenes 4 10°C 5 5 Muy intenso

H2O2 de 30 volúmenes (2do intento) 4 10°C 5 5 Muy intenso

El procedimiento fue el mismo que en el montaje 1, sin embargo, se enfriaron los sustratos utilizando hielo, por lo cual los resultados no fueron iguales.

Gráfico #1: Intensidad de burbujeo en las distintas temperaturas a las que se expusieron los sustratos en el caso del hígado de pollo

Tabla #4: Intensidad del burbujeo de oxígeno en los diferentes sustratos suplementados con 2 gramos de NaHCO3

Sustrato pH Temperatura en °C Volumen utilizado en ml Cantidad de hígado de pollo empleado en gramos Intensidad del burbujeo de O2

H2O2 de 10 volúmenes con dos gramos de NaHCO3 9 Ambiente (25°C) 5 5 Intenso

H2O2 de 10 volúmenes con dos gramos de NaHCO3 (2do intento) 9 Ambiente (25 °C) 5 5 Muy intenso

H2O2 de 20 volúmenes con dos gramos de NaHCO3 9 Ambiente (25 °C) 5 5 Intenso

H2O2 de 20 volúmenes con dos gramos de NaHCO3 (2do intento) 9 Ambiente (25 °C) 5 5 Muy intenso

H2O2 de 30 volúmenes con dos gramos de NaHCO3 8 Ambiente (25 °C) 5 5 Intenso

H2O2 de 30 volúmenes con dos gramos de NaHCO3 (2do intento) 8 Ambiente (25 °C) 5 5 Muy intenso

El procedimiento fue el mismo que en el montaje 1, sin embargo, se agregó dos ramos de bicarbonato de sodio a los sustratos utilizando hielo, por lo cual los resultados variaron.

Tabla #5: Intensidad del burbujeo de oxígeno en los diferentes sustratos suplementados con 2 gotas de C3H6O3

Sustrato pH Temperatura en °C Volumen utilizado en ml Cantidad de hígado de pollo empleado en gramos Intensidad del burbujeo de O2

H2O2 de 10 volúmenes con dos gotas de C3H6O3 2 Ambiente (25°C) 5 5 Muy leve

H2O2 de 10 volúmenes con dos gotas de C3H6O3 (2do intento) 2 Ambiente (25 °C) 5 5 Muy leve

H2O2 de 20 volúmenes con dos gotas de C3H6O3 2 Ambiente (25 °C) 5 5 Leve

H2O2 de 20 volúmenes con dos gotas de C3H6O3 (2do intento) 2 Ambiente (25 °C) 5 5 Leve

H2O2 de 30 volúmenes con dos gotas de C3H6O3 1 Ambiente (25 °C) 5 5 Moderado

H2O2 de 30 volúmenes con dos gotas de C3H6O3 (2do intento) 1 Ambiente (25 °C) 5 5 Moderado

El procedimiento fue el mismo que en el montaje 1, sin embargo, se agregó dos gotas de ácido láctico a los sustratos, por lo cual los resultados variaron.

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