CULTIVO Y ANTIBIOGRAMA
Enviado por • 3 de Mayo de 2014 • 4.647 Palabras (19 Páginas) • 652 Visitas
CULTIVO Y ANTIBIOGRAMA
RESULTADOS DE APRENDIZAJE: Conocer los medios de cultivo y su composición, saber cuándo pedir e interpretar las pruebas de susceptibilidad a los antibacterianos
MEDIOS DE CULTIVO
OBJETIVOS:
• Fomentar el conocimiento y uso de los medios de cultivo bacterianos.
• Incentivar la correlación del crecimiento y metabolismo bacteriano con la fisiopatología de la enfermedad.
• Crear cultura de diagnóstico en base a la identificación de género y especie causantes de una patología infecciosa.
INTRODUCCIÓN:
El cultivo es el proceso de crecimiento de microorganismo mediante la toma de bacterias de un sitio de infección por métodos de recolección de muestra y crecimiento en un medio artificial en el laboratorio.
Las bacterias tienen necesidades nutricionales que incluyen diferentes gases, agua, electrolitos, nitrógeno, fuentes de carbono, proteínas, pH, colorantes, humedad.
Si un medio de cultivo cubre los requerimientos de una célula bacteriana, ésta se multiplicará en cantidades suficientes para permitir la visualización a simple vista.
Los medios de crecimiento son utilizados en dos fases: líquida (caldo) o sólida (agar) Fig. 1. En los medios líquidos los nutrientes se disuelven en agua y el crecimiento bacteriano se manifiesta con un cambio en el aspecto del caldo, de límpido a turbio, se requiere por lo menos de 106 bacterias para que la turbidez se observe a simple vista.
Los medios sólidos se elaboran agregando un agente solidificante a los nutrientes y al agua. La agarosa es el agente solidificante más común. El agar contenido en la placa de Petri se denomina agar placa.
En las condiciones de incubación adecuadas, cada bacteria inoculada proliferará lo suficiente para ser observada a simple vista y se le conoce como colonia. Todas las células bacterianas dentro de una colonia son del mismo género y especie, lo que otorga características genéticas y fenotípicas idénticas, es decir un clon. Los cultivos bacterianos derivados de una sola colonia o clon se denominan puros.
Fig. 1 Medios de cultivo
Sólidos Semi sólidos Líquidos
CLASIFICACIÓN Y FUNCIONES DE LOS MEDIOS
Los medios se clasifican de acuerdo a su función y uso: enriquecimiento, apoyo, selectivo y diferencial.
• Medios de enriquecimiento: contienen nutriente específicos requeridos para el desarrollo de determinados patógenos que pueden estar presentes solos o con otras especies bacterianas en una muestra del paciente. Este tipo de medios se utiliza para favorecer el desarrollo de un determinado patógeno.
• Medios de apoyo: contienen nutrientes que favorecen el desarrollo de la mayoría de los microorganismos sin requerimientos especiales.
• Medios selectivos: Contienen uno o más agentes que inhiben todos los microorganismos excepto los que son buscados. Los agente inhibidores utilizados para este propósito son colorantes, ácidos biliares, alcoholes, ácidos y antibióticos.
• Medios diferenciales: emplean factores que permiten que las colonias de una especie exhiban ciertas características metabólicas o de cultivos que puedan utilizarse para diferenciarles de otras bacterias que crecen en el mismo agar placa.
Principales medios de cultivo utilizados
Infusión cerebro corazón BHI Agar chocolate
Columbia CNA con sangre Agar Hektoen entérico
Agar MacConkey Agar sangre de cordero
Aga Thayer Martin Caldo tioglicolato
Agar bilis esculina Agar con triosulfato y sales biliares TCBS
Agar eosina azul de metileno EMB Agar Salmonella – Shigella
REQUERIMIENTOS AMBIENTALES:
Los factores ambientales más importantes son la disponibilidad de oxígeno, dióxido de carbono, temperatura, pH, humedad del medio y atmósfera.
1. Disponibilidad de oxígeno y dióxido de carbono: Las bacterias pueden ser aerobias, usan el oxígeno como un aceptor de electrones y se desarrollan bien en el ambiente. La mayoría de bacterias de interés clínico son anaerobios facultativos, capaces de crecer en presencia (aerobios) o ausencia (anaerobiosis) de oxígeno. Otras bacterias aerobias requieren niveles bajos de oxígeno y se denominan micro aerófilas. Las bacterias anaerobias son incapaces de utilizar oxígeno. La disponibilidad de CO2 es importante para el desarrollo de ciertas bacterias, así las que se desarrollan con concentraciones elevadas de CO2 de 5 – 10% se denominan capnófilos.
2. Temperatura: Los patógenos bacterianos se desarrollan a temperaturas similares a la de los tejidos y órganos internos de los humanos, por lo tanto las estufas de incubación se colocan entre 35 – 37º C, pudiendo existir variantes con mayor o menor temperatura.
3. pH: Los patógenos clínicos prefieren un rango de 6,5 a 7,5.
4. Humedad: La pérdida de agua de los medios puede ser perjudicial para el crecimiento bacteriano ya que existe una menor cantidad de agua disponible para las reacciones metabólicas o un aumento relativo de la concentración de soluto en los medios, lo que puede provocar un shock osmótico de la bacteria y causar su lisis.
AISLAMIENTO DE BACTERIAS A PARTIR DE MUESTRA:
Para favorecer el crecimiento, aislamiento y selección de los agentes etiológicos, los inóculos de la muestra se siembran sobre la superficie de las placas respetando un patrón estándar, de modo que se obtengan colonias separadas y pueda realizarse un análisis semicuantitativo.
La evaluación inicial de la morfología de la colonia proporciona a los médicos información preliminar con respecto a los resultados del cultivo del paciente.
Las características de la colonia nos permite la identificación bacteriana al igual que el éxito o fracaso de los procedimientos posteriores de identificación.
Los criterios utilizados para caracterizar el crecimiento bacteriano son: tamaño de la colonia, pigmentación, forma de la colonia (forma, elevación y bordes de la colonia), aspecto de la forma de la colonia (brillante, opaca, roma, transparente), olor, color (como resultado de crecimiento bacteriano, hemólisis, cambios en el color de los indicadores de pH) Fig. 2.
ANTIBIOGRAMA
Objetivos:
• Explicar cómo cada grupo de agentes antimicrobianos actúa sobre estructuras clave o rutas metabólicas en las
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