Contro De Calidas En Serologia

INTRODUCCION

El área de serología en los bancos de sangre es una de la mas importantes ya que de estas dependen que a las bolsas les den destino final. Los principales problemas que hemos detectado en el desarrollo de estos programas de control de calidad externos en serología son:

• Contaminación de las muestras, generando falsos positivos, que puede ocurrir como consecuencia de falla humana o debido a los instrumentos o equipos que son utilizados.

• Errores en la transcripción de los resultados, que son muy frecuentes.

• Fallas en la sensibilidad o especificidad de los kits utilizados.

• Cuando los procedimientos de control de calidad interno son inadecuados, pueden interferir en los resultados

El tamizaje de las unidades de sangre donadas, representa una de las estrategias en busca de contar con sangre segura y disponible, acompañándose esta con una adecuada selección de donantes de bajo riesgo y que por tanto corresponden a voluntarios habituales. Al contar en conjunto con estas condiciones se logra reducir la prevalencia de Infecciones Trasmitidas por Transfusión y a su vez reduce las pérdidas de la sangre y sus componentes a causa de la reactividad, logrando una mayor disponibilidad y eficiencia de la red de bancos de sangre.

El tamizaje de las unidades donadas y la segregación de la sangre y componentes sanguíneos con

resultados reactivos, constituyen algunos de los puntos críticos que deben ser controlados dentro del banco de sangre con el objetivo de disminuir el riesgo de trasmisión de enfermedades infecciosas por transfusión.

El control de calidad es un conjunto de acciones que se aplican durante la ejecución de una prueba para asegurar que los resultados, productos o servicios pueden ser entregados, siendo su objetivo principal la mejora continua de los procesos. Los bancos de sangre tienen la responsabilidad de asegurar la calidad de la sangre, evitando liberar componentes sanguíneos que pudieran ser fuente de infecciones transmitidas a través de transfusión sanguínea. Es por esto que deben realizar el tamizaje serológico en los donantes de sangre para la identificación de marcadores de eventos asociados a infección transfusional y que están definidos por el ente rector nacional, de acuerdo a los estudios epidemiológicos de la población.

En este marco, deben poseer un programa interno de calidad para asegurar que los reactivos, equipamientos y métodos funcionen adecuadamente, dentro de los estándares establecidos por el banco de sangre. De igual manera deben evaluar su eficiencia, a través de la participación en Programas Externos de Calidad.

OBJETIVO

Implementar un programa de control de calidad interna en los bancos de sangre es de gran importancia, pero implementar el control de calidad en serología. Serología es un área de gran importancia. Los estudios serológicos necesarios de todos los donadores recibidos por el banco de sangre, con la intención de obtener productos sanguíneos de calidad, con la finalidad de evitar la presencia de reacciones transfusionales o la presencia de anticuerpos irregulares, así como prevenir la transmisión de enfermedades por transfusión sanguínea.

METODOLOGIA Y TECNICAS DE AREA

a) Procedimientos de las pruebas en serología de infecciones hemotransmisibles

En serología se analizan las pruebas de tamizaje VIH, HTLV ,hepatitis B y C, Chagas, Brucella y sífilis. Utilizando pruebas que detecten anticuerpos, o en su defecto combo que detectan al mismo tiempo antígenos y anticuerpos.

TAMIZAJE UTILIZADO EN SEROLOGIA

Virus de la inmunodeficiencia humana HIV Anti-HIV Ac/ Ag p24 HIV RNA

Virus linfotrópico de las células T humano HTLV I/II Anti-HTLV

Virus de la hepatitis B HBV AgHBs Anti-HBs HBV DNA

Virus de la hepatitis B HCV Anti-HCV Ac/Ag core HCV RNA

Trypanosoma cruzi CHAGAS Anti-T. cruzi

Treponema pallidum SIFILIS VDRL/RPR

Anti-T.pallidum

b) Pruebas a realizar

Dentro de las pruebas que se realizan de rutina y/o tamizaje en el laboratorio se encuentran:

ENSAYO PARA DETENCION DE: PRUEBA DE RUTINA

Anticuerpos contra Chagas ELISA

Anticuerpos contra Chagas HAI

Antígeno de Superficie de Hepatitis B ELISA

Anticuerpos contra HCV ELISA

Anticuerpos contra HIV 1y 2 ELISA

Anticuerpos contra Sifilis VDRL O RPR

Anticuerpos contra Brucela Antígeno Rosa de bengala

En caso de salir reactivo la prueba de tamizaje, se procede con la realización de la prueba confirmatoria o suplementaria de las cuales se realizan las siguientes:

MARCADOR CONFRIMATORIA

CHAGAS HAI 2B – MERCAPTO ETANOL

HBV NEUTRALIZACION

HCV INMUNOBLOT RIBA HCV

HIV WESTERN BLOT HIV-1

HIV WESTERN BLOT HIV-2

SIFILIS TP-PA ELISA

SIFILIS TP-PA HAI

BRUCELA ANTIGENO BLANCO

Procedimiento de la Técnica de ELISA

a) Determinar el número total de pocillos teniendo en cuenta todos los controles que indica el inserto del kit y control de calidad interna. Retire las tiras necesarias.

b) Dispensar los microlitros indicados (según el inserto) de sueros controles positivos y negativos, sueros problema y sueros control interno en los respectivos micropocillos, mezclar suavemente.

c) Incubar a la temperatura indicada por el tiempo necesario, generalmente en esta etapa se cubren los micropocillos con papel adhesivo que acompaña al kit, para evitar su evaporación.

d) Retirar el material adhesivo y proceder con los ciclos de lavado teniendo en cuenta el volumen dispensado y el tiempo de remojo indicados en el instructivo. Después del último lavado secar la microplaca sobre un papel absorbente dándole pequeños golpes para remover cualquier exceso de líquido de los pocillos.

e) Colocar la cantidad necesaria de conjugado en cada pocillo, la dilución del conjugado debe realizarse durante el último ciclo de lavado.

f) Cubrir la placa con el papel adhesivo e incubar a la temperatura indicada por el tiempo necesario.

g) Retirar el material adhesivo y proceder con los ciclos de lavado de acuerdo al paso 4.

h) Durante el lavado prepare el volumen requerido de la solución substrato-cromógeno, la cual debe estar a temperatura ambiente y debe ser incolora, si se observa alguna coloración descartar la solución.

i) Colocar la cantidad necesaria de substrato en cada pocillo e incubar en oscuridad a temperatura ambiente por el tiempo indicado.

j) Detener la reacción agregando la cantidad indicada de solución de parada en la misma secuencia que se agregó

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