Metodos para la identificación de M.O

METODOS PARA LA IDENTIFICAION DE M .O.

Se entiende por identificación microbiana al conjunto de técnicas y procedimientos que se aplican para establecer la identidad de un microorganismo. Estas técnicas se utilizan en diferentes

áreas, por ejemplo:

• En el área clínica donde es de capital importancia conocer cuál es el agente causal de la

infección que presenta un paciente, de manera de poder tratarlo con agentes terapéuticos.

• En la industria farmacéutica, cosmética y de alimentos donde las normas de control de

calidad exigen la ausencia de ciertos microorganismos.

• En investigación básica donde se aísla un determinado microorganismo que debe identificarse

para comprobar si se trata de un microorganismo conocido o de uno nuevo para

poder clasificarlo.

Durante su ejercicio profesional, es muy importante que el farmacéutico conozca el fundamento

de los métodos existentes para la identificación microbiana. En el caso del ejercicio

comunitario, un farmacéutico, por ejemplo puede estar asesorando a un paciente que tiene

una infección bacteriana, y al cual el médico le tomó una muestra para ser enviada al laboratorio

para identificar el agente causal, si el profesional conoce el fundamento y los métodos

de identificación microbiana puede explicarle al paciente la razón por la cual los resultados

de la identificación del microorganismo y su antibiograma puede retrasarse algunos días.

Si se desempeña en el área de producción de medicamentos y cosméticos, la fabricación de

éstos debe realizarse en áreas controladas libres de microorganismos, para evitar la contaminación

del producto, y como consecuencia de ello, se produzca su deterioro, o lo que es

más grave que el producto contaminado le cause una infección a un paciente.

En el caso que el profesional se desempeñe en la industria de medicamentos y/o cosméticos,

debe conocer las normas que rigen la calidad microbiológica del producto a ser elaborado,

los microorganismos objetables y el fundamento de los métodos oficiales para descartar

la presencia de éstos. También en el caso de la industria alimentaria, los alimentos son sometidos

a una serie de controles microbiológicos para asegurar la ausencia de microorganismos

que pueden causar enfermedades y/o descartar la presencia de toxinas capaces de

causar intoxicaciones alimentarias.

Por estas razones, es importante conocer los métodos en los cuales se basa la identificación

microbiana. No todos los microorganismos se identifican por las mismas técnicas. La mayor

parte de los métodos se realizan en un laboratorio y se busca utilizar el menor número de

procedimientos y ensayos posibles.

CLASIFICACIÓN DE LOS MÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN MICROBIANA

Los métodos más utilizados para la identificación microbiana, los podemos clasificar en:

1. Métodos basados en criterios morfológicos

2. Métodos basados en tinción diferencial

3. Métodos basados en pruebas bioquímicas

4. Métodos basados en tipificación con fagos

5. Métodos basados en pruebas serológicas

6. Métodos basados en detección molecular

IDENTIFICACIÓN MICROBIANA

En la mayoría de los casos la identificación no se realiza con base a un solo método, sino a la combinación de más de uno. Ejemplo: identificación de bacterias con base a criterios morfológicos, tinción diferencial, pruebas bioquímicas y serológicas. Antes de proceder a discutir los métodos que se han enumerado, es importante hacer énfasis que para cada uno de ellos se requiere disponer de una muestra. Cuando se requiere identificar un agente que está causando una determinada patología, la muestra debe proceder

del sitio donde el microorganismo está causando el daño, o donde se multiplica. Algunos ejemplos de muestras que se utilizan en microbiología clínica tenemos: heces, orina, hisopado faríngeo, líquido cefalorraquídeo, sangre, lágrimas, semen, fluido vaginal, etc. También pueden utilizarse tejidos. Para aplicar algunos métodos se requiere aislar en forma pura el microorganismo de la muestra, pero para otros no se requiere realizar dicho aislamiento. Con

fines de control de calidad de medicamentos, cosméticos y alimentos, la muestra a ser analizada, puede ser un producto en proceso o terminado.

1. Métodos basados en criterios morfológicos

Los rasgos morfológicos (estructurales) han ayudado a los taxonomistas por muchos años a clasificar organismos. Los organismos superiores tienen rasgos anatómicos tan diferentes que pueden ser fácilmente utilizados en su clasificación, pero con respecto a los microorganismos, éstos lucen bajo el microcoscopio

tan similares que se dificulta su clasificación. Es decir, que estos microorganismos que se ven tan parecidos bajo un microscopio, pueden diferir en propiedades bioquímicas, fisiológicas y/o serológicas. Sin embargo, aun cuando la morfología

celular dice poco sobre las relaciones filogenéticas, sigue siendo útil para la identificación bacteriana. Por ejemplo: la presencia de endosporas y su localización resulta de mucha utilidad en la identificación de bacilos esporulados.

2. Métodos basados en tinción diferencial

Es posible sacar conclusiones en relación con la morfología de una bacteria, examinando una lámina que fue sometida a un proceso de tinción diferencial.

Estos criterios morfológicos encabezan las primeras etapas del proceso de identificación bacteriana. La mayor parte de las bacterias, teñidas con

Gram, las podemos clasificar como gram positivas o gran negativas, otras tinciones diferenciales, como la ácido resistente, se aplican a otro tipo de bacterias, como por ejemplo mico bacterias. Un examen microscópico de una lámina teñida por medio de gran o de una tinción diferencial es útil

para obtener una información rápida sobre la calidad de un ambiente clínico. Por otro lado, un médico también puede obtener suficiente información de un reporte técnico de laboratorio para comenzar el tratamiento apropiado de un paciente.

4. Métodos basados en pruebas bioquímicas

Las pruebas bioquímicas han sido ampliamente utilizadas para diferenciar bacterias. Estas pruebas se fundamentan en demostrar si el microorganismo

es capaz de fermentar azúcares, la presencia de enzimas, la degradación de compuestos, la producción de compuestos coloreados, etc. Aun bacterias fuertemente relacionadas pueden

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