RECONOCIMIENTO EN MATERIAL BIOLOGICO DE LIPIDOS, PROTEINAS Y ADN

Observación:

Se realizó la determinación de los lípidos si eran solubles en distintos solventes como el agua destilada, alcohol, cloroformó, bencina. Las pruebas realizadas fueron la del Sudam III para el reconocimiento de lípidos. Y finalmente se realizó el reconocimiento de Proteínas por medio del reactivo de Biuret.

Problemas:

 ¿En qué disolventes los lípidos fueron disueltos?

 ¿A qué se debe el color que toma la proteína?

Objetivos:

• Reconocer que compuestos orgánicos como los lípidos y proteínas son constituyentes importantes en todos los seres vivos.

Materiales:

• Aceite comestible

• Albúmina al 1%

• Clara de huevo

• Alcohol

• Cloroformo

• Éter etílico

• Sudam III

• Hidróxido de sodio al 40%

• Sulfato de cobre al 1%

• Ácido nítrico concentrado

• Etanol FRIO

• Solución de Lisis: EDTA, SDS, NACl

• Azul de metileno

• 6 Fresas

• Gasas

• Baguetas

• Tubos de 16 x 150 mm.

• Pipetas graduadas de 5 ml.

• Morteros

• Embudos

Procedimiento o experimentación:

 DETERMINACION DE LIPIDOS

A. Solubilidad de los Lípidos

Preparación:

1. Colocamos 2 ml. de Aceite en cuatro tubos de ensayo. Previamente enumeramos los tubos de ensayo

2. Agregamos:

 En el tubo N° 1: 2 ml de agua destilada

 En el tubo N° 2: 2 ml. de Alcohol

 En el tubo N° 3: 2 ml. de cloroformo

 En el tubo N° 4: 2 ml. bencina

3. Observamos que la solubilidad del aceite al 100% es positiva en el cloroformo y bencina pero en el alcohol por un momento se disolvió pero de ahí observamos que el aceite subió y el alcohol se quedó abajo; no es considerado como un disolvente del aceite al 100%.

B. Solubilidad del Sudam III

Preparación:

1. Colocamos 1 ml. de aceite comestible en un tubo de ensayo de 16x150 mm.

2. Luego añadimos 1 ml. de Sudam III en el tubo de ensayo conteniendo el aceite

3. Observamos que tomo una coloración rojiza - anaranjado indicando que la prueba es positiva.

 DETERMINACION DE PROTEINAS

A. REACCION DE BIURET

Preparación:

1. Colocamos 2 ml. de la solución de Albúmina al 1% o solución Clara de huevo al 10% en un tubo de 16x150 mm.

2. Agregamos el reactivo de biuret y lo mezclamos, observando que tomo un color violeta.

Resultado: La formación de una coloración violeta o púrpura indica que la prueba es positiva.

B. REACCIÓN XANTOPROTEÍCA

Preparación:

1. Colocamos 2 ml. de la solución de Albúmina al 1% o Clara de huevo al 10% en un tubo de 16x150

2. Luego pasamos a colocar 2 ml. de ácido nítrico concentrado a el tubo de ensayo conteniendo la albumina.

3. Observamos la formación de un precipitado blanco y pasamos a poner el tubo de ensayo a la flama del mechero de alcohol.

4. Observando que se produjo una coloración amarillenta.

Resultado: La formación de una coloración amarillo - claro evidencia la presencia de proteínas.

CONCLUSIONES:

• Los lípidos son insolubles en agua y solubles en solventes orgánicos como en la bencina y cloroformo.

• Aprendimos que por la reacción del biuret los compuestos que contienen dos o más enlaces peptídicos forman un complejo con las sales de cobre en un medio fuertemente alcalino, dando un color púrpura o violeta al lípido empleado.

Bibliografía:

 http://www.virtual.unal.edu.co/cursos/ciencias/2000024/lecciones/cap01/01_01_13_14.html

 http://composicionquimicadeladn.blogspot.com

 http://es.wikipedia.org/wiki/Proteinuria

 http://es.wikipedia.org/wiki/T%C3%A9cnica_del_sud%C3%A1n_III

Anexos:

1. Por qué los lípidos no se disuelven en el agua pero si en solventes orgánicos

Por la presencia de Ácidos grasos (glicéridos o triglicéridos) saturados e insaturados que forman los tipos de lípidos (simples-compuestos) los solventes orgánicos son moléculas apolares de manera tal que se solubilizan en ellos, en reacción con el agua (molécula polar) tienen apatía o no afinidad por ser ésteres de ácidos grasos con un alcohol llamado glicerina o glicerol.

2. Como se clasifican las proteínas

La clasificación de las proteínas se realiza desde varios puntos de vista, así:

1. SEGÚN SU COMPOSICIÓN:

 Proteínas simples u Holoproteínas: Las cuales están formadas exclusivamente o predominantemente por aminoácidos.

 Proteínas conjugadas: Poseen un componente de proporción significativa no aminoacídico que recibe el nombre de grupo prostético. Según la naturaleza de este grupo consideramos:

 Glicoproteínas:

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