Intoxicación Por Azaspiracida En Mariscos.

Intoxicación por azaspiracida en mariscos (AZP)

Por lo menos ocho personas enfermaron en los Países Bajos en noviembre de 1995, luego de consumir

mejillones (Mytilus edulis) cultivados en Killary Harbour, Irlanda. Aunque los síntomas recordaban

los de las intoxicaciones diarreicas por mariscos (DSP) las concentraciones de las principales toxinas

DSP eran muy bajas (McMahon y Silke, 1996; Satake et al., 1998a). No se observaron en las muestras

de aguas entonces recogidas los organismos conocidos como productores de toxinas DSP. Además, se

observó en el bioensayo en ratón usando los extractos de mejillones, una parálisis lenta y progresiva.

Estos síntomas neurotóxicos eran muy diferentes de los provocados por las intoxicaciones típicas con

DSP (Satake et al., 1998a). Se identificó así la azaspiracida (antes llamada Killary Toxin-3 o KT3) y

el nuevo síndrome tóxico pasó a denominarse intoxicación por azaspiracida (AZP por sus siglas en

inglés).

6.1 Estructuras químicas y propiedades de la azaspiracida

Satake et al. (1998b) aclararon la estructura de la azaspiracida resultante en intoxicaciones en seres

humanos causadas por el consumo de mejillones irlandeses contaminados. La azaspiracida se extrajo

de carne entera de mejillones contaminados presentándose como un sólido amorfo sin color y sin

absorción máxima en el UV por encima de 210nm. Se aislaron, además de la azaspiracida (AZA),

cuatro análogos, AZA 2 a AZA5 y se establecieron sus estructuras químicas (ver Figura 6.1). Ofuji et

al. (1999a) identificaron las azaspiracida-2 (AZA-2) y la azaspiracida-3 (AZA-3) y demostraron que

estos compuestos eran, respectivamente la 8-metilazaspiracida y la 22-demetilazaspiracida. Ofuji et al.

(2001) determinaron la estructura de otros dos análogos de la azaspiracida encontrados en mejillones,

la azaspiracida-4 (AZA-4) y la azaspiracida-5 (AZA-5), demostrando que eran respectivamente 3-

hidroxi-22-demetilazaspiracida y 23-hidroxi-22-demetilazaspiracida, (es decir análogos hidroxilados

de la AZA-3). Al momento no se dispone de datos experimentales que permitan conocer si las toxinas

experimentan modificaciones estructurales, y como en los mariscos. Por analogía con las

pectenotoxinas y las yesotoxinas, que por hidroxilación sufren modificaciones estructurales en

mejillones, puede suponerse que la AZA-4 y la AZA-5 son metabolitos oxidados de la AZA-3. Por

tanto probablemente, las AZA, AZA-2 y AZA-3 son productos genuinos del organismo marino

causante. La azaspiracida fue considerada como el agente principal causante (Satake et al, 1998b).

Las azaspiracidas difieren de cualquier otra toxina nitrogenada previamente conocida en mariscos o

dinoflagelados (por ej. prorocentrolida, pinnatoxina, gimnodimina y las espirolidas). Los anillos de las

azaspiracidas (AZAs) poseen disposiciones únicas, una amina cíclica en lugar de un grupo imino

cíclico, sin anillo carbocíclico o de lactona (Satake et al., 1998b).

Dounay y Forsyth (2001) realizaron estudios de síntesis de las azaspiracidas en el rango C5 – C20 para

identificar estos sub-fragmentos.

Satake et al. (1998b) informaron que los extractos de mejillones no mostraban una disminución

significativa de la toxicidad al calentarlos a 5 o

C durante 150 minutos en soluciones 1,0 N de ácido

acético/metanol o 1,0 N de hidróxido de amonio y que no tenía lugar un cambio significativo de la

toxicidad de la solución durante su almacenamiento. Se supone, entonces, que las AZAs son

compuestos relativamente estables. 174

Figura 6.1 Estructuras químicas de las azaspiracidas

O

HO

O R1

5

10

15

O

40 35

30

25

20

R2

3

HC

H

HO

H

OH

R3

CH3

R4

H

O

O

O

O

O

H

CH3

H

H

3

HC

CH3

N

H

O

A

B

C D

E

F

G

H

I

H

azaspiracid (AZA) H H CH3

H

azaspiracid-2 (AZA2) H CH3

CH3

H

azaspiracid-3 (AZA3) H H H H

azaspiracid-4 (AZA4) OH H H H

azaspiracid-5 (AZA5) H H H OH

R1

R2

R3

R4

6.2 Métodos de análisis

6.2.1 En general

Debe prestarse atención a la posible aparición conjunta en mejillones de OAs, PTXs y YTXs. Se notó

en mejillones recogidos en Noruega la coexistencia de estas toxinas con la AZA (Yasumoto y Aune,

datos sin publicar en EU/SANCO, 2001).

Se recomienda, en consecuencia, buscar estas toxinas por CL o por CL/EM. Se notó la presencia de

toxina(s) desconocida(s) en mejillones en brotes de AZP, aunque a niveles bajos (alrededor del 12 por

ciento de la toxicidad total). Los ratones inyectados con esta toxina desconocida mostraban

inmediatamente agitación, parálisis y convulsiones del tipo PSP previas a la muerte. Además de

presentar estos síntomas en ratones, las propiedades cromotagráficas de la toxina desconocida eran

diferentes de las de las toxina AZP (probablemente la toxina carece de parte ácida). Los ratones

inyectados con esta toxina morían al cabo de 30 minutos. Los ratones sobrevivientes se recuperaron

rápidamente. No hay datos actualmente disponibles que permitan saber si la toxina(s) desconocida

alcanza un nivel lo suficientemente elevado como para interferir con los resultados del bioensayo en

ratón (EU/SANCO, 2001).

6.2.2 Bioensayos

ensayos in vivo

bioensayo en ratón

Los ratones se inyectan intraperitonealmente con extractos de mejillones igual que en los

inmunoensayos para determinar DSP. Los resultados sugieren que las azaspiracidas pueden extraerse

de la carne cruda con acetona debido a una mayor solubilidad por la presencia de agua y lípidos en la

carne (EU/SANCO, 2001). La respuesta a la azaspiracida se caracteriza por saltos y rascarse de los 175

ratones, con una parálisis progresiva atípica para la DSP (Flanagan et al., 2000; Satake et al., 1998a).

El menor tiempo que tardaron en morir los ratones fueron 35 minutos (a seis veces de la dosis letal) y

el más prolongado 30 horas y 46 minutos (EU/SANCO, 2001). Habitualmente, las toxinas de poliéter

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