COLORACIÓN EN FRESCO.

OBSERVACIONES EN FRESCO Y COLORACIÓN

Introducción:

El examen en fresco es uno de los procedimientos más simples para observar cualquier microorganismo. Las coloraciones se utilizan para visualizar la morfología. Las coloraciones simples son las que utilizan un solo colorante (Azul de Metileno, Azul de Lactofeno, Violeta de Genciana).

Uno de los aspectos más notables de los microorganismos es su tamaño pequeño. En las bacterias las dimensiones se calculan en unidades de micrómetro (1um = 0.001mm). En cuanto a su forma hay tres tipos distintos; la forma esférica o cocos, alargada o bacilos y las espiraladas o espiroquetas. Cuando los cocos se agrupan en pares se denominan diplococos, si es en cadena, estreptococos y si es en racimos, estafilococos. Estas características morfológicas proporcionan la base principal para su sistematización morfológica.

En cuanto a los hongos pueden presentar la forma redondeada como las levaduras o la forma filamentosa como los mohos. Los virus en cambio solo se visualizan a través del microscopio electrónico por su tamaño menor de 300 nanómetros (1nm = 0.000001mm).

La morfología de las bacterias se puede examinar de dos maneras:

1. Observando los microorganismos vivos sin teñir.

2. Observando los microorganismos muertos, teñidas con colorantes.

Las bacterias vivas son casi incoloras y no tienen suficiente contraste con el agua en el cual están suspendidas. Tiñéndolas se les da contraste en color con respecto al medio que los rodea, con lo cual son más visibles. La morfología bacteriana nos ayuda al diagnóstico, un examen apropiado y cuidadoso de las bacterias nos proporciona una información adecuada (caracterización de la especie). Conociendo que el protoplasma bacteriano tiene el mismo índice de refracción que el agua, es indispensable emplear procedimientos de tinción que permita visualizarlas.

En esta práctica, empezamos recién a tener contacto con las bacterias, se hace pues necesario utilizar colorantes a fin de hacerlas más visibles y que permitan estudiar su morfología.

OBJETIVOS:

• El manejo de cultivos bacterianos para observar las bacterias.
• El fundamento y la técnica de las tinciones más significativas en bacteriología.
• La dificultad de la observación de las preparaciones en fresco y la detección de la movilidad de las bacterias.
• Observar la morfología de las bacterias.

Agua estancada

Materiales y métodos:

Materiales:

• Microscopio
• Lamina
• Laminilla
• Gotero
• Agua estancada

Método:

En el laboratorio se realizó la extracción de agua destilada para la demostración de cómo hacer un preparado en fresco, para ello se realizaron los siguientes pasos:

• Sujete una lámina por los bordes, manteniéndola en posición horizontal
• Con el gotero, coloque sobre la lámina una gota de agua estancada, a continuación colocar la laminilla.
• Lleve el preparado al microscopio y coloque la lámina en el centro de la platina sujetándola con la pinza.
• Abrir completamente el diafragma
• Colocar el objetivo de 40 x en posición de observación.
• Accione el tornillo micrométrico hasta lograr imagen en el campo microscópico; luego accione el micrométrico hasta lograr imagen nítida.

Resultado:   [pic 1]

                                             [pic 2]

Coloración Gram

Materiales y métodos:

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